橙皮酊为中药制剂,临床上主要用于健胃、理气,消化不良,胃肠气胀。该药由陈皮经60%的乙醇 浸渍而得,在中国药典1963年版中有收载,其主要成分为橙皮甙,但药典中未规定有含量测定 方法,据文献报道<1,2>,橙皮甙的含量测定有三波长紫外分光光度法、导数光谱法、薄层扫 描法、高效液相色谱法等方法。本文采用导数分光光度法测定样品中橙皮甙的含量,方法准确,简 便快速,可作为橙皮甙的定量方法。1 仪器与试剂UV-2100,日本岛津仪器厂;TG-3 28B分析天平,上海天平仪器厂;752-紫外光栅分光光度计,上海第三分析仪器厂;橙皮甙 对照品,中国药品生物制品检定所生产;乙醇、甲醇、石油醚均为分析纯;氢氧化钠为化学纯;检 皮酊由福州道山制药厂提供(批号:980813、981118、990104、990326 、990604)。2 实验条件的选择2.1 各成分吸收光谱 按文献<3>法自陈皮中提取 橙皮甙,按生产工艺配制不含橙皮甙的橙皮酊;称取适量的橙皮甙标准品。用含0.1%NaOH 75%的乙醇溶液(下简称溶剂)配成适当浓度的溶液,分别绘制紫外吸收光谱(见图1)。图1 紫外吸收光谱1.橙皮甙对照品 2.干扰组分 由图1可以看出,橙皮甙的吸收呈二次曲线 ,陈皮中的干扰组分吸收近似一条直线。2.2 导数光谱的绘制 同上操作,在230nm～3 10nm范围内,以1nm为间隔测定各波长的吸收值,并依次以10nm为间隔计算一系列△A 值;以△A对中间波长λm作图(见图2)。图2 导数光谱图1.橙皮甙对照品 2.干扰组分 从图2中可以看出,橙皮甙峰值点251nm和275nm处。选测定波长为246、256、2 70、280nm测定A值,按D=(A280-A270)-(A256-A246)计算D值 。2.3 干扰组分对橙皮甙导数光谱的影响 配制等浓度的橙皮甙溶液,加入不同量(测定量0 ～3倍)的干扰组分,测定吸收度,按D=(A280-A270)-(A256-A246)计 算,(见表1)。表1 干扰成分的影响干扰(倍)A2460A256-A270A280D0 .0.6710.3590.3140.4610.4591.00.6830.3680.32 80.4720.4591.50.6980.3870.3450.4920.4582.00 .7260.4100.3680.5080.4562.50.7390.4220.3790 .5190.4573.00.7520.4350.3900.5300.457结果表明D基 本不随加入的干扰组分而改变,因此可作为测定的定量依据。2.4 超声提取时间的确定 取定 量的样品,用溶剂配制适当浓度,以选定的时间5、10、15、20、30min,超声波振荡 提取,过滤,取续滤液测定吸收度,计算D(见表2)。表2 超声提取时间的确定提取时间(m in)A246A256(A270A280D50.5980.4920.4350.4280 .099100.6250.5180.4570.4520.102150.6420.532 0.4730.4660.103200.6420.5320.4750.4680.1033 00.6420.5320.4760.4690.103结果表明在15min以后D基本趋于 稳定,并达到最大值,所以选定超声提取时间为20min。3 测定方法3.1 浓度与D值的 线性关系 精密称取12.5mg干燥的橙皮甙对照品,用溶剂溶解并稀释至25.00ml。从 中准确吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5ml分别置于50ml容 量瓶中,用溶剂稀释至刻度。以同样的溶剂为空白,1cm石英比色皿,分别在280、270、 256、246nm波长处测定吸收度。按上述公式计算。结果(见表3)。表3 浓度与吸收度 关系C(μg·ml-1)A246A256A270A280D50.1610.0750.0 670.1140.133100.3090.1420.1260.2180.259150. 