出产于我国西南与西北部的植物贯叶连翘(ＨｙｐｅｒｉｃｕｍｐｅｒｆｏｒａｆｕｍＬ .)含有一种天然蒽醌类物质金丝桃素 (Ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ)。由于金丝桃素在临床中显示抗抑郁、抑制中枢神经及抗病毒的作用 ,使其在医学上已得到应用 ,最近的研究表明 ,金丝桃素有显著的抗ＤＮＡ、ＲＮＡ病毒作用 ,可用于爱滋病的治疗 ,通过对与其结构相似的一些蒽酮化合物抗逆转录病毒 (包括抗人类免疫缺陷病毒ＨＩＶ)的药理研究 ,发现金丝桃素的作用最为突出<1> 。目前国外已将金丝桃素与蛋白结合用于临床治疗爱滋病。金丝桃素在贯叶连翘全草中含量为万分之几 ,对于它的提取及测试有一定的要求 ,我们在实验中探索了从贯叶连翘全草中提取金丝桃素的工艺 ,并将其运用到了工业生产中<2 > ,金丝桃素的含量采用紫外可见光谱来测试 ,为生产提供质量控制的手段。1 实验药品与仪器1 .1 试剂及原料 贯叶连翘提取物 (由本课题组实验制备 ,全草采自贵州安顺 ) ;金丝桃素对照品 (简称ＨＰ ,Ｓｉｇａｍａ公司 ) ;甲醇 (ＡＲ) ;氯仿 (ＡＲ)。1 .2 仪器 紫外 /可见分光光度计Ｕ 3 4 0 0 (岛津公司 ) ;电子天平 (Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ,德国产 ,精确至万分之一克 ) ;恒温水浴槽、索氏提取器。2 方 法2 .1 准确称取金丝桃素对照品 0 .0 0 2 6ｇ ,将其溶于甲醇并转移至 2 5ｍｌ量瓶中 ,然后各取一定量将其配成 5种浓度分别不同的溶液 ,在紫外可见光谱下扫描 ,确定其特征峰 ,以浓度为横坐标 ,吸光度 (ＡＢＳ)为纵坐标 ,作金丝桃素的标准曲线图。2 .2 在电子天平上准确称取已制备好的贯叶连翘提取物 0 .1ｇ ,置于索氏提取器中 ,用氯仿洗涤 ,除去其中的酯溶性干扰物质 ,1ｈ后取出凉干。2 .3 将已处理好的贯叶连翘提取物样品用甲醇配成溶液 ,定容后测试样品的精密度、稳定性及样品的加样回收率 ,考查这些数据以确定测试方法的可靠性。3 结果与讨论3 .1 标准曲线 对金丝桃素进行紫外可见光谱范围内的扫描 ,发现其在 589ｎｍ处有最大吸收 ,如图 1所示。这一吸收峰处于可见光区 ,主要是由于金丝桃素属脱去一分子氢的二聚蒽酮 ,其α 羟基数目较多 ,因此吸收峰向长波方向移动。以浓度为横坐标 ,吸光度为纵坐标 ,作出的ＨＰ工作曲线 ,测试数据如表 1。用最小二乘法拟合得到标准曲线 (如图 2所示 )及回归方程。其回归方程为ｙ =2 1 .4 1 2ｘ -0 .0 1 4 3 ,相关系数ｒ为0 .9976。图 1 ＨＰ对照品及贯叶连翘提取物ＵＶ扫描图谱1-ＨＰ对照品 ;2 -贯叶连翘提取物表 1 标准曲线数据序 号浓度 /ｍｇ·ｍｌ-1ＡＢＳ1 0 .0 0 52 0 .1 1 752 0 .0 1 0 4 0 .2 0 4 43 0 .0 2 0 80 .41 324 0 .0 31 2 0 .62 975 0 .0 4 1 6 0 .90 1 8图 2 ＨＰ标准曲线图3 .2 样品测试精密度 将同一批号的样品 ,按 1 .2方法配成溶液 ,然后对其进行紫外可见光谱扫描 ,在标准特征峰处测定其吸收峰值 ,计算样品中金丝桃素的含量 ,重复测定 7次 ,其结果如表 2所示 ,样品精密度的变异系数为 0 .1 9%。样品中ＨＰ平均含量为 0 .71 %。