采用腹水型肉瘤Ｓ180(河北省实验动物中心提供),经一系列传代保存瘤种。各组小鼠术后60 ｄ,每只左下肢腋部ｓｃ5×106个Ｓ180细胞。注射前摇匀并通过部分下肢肌肉,以防止瘤 细胞渗漏出皮肤影响接种质量。将人工合成品ｔｕｆｔｓｉｎ(美国Ｓｉｇｍａ公司)用生理盐水 稀释成20μｇ·ｍｌ-1,自接种瘤细胞后,第Ⅱ,Ⅳ组小鼠每只ｓｃｔｕｆｔｓｉｎ05μｇ ·ｇ-1,每周2次,余各组小鼠ｓｃ等容量的生理盐水,直至动物于接种瘤细胞后第10天实验 处死或自然死亡。自接种瘤细胞第2天起,每日检查肿物的出现及生长情况。自第7天起隔日用游 标卡尺测量瘤体大小,以纵径加横径作为统计指标<4>,直至动物死亡。接种瘤细胞后第10天 ,每组随机抽取10只小鼠,眼球采血测定ＮＫ细胞活性(采用51Ｃｒ释放法)<5>。以天为 单位记录各组小鼠生存时间,处死或自然死亡小鼠均进行解剖,检查腹腔内及脾脏状况。接种后荷 瘤小鼠瘤体大小、生存时间及ＮＫ细胞活性检测结果,均采用方差分析,两两比较Ｆ检验。2 结 果21 接种Ｓ180后肿瘤生长情况各组小鼠于接种4～5ｄ后注射部位可触到肿物,各组间 阳性数差异无显著性。注射ｔｕｆｔｓｉｎ组各时期肿瘤生长大小与对照组比较,第7天时各组肿 瘤大小无显著性异常。在第13天,第19天时肿物大小有显著性差异(Ｐ<005)。见表1。 表1 各组小鼠接种Ｓ180后肿瘤生长大小ｘ±ｓ,ｎ=10组别平均直径(纵径+横径)/ｃ ｍ7ｄ13ｄ19ｄ假手术组1111±3332733±6083043±662假手术+ｔｕ ｆｔｓｉｎ组1150±5641888±9881)2248±7631)脾切除组1410± 4533736±3274151±426脾切除+ｔｕｆｔｓｉｎ组1196±3841921 ±9272)2391±6982)注:与假手术组相比,1)Ｐ<005;与脾切除组相比,2 )Ｐ<005;ｆｕｆｔｓｉｎ组:ｓｃ注射ｔｕｆｔｓｉｎ05μｇ·ｇ-1,每周2次;(脾 切除组7只动物)22 荷瘤小鼠平均生存期的观察接种传代活体瘤细胞Ｓ180后,20～60 ｄ左右各组小鼠因肿瘤的进行性生长而死亡。模拟脾切除和脾切除注射ｔｕｆｔｓｉｎ组(Ⅱ,Ⅳ )与对照组(Ⅰ,Ⅲ)比较其平均生存期延长。见表2。表2 各组小鼠接种Ｓ180后平均生存 期ｘ±ｓ,ｎ=10组 别平均生存期/ｄ组别平均生存期/ｄ假手术组375±153脾切除组 186±373假手术+ｔｕｆｔｓｉｎ组497±1441)脾切除+ｔｕｆｔｓｉｎ组364 ±862)注:与假手术组相比,1)Ｐ<005;与脾切除组相比,2)Ｐ<001;注射ｔｕ ｆｔｓｉｎ组:ｓｃｔｕｆｔｓｉｎ05μｇ·ｇ-1,每周2次23 外周血ＮＫ细胞活性各组 小鼠于荷瘤第10天,检测外周血ＮＫ细胞活性,脾切除组ＮＫ细胞活性低于其它各组(Ｐ<00 5),其余各组之间比较差异不显著。见表3。表3 各组小鼠接种Ｓ180后第10天外周血Ｎ Ｋ细胞活性ｘ±ｓ组别细胞活性/%组别细胞活性/%假手术组4668±2252脾切除组37 72±3471)假手术+ｔｕｆｔｓｉｎ组4744±1343脾切除+ｔｕｆｔｓｉｎ组50 28±1287注:与假手术组、假手术+ｔｕｆｔｓｉｎ组、脾切除+ｔｕｆｔｓｉｎ组相比, 1)Ｐ<0053 讨 论ｔｕｆｔｓｉｎ是机体自然存在的免疫四肽。