4670.2160.1910.3300.390200.6190.2830.2560.4 380.518250.7590.3440.3140.5410.642300.9100. 4170.3800.6480.761351.6090.4950.4500.7640.8 88 由上表得线性回归方程:C=39.755D-0.394(r=0.9999),式中 C为橙皮甙浓度(μg·ml-1)3.2 样品的测定取5批样品,各吸取3.0ml,用溶剂 稀释至25.0ml,超声波振荡提取20min,过滤分别吸取续滤液2.0ml并稀释至50 .0ml。按选定的4个波长测定吸收值,计算D值。以下式计算橙皮甙的含量(见表4)。C= 39.755D-0.3942.00×3.00×1000×50×25×100%表4 样品 中橙皮甙的含量测定样品批号A246A256A270A280D百分含量(mg·100ml -1)9808130.8050.6370.5800.5470.135103.60981 1180.8740.7100.6620.6210.12393.669901040.61 00.4640.4010.3970.142109.409903260.6040.466 0.4010.3920.12998.639906040.6710.5190.4510. 4480.149115.203.3 加样回收率 取前述干扰组分(相当于3.0ml样品量 ),精密加入橙皮甙对照液(0.0970mg·ml-1)2、3、4、5、6ml,加溶剂至 25ml,同样品测定项下的操作,测定吸光度,求得含量,计算回收率。结果(见表5)。4 讨论4.1 陈皮是橙皮酊的主药,测定陈皮甙的含量可作为控制橙皮酊质量的指标之一。经回收 率及样品测定实验证明,本实验所用导数分光光度法,可用于橙皮酊中橙皮甙的定量分析。4.2 由样品的测定结果可知,5批样品中橙皮甙的含量均大于90mg·100ml-1,因此可建 议质量标准规定橙皮酊中橙皮甙的含量应≥90mg·100ml-1。表5 回收率实验加入量 (μg)A(nm)246256270280D测得量(μg)回收率(%)1940.256 0.1190.1100.1800.207196101.032910.3710.1710 .1600.2610.30128999.313880.4850.2210.2070.3 430.400388100.004850.6160.2810.2640.4370.50 8495102.065820.7210.3310.3090.512059358099. 66X-±S100.41±0.9导数光谱法测定橙皮酊中橙皮甙的含量@唐健$福建医科大学 附属协和医院!福州350001@卓仪荣$福州道山制药厂!350001@姚洪亮$福建卫生 学校药专16班!实习生橙皮酊;;橙皮甙;;紫外分光光度法本文报道用一阶导数<1>法消除了橙皮酊中一次不相关吸收的干扰,测定其中活性成分橙皮甙的含量。方法简便快速,其回收率为100.41%±0.90%(n=5),可作为该药的质控方法<1>卢日刚:导数光谱法测定陈香露片中橙皮甙的含量 中成药研究 1987;( 8)∶ 8
<2 >梁生旺、刘伟主编 :中药制剂定量分析 ,北京 ,中国中医药出版社 ,1997;2 19
<3 >卫生部药典委员会编 :中国药典 (一部 ) ,北京 ,化学工业出版社 ,1995 ;1山制药厂!350001@姚洪亮$福建卫生学校药专16班!实习生橙皮酊;;橙皮甙;;紫 外分光光度法本文报道用一阶导数<1>法消除了橙皮酊中一次不相关吸收的干扰,测定其中活性 成分橙皮甙的含量。方法简便快速,其回收率为100.41%±0.90%(n=5),可作为该药的质控方法<1>卢日刚:导数光谱法测定陈香露片中橙皮甙的含量 中成药研究 1987;( 8)∶ 8
<2 >梁生旺、刘伟主编 :中药制剂定量分析 ,北京 ,中国中医药出版社 ,1997;2 19
<3 >卫生部药典委员会编 :中国药典 (一部 ) ,北京 ,化学工业出版社 ,1995 ;1
More abstracts about the 导数光谱法测定橙皮酊中橙皮甙的含量