中药狗脊ＲｈｉｚｏｍａＣｉｂｏｔｉｉ为蚌壳蕨科Ｄｉｃｋｓｏｎｉａ ｃｅａｅ植物金毛狗脊Ｃｉｂｏｔｉｕｍｂａｒｏｍａｔｚ(Ｌ .)Ｊ .Ｓｍ .的干燥根茎 ,为常用中药 ,也是我国重要出口药材之一<1> ,历版《中国药典》均有收载。贾天柱等<2 > 曾采用共水蒸馏法提取狗脊挥发油成分 ,用ＧＣ -ＭＳ法鉴定了一些主要的高级脂肪酸。但由于该方法提取温度高、时间长 ,会造成一些成分的丢失和变化 ,因此有必要从提取方法上作进一步的改进。近年来 ,超临界ＣＯ2 萃取 (ＳＦＥ)技术的迅速发展和广泛应用 ,已在许多领域获得了突破性的进展。ＳＦＥ技术具有低温、简单、快捷、无污染等优点。超临界ＣＯ2流体的惰性、低粘度、强渗透性 ,以及出色的溶解能力 ,使得提取高效、完全且不破坏成分<3> 。我们在对金毛狗脊的根进行系统化学成分研究中 ,应用ＳＦＥ技术提取其精油部分 ,并用ＧＣ -ＭＳ进行分离和鉴定 ,获得了许多新成分。1 材料与方法1.1 材料 生药狗脊采集于云南景洪 ,经鉴定为蚌壳蕨科Ｄｉｃｋｓｏｎｉａｃｅａｅ植物金毛狗脊Ｃｉｂｏｔｉｕｍｂａｒｏｍａｔｚ (Ｌ .)Ｊ .Ｓｍ .的干燥根茎。仪器 ＨＡ - 950 8型萃取装置 (江苏南通华安公司 ) ,ＨＰ6 890 - 5973ＧＣ -ＭＳＤ型气相色谱 -质谱 -联用仪 (美国ＨＰ公司 )。ＣＯ2 气体 (广州气体厂产品 )。1.2 方法1.2 .1 萃取条件 经对萃取压力、温度和时间三因素三水平正交试验 ,获得最佳萃取条件 :压力为30ＭＰａ ,温度为 4 5℃ ,时间 3ｈ。分析条件 ＥＩ离子源 ,离子能量 :70ｅＶ ,离子源温度 :2 30℃ ,连接线温度 :2 30℃ ,进样方式 :ＧＣ ,扫描方式 :Ｓｃａｎ ,真空度 :0 .1× 133.3μＰａ ,色谱柱 :ＦＦＡＤ2 5ｍ× 0 .2ｍｍ ,进样量 :1.0 μｌ,柱温 :12 0℃～ 2 4 0℃ ,10℃·ｍｉｎ- 1,载气 :Ｈｅ ,进样口温度 :2 50℃ ,柱前压 :50ｋＰａ ,电子倍增器高压 :170 0Ｖ ,质量扫描 :30～4 0 0ａｍｕ。1.2 .2 ＳＦＥ提取与ＧＣ -ＭＳ分析 取 0 .6ｋｇ金毛狗脊干燥粗粉投入萃取釜 ,经两个解析釜进行二级分离 ,得精油Ⅰ和Ⅱ。再分别进行ＧＣ -ＭＳ分析 ,重复两次。质谱图经计算机检索 ,并核对标准图谱 ,最后用面积归一化法测出各成分的相对含量。2 结 果精油经合并、干燥后称重共计 37.6ｇ ,计算平均得油率为 3.13%。以相对含量≥ 0 .1%计数 ,在上述条件下从精油Ⅰ和Ⅱ中共分得 4 3个化合物 ,鉴定了其中 2 5个化合物。其中γ -松油烯、桧烯、胡椒酮、杜松二烯、十六碳烯酸及其酯、十六碳三烯酸甲酯、4 -松油醇、2 -异丙基 - 5-甲基 - 3-环己烯酮、杜松萜烯、邻苯二甲酸及其酯、二十四碳烯酸甲酯、十八碳三烯醇共 12个化合物为首次从该植物中分到。相对含量≥ 10 %的化合物按由大到小排列 ,分别为油酸、亚油酸、棕榈酸、十五碳酸、十六碳三烯酸甲酯、亚油酸甲酯。所有化合物的气相色谱图及化合物名称、分子式、ｔＲ 值、分子量和相对含量分别见图 1、2和表 1、2。图 1 金毛狗脊超临界萃取解析Ｉ精油的总离子色谱图图 2 金毛狗脊超临界萃取解析Ⅱ精油的总离子色谱图表 1 金毛狗脊超临界萃取解析Ｉ精油的化学成分组成峰号化 合 物 名 称分子式ｔＲ 分子量相对含量 (% )1γ -松油烯 (γ -Ｔｅｒｐｉｎｅｎ) Ｃ1 0 Ｈ1 6 3 .681 36 0 .2 92桧烯 (Ｓａｂｉｎｅｎ) Ｃ1 0 Ｈ1 6 5 .1 2 1 36 0 .2 53Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 0 .0 80 .1 44Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 0 .75 0 .2 05胡椒酮 (Ｐｉｐｅｒｉｔｏｎｅ) Ｃ1 0 Ｈ1 6 Ｏ 1 2 .1 6 1 52 0 .2 56杜松二烯 (Ｃａｄｉｎａ- 1 (1 0 ) 4 -ｄｉｅｎｅ) Ｃ1 5 Ｈ2 41 2 .71 2 0 4 0 .377Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 3 .57 0 .1 78Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 6 .2 80 .2 19Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 