1973年Ｎａｊｊａｒ 等人工合成ｔｕｆｔｓｉｎ并证实人工合成品与天然四肽具有相同的理化性质和生物学特性。由于 脾切除以后,这种物质明显减少,甚至消失,故认为这种物质是由脾脏产生的。ｔｕｆｔｓｉｎ不 仅作用于中性粒细胞而且还作用于巨噬细胞、ＮＫ细胞等,既有抗感染作用,又有抗肿瘤作用。目 前国外已将人工合成的ｔｕｆｔｓｉｎ用于某些晚期肿瘤及ＡＩＤＳ病的治疗,并取得了一定的疗 效,大剂量使用也未见明显的毒副作用<3,6>。抗肿瘤作用主要表现如下<7>:①增强巨噬 细胞的吞噬功能。②增强巨噬细胞溶解瘤细胞作用。③增强了吞噬细胞的过氧化酶作用。④增强Ｎ Ｋ细胞活性。Ｃｈｕ<2>认为,ｔｕｆｔｓｉｎ的抗肿瘤机制不仅通过增加巨噬细胞的肿瘤趋向 性、吞噬能力和分泌能力,更重要的是增加巨噬细胞产生氧自由基———超氧阴离子的能力,巨噬 细胞定向性向肿瘤细胞内释放对杀伤肿瘤细胞具有重要意义。实验证实,随肿瘤的生长,ｔｕｆｔ ｓｉｎ的这种作用也随之减弱,测定巨噬细胞的产生量减少,这对ｔｕｆｔｓｉｎ的抗肿瘤机制提 出新观点。荷瘤动物注射ｔｕｆｔｓｉｎ后能使接种性肿瘤发生延迟,发生率降低,并能抑制肿瘤 的生长和减少转移<8>。本实验结果表明,ｔｕｆｔｓｉｎ能抑制带脾荷瘤小鼠的瘤体生长,并 延长存活期。ｔｕｆｔｓｉｎ的这种作用在脾切除的荷瘤小鼠更为明显,原因是注射剂量的ｔｕｆ ｔｓｉｎ可以动员全身特异和非特异免疫细胞参与抗肿瘤免疫,因此第Ⅳ组小鼠虽然无脾,经注射 ｔｕｆｔｓｉｎ后其抗肿瘤能力大于脾切除组。另外发现在荷瘤第10天时,模拟脾切除加注射ｔ ｕｆｔｓｉｎ组与未注药组相比,其外周血ＮＫ细胞活性并无增高,但其肿瘤体积小,生存期长。 分析原因可能是实验剂量的ｔｕｆｔｓｉｎ此时并不能明显提高血中浓度而增强其ＮＫ细胞活性; 或者是此时血中的ｔｕｆｔｓｉｎ量即可维持肿瘤免疫功能,虽提高ｔｕｆｔｓｉｎ浓度也不能增 加其ＮＫ细胞活性,即此时处于一种“饱和”状态。而在荷瘤后期脾脏分泌ｔｕｆｔｓｉｎ下降后 ,这一注射剂量的ｔｕｆｔｓｉｎ才能明显发挥免疫作用。作者认为:荷瘤状态下的机体,一次检 测外周血ＮＫ细胞活性并不能代表整个机体抗癌水平;也不能只靠ＮＫ细胞活性来评价整个机体的 抗癌能力,需动态观察ＮＫ细胞活性,并结合多种免疫指标相关分析,以了解整体抗癌免疫水平, 这对疾病病程的判断有一定的意义。在本实验中,脾切除组有1只小鼠接种后,在瘤体皮肤表面形 成溃疡,有2只小鼠产生癌性腹水。促吞噬肽抗肿瘤作用的研究@杨金良!石家庄050051$ 河北医科大学第三医院外科@李文平!石家庄050051$河北医科大学第三医院外科@王克诚 !石家庄050051$河北医科大学第三医院外科@肖文华!石家庄050051$河北医科大 学第三医院外科@卞红磊!石家庄050051$河北医科大学第三医院外科@魏梅新!石家庄0 50051$河北医科大学第三医院外科@高静!石家庄050051$河北医科大学第三医院外 科促吞噬肽;;肿瘤/免疫学;;杀伤细胞目的:通过S180在昆明种小鼠活体生长,对促吞噬 肽(tuftsin)的抗肿瘤作用进行研究。方法:建立脾切除、模拟脾切除动物模型,皮下接 种S180,注射促吞噬肽,观察荷瘤小鼠的瘤体生长、自然生存期及检测NK细胞活性。结果:促吞噬肽能抑制带脾荷瘤小鼠的瘤体生长、增强NK细胞活性并延长生存期。这种作用在脾切除的小鼠中更为明显。结论:促吞噬肽具有抗肿瘤免疫作用,可望用于恶性肿瘤的治疗。<1>汪谦.脾脏因子TUFTSIN研究进展 .中华实验外科杂志 ,1995 ,12 ( 1) :6 2 .
