复方阿昔洛韦凝胶是兰州大学第二医院自制制剂,系采用水溶性敷料卡波姆-940为主要基质,阿 昔洛韦、双氯芬酸钠为主药而制成,主要用于治疗带状疱疹,临床疗效较好。该制剂稠度适宜,无 油腻性,易于涂抹。为有效控制其质量,笔者建立了以高效液相色谱(HPLC)法同时测定复方 阿昔洛韦凝胶中阿昔洛韦及双氯芬酸钠含量的方法。现将其处方与工艺、质量控制方法报道如下。 1材料阿昔洛韦(湖北潜江制药厂,批号:980615);阿昔洛韦对照品(中国药品生物制品 检定所,批号:630-200001);双氯芬酸钠(山东茺州制药厂,批号:2004061 2);卡波姆-940(上海申兴制药厂,批号:20021213);羟苯乙酯(广东台山新宁 制药厂,批号:20041115);三乙醇胺(天津化学试剂厂,批号:19900114); 甘油为药用,甲醇为色谱纯。1100系列高效液相色谱仪,包括G1312A二元泵、G131 5A/B紫外检测器、G1316A色谱柱温箱、G2170AA色谱工作站和7725进样阀( 美国安捷伦公司);TIV托盘扭力天平(上海第二天平仪器厂);CQ50超声波清洗器(上海 超声波仪器厂);电子分析天平(德国赛多利斯仪器系统有限公司)。2处方与制备2.1处方阿 昔洛韦5g,双氯芬酸钠1g,卡波姆-9401g,甘油7.5g,三乙醇胺1.35g,氮酮 1g,羟苯乙酯0.1g,95%乙醇15ml,蒸馏水加至100g。2.2制备<1>取处方 量卡波姆-940,加入适量蒸馏水使其充分溶胀。取阿昔洛韦适量,用0.1mol/L的Na OH溶解,加入甘油7.5g,搅拌均匀后,加入已溶胀完全的卡波姆基质中;另取三乙醇胺用适 量的水溶解,加入上述基质中搅拌均匀。另取处方量双氯芬酸钠、氮酮、羟苯乙酯,用适量乙醇溶 解,加入上液中搅拌至均匀。最后加入蒸馏水至100g,搅拌均匀,即得。3
质量控制3.1性 状及pH值检查<2>本品为乳白色细腻半固体物质。取本品0.5g,加入蒸馏水10ml稀释 后,测pH值应在6.0～7.0之间。3.2含量测定3.2.1色谱条件。色谱柱:ZORB AX-SB-C18(150mm×4.6mm);
流动相:甲醇-水-36%冰醋酸(70∶3 0∶2);流速:0.8ml/min;柱温:室温;进样量:20μl;检测波长:260nm 。3.2.2溶液的配制。(1)对照品溶液:精密称取105℃干燥至恒重的阿昔洛韦对照品0 .10846g,双氯芬酸钠对照品0.08602g,分别置于100、50ml量瓶中,加入 流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得阿昔洛韦对照品溶液Ⅰ、双氯芬酸钠对照品溶液Ⅱ,两液按 5∶1比例混合即得对照品溶液。(2)样品溶液的配制:称取样品0.56g,置于50ml量 瓶中,用流动相溶解并定容。取稀释液1ml,用流动相定容至10ml量瓶中,摇匀,过滤,即 得样品溶液。(3)空白溶液的配制:照样品制备方法配制不含阿昔洛韦、双氯芬酸钠的空白基质 ,称取空白基质0.56g,置于50ml量瓶中,用流动相溶解并定容。取稀释液1ml,用流 动相定容至10ml量瓶中,摇匀,过滤,即得空白溶液。
对照品、空白品、样品3种溶液的色谱 详见图1。3.2.3线性关系考察。精密吸取阿昔洛韦对照品Ⅰ溶液10ml,置于50ml量 瓶中,加入流动相稀释至刻度。精密吸取阿昔洛韦稀释液1.0、2.0、3.0、5.0、7. 0ml,置于25ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。精密吸取双氯芬酸钠对照品Ⅱ溶液2 .0ml,用流动相定容至50ml量瓶中,摇匀。精密吸取双氯芬酸钠稀释液0.5、1.0、 3.0、4.0、5.0ml,置于10ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。过滤后,照“ 3.2.1”项色谱条件分别进样20μl,测定峰面积。以峰面积(A)为纵坐标,浓度(C) 为横坐标,进行线性回归:阿昔洛韦检测浓度在8.6768～60.7376μg/ml范围内 线性关系良好,回归方程A=76.901487C+41.0197399(r=0.9997 );双氯芬酸钠检测浓度在3.4408～34.408μg/ml范围内线性关系良好,回归方 程A=32.7261269C—8.04183858(r=0.9996)。3.2.4精密 度考察。(1)日内精密度:取样品0.56g,置于50ml量瓶中,用流动相溶解并定容。取 稀释液1ml,用流动相定容至10ml量瓶中,照“3.2.1”色谱条件于0、4、8h时分 别进样1次,结果阿昔洛韦的含量平均测定值为56.3065μg/ml,回收率为100.5 4%,RSD=0.728%;双氯芬酸钠的含量平均测定值为11.0603μg/ml,回收 率为98.75%,RSD=0.991%。