3 .3 稳定性考查 考查了样品溶液配制之后 6ｈ内其在 589ｎｍ处的吸光度 ,其吸收值基本保持不变 ,如表 3所示 ,因此样品溶液在 6ｈ内基本稳定 ,ＲＳＤ为 0 .55%。表 2 样品精密度测试数据序 号ＡＢＳａ %ＲＳＤ/ %1 0 .50 4 8 0 .71 352 0 .50 66 0 .71 613 0 .50 55 0 .71 4 54 0 .50 65 0 .71 590 .1 95 0 .50 87 0 .71 916 0 .50 56 0 .71 4 77 0 .50 74 0 .71 72表 3 稳定性数据时间 /ｈＡＢＳａ %ＲＳＤ/ %0 0 .50 890 .71 931 0 .50 92 0 .71 972 0 .50 70 0 .71 663 0 .50 790 .71 790 .554 0 .50 65 0 .71 595 0 .50 60 0 .71 526 0 .50 680 .71 633 .4 回收率测定结果 在样品中加入金丝桃素对照品 ,按处理样品的方法处理后 ,测定其紫外吸收值 ,计算其回收率。结果见表 4所示。样品的平均加样回收率为 99.2 7% ,ＲＳＤ为 0 .1 7%。表 4 加样回收率结果测定序号 样品ＨＰ含量 加标品量实际含量测定结果回收率 / %1 0 .0 0 680 .0 0 4 80 .0 1 1 6 0 .0 1 1 5 99.1 42 0 .0 0 680 .0 0 52 0 .0 1 2 0 0 .0 1 1 999.1 73 0 .0 0 80 0 .0 0 4 80 .0 1 2 80 .0 1 2 799.2 24 0 .0 0 80 0 .0 0 52 0 .0 1 32 0 .0 1 31 99.2 45 0 .0 1 2 0 0 .0 1 0 80 .0 2 2 80 .0 2 2 799.564 结 论以紫外可见光谱扫描法测定贯叶连翘中金丝桃素含量的方法精密度好 ,样品的平均加样回收率高 ,在样品配成溶液当天测试的稳定性亦可保证。因此 ,这一方法可作为企业生产贯叶连翘金丝桃素的产品测试方法。贯叶连翘中金丝桃素的测定@张健!桂林541004$广西师范大学化学与生命科学学院
@李俊!桂林541004$广西师范大学化学与生命科学学院
@李芳!桂林541004$广西师范大学化学与生命科学学院
@莫琪!桂林541004$广西师范大学化学与生命科学学院金丝桃素;;贯叶连翘;;测试目的 :建立贯叶连翘中金丝桃素的测定方法。方法 :采用紫外可见光谱测试 ,在 589nm处有特征吸收。结果 :样品的平均加样回收率为 99.2 7% ,精密度及稳定性的相对标准偏差分别为 0 .1 9%及 0 .55%。结论 :本法可以作为企业生产贯叶连翘提取物的质量控制测试方法。1潘映红 ,郭宝林 .国产金丝桃属植物有效成分研究概况 .中药材 ,1993,6 (8)∶40 .
2李俊 ,莫琪 ,张健 .乙醇法提取金丝桃素的研究 .现代化工 ,1998,8(8)∶2 7.分别为 0 .1 9%及 0 .55%。结论 :本法可以作为企业生产贯叶连翘提取物的质量控制测试方法。1潘映红 ,郭宝林 .国产金丝桃属植物有效成分研究概况 .中药材 ,1993,6 (8)∶40 .
2李俊 ,莫琪 ,张健 .乙醇法提取金丝桃素的研究 .现代化工 ,1998,8(8)∶2 7.
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