<2 >ChuDZ ,NishiokaK .Tuftsincreasesurvivalmurinperitonealcarcinomatosis .JBiolResponseMod ,1990 ,9( 2 ) :2 84.
<3 >MarilusR ,SpirerZ ,MiChaelD ,etal.FirstcaseofAIDSinanomosexualinisrael.resultsofdifferenttherapeuticregimens .IsrJMedSci,1984,2 0 ( 3 ) :2 49.
<4>刘生光 ,何长林 ,宫莉 ,等 .脾切除对移植性肿瘤生长的影响 .中华实验外科杂志 ,1984,1( 4) :14 8.
<5 >NikolaLV ,RonaidBH ,JohcCH .Lymphokineactivatedkillercellsinrats:analysisoftissueandstraindistribution ,ontogeny ,andtragetspecifity .CancerRes,1988,15 ( 48) :878.
<6 >MartinezJ,WinternitzF .Bactericidalactivityoftuftsin .MolCellBiochem ,1981,41( 2 ) :12 3 .
<7>姜洪池 ,夏穗生 .Tuftsin及其研究近况 .中华实验外科杂志 ,1988,5 ( 4) :188.
<8>顾琴龙 ,何长林 ,章仁道 ,等 .脾脏和Tuftsin对小鼠移植性宫颈癌免疫作用的研究 .中华实验外科杂志 ,1989,6 ( 3 ) :119.飨苑⒒用庖咦饔谩Ｗ髡呷衔?荷瘤状态下的机体,一次检测外周血ＮＫ细胞活性并不能代 表整个机体抗癌水平;也不能只靠ＮＫ细胞活性来评价整个机体的抗癌能力,需动态观察ＮＫ细胞 活性,并结合多种免疫指标相关分析,以了解整体抗癌免疫水平,这对疾病病程的判断有一定的意 义。在本实验中,脾切除组有1只小鼠接种后,在瘤体皮肤表面形成溃疡,有2只小鼠产生癌性腹 水。促吞噬肽抗肿瘤作用的研究@杨金良!石家庄050051$河北医科大学第三医院外科@李 文平!石家庄050051$河北医科大学第三医院外科@王克诚!石家庄050051$河北医 科大学第三医院外科@肖文华!石家庄050051$河北医科大学第三医院外科@卞红磊!石家 庄050051$河北医科大学第三医院外科@魏梅新!石家庄050051$河北医科大学第三 医院外科@高静!石家庄050051$河北医科大学第三医院外科促吞噬肽;;肿瘤/免疫学;;杀伤细胞目的:通过S180在昆明种小鼠活体生长,
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