琥珀酰壳聚糖是壳聚糖经一定的化学修饰改性后所得,具有良好的生物相容性、柔韧性和成膜性,有 一定的止血、抑菌和抗炎作用,且可促进创伤组织的再生、修复和愈合,无刺激性,无致敏性,安 全无毒<1>。本文以琥珀酰壳聚糖为主要成分研制了琥珀酰壳聚糖人工泪液,并通过性状、鉴别 、检查、含量测定研究,建立了可控制其内在质量的方法,经临床试用疗效确切,无明显不良反应。1材料琥珀酰壳聚糖,相对分子质量(Mr)为600000,取代度为0.65,中国科学院兰州化学物理研究所;琥珀酰壳聚糖人工泪液,兰州大学第 二医院自制;处方药物均符合《中国药典》2005版二部标准;其余试剂均为分析纯。纯种新西兰白兔6只,体重2.5~3.Okg,4~5月龄,雌雄各半,分笼饲养,兰州大学实验动物中心提供,合格证号:甘医动字第14-005。2处方和制备工艺2.1处方琥珀酰壳聚糖5 g,氯化钠8.5 g,氯化钾0.14 g,氯化钙0.42 g,葡萄糖1 g,碳酸氢钠0.2 g,尿素0.2g,注射用水适量。2.2制备工艺取注射用水约400 mL,将琥珀酰壳聚糖均匀撒于水面使其自然溶胀,待完全溶解,混匀。另取注射用水500 mL,依次加入氯化钙、氯化钠、碳酸氢钠、氯化钾和葡萄糖,搅拌使其溶解。取上述溶液与琥珀酰壳聚糖溶液混合,滤过,自滤器加注射用水使成1 000 mL,混匀,115℃高压灭菌5 min,放冷,无菌分装,即得。3质量控制3.1性状本品为无色或微黄色的微黏稠澄明液体。3 .2鉴别本品显钠盐、钙盐、钾盐、碳酸氢盐和氯化物<2>的鉴别反应。3.2.1葡萄糖取本品2滴,加胶体硫溶液(取硫代硫酸钠0.5g溶于硫酸10 mL中,然后再加硫酸至25 mL,混匀,即得)0.5 mL,数分钟后显现淡红紫色。3.2.2琥珀酰壳聚糖取本品适量,加入碘-碘化钾试液,在缓缓 振摇下,逐滴加入10%的氢氧化钠溶液,使碘的颜色由深褚色退至棕色,放置10~20min,将其置于60℃水浴中加热5~10min,冷后,用少量蒸馏水稀释,静置,即有浅黄色沉淀产生。3.3检查3.3.1 pH值按pH值测定法<2>,应为6.5~7.6。3.3.2渗透压摩尔浓度测定按渗透压摩尔浓度测定法<2>测定,应为280~310 mOsm/L。3.3.3无菌检查按无菌检查法<2>,应符合规定。3.3.4黏度测定按黏度测定法<2>测定,应为4.0~4.3 cPa·s。3.3.5其它应符合眼用制剂<2>项下各有关规定。3.4含量测定总氯量精密量取本品5 mL,加水10 mL,铬酸钾指示液1滴,用硝酸银液(0.1 mol/L)滴定至淡红色沉淀,即得。每1 mL硝酸银液(0.1 mol/L)相当于3.545 mg的氯。本品含总氯量以氯计应为0.51~0.57%(g/mL)。经对6批琥珀酰壳聚糖人 工泪液含量进行测定,结果显示,总氯量在0.53~0.57%之间,符合规定。3.5兔眼刺激性试验按文献<3>方法,取健康新西兰白兔6只,雌雄不限,在试验前24h检查双眼,轻轻拉开眼睑,分别将琥珀酰壳聚糖人工泪液滴入左眼结膜囊内,然后轻合眼睑约1 s,每次0.1 mL,4次/d,连续给药7 d;0.9%生理盐水作为对照滴入右眼结膜囊内,给药方法及时间相同。于1,2,3,4,5,6,7 d分别观察结膜、角膜和虹膜眼刺激反应。结果表明,受试兔眼无结膜、角膜和虹膜混浊、无充血、 无水肿、无羞明等,眼刺激性评分为0~3分,证明本品对兔眼无刺激性。4讨论壳聚糖及其衍生 物的定量方法主要有脱乙酰度测定法<4>、取代度测定法<5>、氨基葡萄糖测定法<6>,但 因定量误差较大,准确性差,不易操作,均未作为标准方法使用。琥珀酰壳聚糖的定量方法尚在研 究之中。氯化物在本品中含量最高,故确定总氯量作为本品的定量方法是可行的,符合相关技术要 求。本品处方设计最大限度地降低了各种附加成分对角膜上皮的损伤作用,从成分和性状等方面使 人工泪液接近自然泪液,离子成分接近自然泪液的离子组成和浓度,含有模拟黏蛋白成分琥珀酰壳 聚糖,黏度接近自然泪液的黏度,不会造成黏眼和视力模糊。由于琥珀酰壳聚糖本身具有抑菌作用 ,因而本品未加抑菌剂。本品中加入尿素,在于软化角膜、湿润眼球,起到良好的保湿作用。选择 NaHCO3作为人工泪液的缓冲物质,可使角膜上皮的通透性基本恢复正常,这可能是因为碳酸 氢钠本身就是自然泪液的组成成分。氯化物电解质和葡萄糖对眼角膜、结膜和虹膜具有调节、营养 作用。兔眼刺激性试验表明本品无刺激性,有关本品的临床治疗研究,将另文进一步报道。琥珀酰 壳聚糖人工泪液的制备及质量控制@李平$中国科学院兰州化学物理研究所!甘肃兰州730000,兰州大学第二医院,甘肃兰州730030,中国科学院研究生院,北京100039
@刘铭佩$兰州大学第二医院!甘肃兰州730030
@王爱勤$中国科学院兰州化学物理研究所!甘肃兰州730000
@汪琴$中国科学院兰州化学物理研究所!甘肃兰州730000目的研制琥珀酰壳聚糖人工泪液, 并建立其质量控制方法。方法以琥珀酰壳聚糖为主要成分制备琥珀酰壳聚糖人工泪液。通过性状、 鉴别、检查、含量测定研究制定其质量控制方法。结果此品处方组成适合干眼症生理及治疗要求, 制备工艺符合滴眼剂质量要求。性状、鉴别、检查、含量测定方法可作为该制剂质量控制方法。结 论此品处方组成合理,制备工艺可行,符合滴眼剂质量要求,质量控制方法能够控制该制剂内在质 量。琥珀酰壳聚糖;;人工泪液;;制备;;质量控制<1>马宁,汪琴,孙胜玲,等.甲壳素和壳聚糖化学改性研究进展
.化学进展,2004,(4):643-653.
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