(2)日间精密度:取上述样品液,隔日重复进样3 次,结果阿昔洛韦的含量平均测定值为56.2433μg/ml,回收率为100.43%,R SD=1.1053%;双氯芬酸钠的含量平均测定值为11.0836μg/ml,回收率为9 8.96%,RSD=1.41%。3.2.5稳定性试验<3>。取样品溶液(批号:0505 08),于0、1、2、4、8h时分别进样20μl,测得样品中阿昔洛韦的RSD=1.46 %,双氯芬酸钠的RSD=0.986%。3.2.6回收率试验。精密吸取高、中、低系列浓度 的阿昔洛韦、双氯芬酸钠对照品溶液适量,加入到0.56g空白样品中,研匀,照“3.2.7 ”项下方法测定。测量峰面积,按回归方程计算2组分含量,计算回收率。结果,阿昔洛韦平均回 收率为104.345%,RSD=1.05%;双氯芬酸钠平均回收率为98.92%,RSD =1.19%。回收率试验结果详见表1。表1回收率试验结果(n=3)Tab1Determ inationresultsofrecoverytest(n=3)组分投入量(μg/m l)测得量(μg/ml)回收率(%)RSD(%)
阿昔洛韦43.38445.056103 .8534.70736.689105.711.0526.03026.030103.47 双氯芬酸钠8.6778.56998.766.9416.85598.801.195.20 65.16499.203.2.7样品含量测定。精密称取样品0.56g,置于50ml量瓶 中,用流动相溶解并稀释至刻度,取稀释液1ml,用流动相定容至10ml量瓶中,照“3.2 .1”项下色谱条件重复进样3次,含量测定结果详见表2。表2样品含量测定结果(n=3)T ab2Contentdeterminationresultsofsamples(n=3 )批号阿昔洛韦(μg/ml)双氯芬酸钠(μg/ml)2005031557.77311. 12062005042456.00210.98422005050857.7711.11 904讨论基质的选用<4>:卡波姆系丙烯酸与聚烷基季戊四醇交联的高分子聚合物,其分子中 含有大量羧基及羟基,其1%水溶液pH值约为3,形成的水凝胶pH值在6～12时外观粘稠、 稳定。检测波长的选择:笔者经查文献<1>发现,阿昔洛韦在254nm波长处有最大吸收;双 氯芬酸钠<2>在260nm波长处有最大吸收。由于本制剂中阿昔洛韦与双氯芬酸钠的质量比是 5∶1,故选择双氯芬酸钠的最大吸收波长260nm为检测波长,以提高双氯芬酸钠的检测灵敏 度。流动相的选择:笔者在试验中曾试用多种不同的流动相,结果表明,以甲醇-水-36%的冰 醋酸(70∶30∶2)为流动相时分离效果最好,2组分分离度好,重现性好,且可排除其它组 分的干扰。阿昔洛韦的溶解<1>:阿昔洛韦在水中的溶解性很小(2.5mg/ml),因此在 制备凝胶时其溶解性不好。由于其钠盐易溶于水,5%的水溶液pH=11,pH值下降可析出沉 淀,故先用0.1mol/LNaOH溶解,再加入到凝胶中,可使阿昔洛韦分布均匀,也可使卡 波姆凝胶稠度适宜,易于涂布。本制剂中主要成分阿昔洛韦为化学合成的一种抗病毒药,是防治单 纯疱疹病毒感染的首选药,还可用于带状疱疹病毒感染,治疗生殖器疱疹、皮肤病等,效果明显。双氯芬酸钠为非甾体抗炎药,起效快,通过抑制前列腺素的合成而产生镇痛、抗炎、解热作用。二者配伍制成凝胶用于治疗带状疱疹,既能针对图1高效液相色谱A.对照品;B.空白品;C.样品;1.阿昔洛韦;2.杂质;3.双氯芬酸钠Fig1HPLCA.referencesubstance;B.blank;C.sample;1.acic lovir;2.impurity;3.diclofenacsodium病因起治疗作用, 又能减轻带状疱疹带给患者的疼痛,并且局部应用不良反应较小,安全性较好。复方阿昔洛韦凝胶的制备及质量控制@刘铭佩$兰州大学第二医院药剂科!兰州市730030
@朱恒$兰州大学第二医院药剂科!兰州市730030
@陈伟$兰州大学医学院药学系!兰州市730030
@王金霞$兰州大学医学院药学系!兰州市730030目的:制备复方阿昔洛韦凝胶并建立其质量 控制方法。方法:以阿昔洛韦、双氯芬酸钠为主药,卡波姆-940等为基质制备凝胶;色谱柱为 ZORBAX-SB-C18,流动相为甲醇-水-36%冰醋酸(70∶30∶2),检测波长 为260nm。结果:所制凝胶为乳白色细腻半固体物;阿昔洛韦检测浓度在8.6768～60 .7376μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为104.34% ,RSD=1.05%;双氯芬酸钠检测浓度在3.4408～34.408μg/ml范围内线 性关系良好(r=0.9996),平均回收率为98.92%,RSD=1.19%。结论:本 制剂易于涂布,所建立的质控方法可同时测定其中2主药的含量,且简便、灵敏、可靠。
高效液相色谱法;;阿昔洛韦;;双氯芬酸钠;;凝胶;;质量控制<1>闫军,李昌生.阿昔洛韦凝胶