6 .73 0 .1 61 0棕榈酸乙酯 (Ｐａｌｍｉｔｉｃａｃｉｄｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ)Ｃ1 8Ｈ36 Ｏ2 1 7.692 840 .891 1十六碳烯酸乙酯 (Ｅｔｈｙｌ 9-ｈｅｘａｄｅｃｅｎｏａｔｅ)Ｃ1 8Ｈ34 Ｏ2 1 7.86 2 82 0 .491 2Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 8.81 0 .1 01 3油酸乙酯 (Ｏｌｅｉｃａｃｉｄｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ) Ｃ2 0 Ｈ38Ｏ2 1 9.60 31 0 1 .351 4亚油酸乙酯 (Ｌｉｎｏｌｅｉｃａｃｉｄｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ) Ｃ2 0 Ｈ36 Ｏ2 1 9.93 30 81 .2 71 5Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 2 0 .42 4 .1 01 6十四碳酸 (Ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｉｃａｃｉｄ) Ｃ1 4 Ｈ2 8Ｏ2 2 1 .36 2 2 80 .401 7十六碳酸 (Ｈｅｘａｄｅｃａｎｏｉｃａｃｉｄ) Ｃ1 6 Ｈ32 Ｏ2 2 4 .52 2 56 1 6 .861 8十六碳烯酸 (9-Ｈｅｘａｄｅｃｅｎｏｉｃａｃｉｄ)Ｃ1 6 Ｈ30 Ｏ2 2 5 .1 0 2 54 9.811 9Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 2 5 .2 2 0 .642 0硬脂酸 (Ｓｔｅａｒｉｃａｃｉｄ)Ｃ1 8Ｈ36 Ｏ2 2 9.54 2 842 .962 1异油酸 <(Ｅ) - 9-Ｏｃｔａｄｅｃｅｎｏｉｃａｃｉｄ>Ｃ1 8Ｈ34 Ｏ2 3 0 .60 2 82 2 1 .892 2油酸 <(Ｚ) - 9-Ｏｃｔａｄｅｃｅｎｏｉｃａｃｉｄ>Ｃ1 8Ｈ34 Ｏ2 3 0 .73 2 82 5 .792 3亚油酸 (Ｌｉｎｏｌｅｉｃａｃｉｄ) Ｃ1 8Ｈ32 Ｏ2 3 2 .41 2 80 1 9.702 4十六碳三烯酸甲酯 (7,1 0 ,1 3 -Ｈｅｘａｄｅｃａｔｒｉｅｎｏｉｃａｃｉｄｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ) Ｃ1 7Ｈ2 8Ｏ2 3 5 .1 2 2 64 1 1 .71表 2 金毛狗脊超临界萃取解析Ⅱ精油的化学成分组成峰号化 合 物 名 称分子式ｔＲ 分子量相对含量 (% )1Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 6 .940 .442 4 -松油醇 (4-Ｔｅｒｐｉｎｅｏｌ)Ｃ1 0 Ｈ1 8Ｏ 7.93 1 54 0 .1 73 2 -异丙基 - 5 -甲基 - 3 -环已烯酮 Ｃ1 0 Ｈ1 6 Ｏ 8.781 52 0 .37(2 -ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ- 5 -ｍｅｔｈｙｌ- 3 -Ｃｙｃｌｏｈｅｘｅｎ-ｌ-ｏｎｅ)4杜松萜烯 <(+) -δ-Ｃａｄｉｎｅｎｅ> Ｃ1 5 Ｈ2 49.1 0 2 0 4 0 .375Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 9.690 .2 66Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 3 .44 0 .2 67Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 5 .380 .758邻苯二甲酸二乙酯 (Ｄｉｅｔｈｙｌｐｈｔｈａｌａｔｅ)Ｃ1 2 Ｈ1 4 Ｏ41 5 .76 2 2 2 0 .899Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 6 .390 .36表 2 金毛狗脊超临界萃取解析Ⅱ精油的化学成分组成 (续 )峰号化 合 物 名 称分子式 ｔＲ 分子量相对含量 (% )1 0邻苯二甲酸二丁酯 (Ｄｉｂｕｔｙｌｐｈｔｈａｌａｔｅ)Ｃ1 6 Ｈ2 2 Ｏ41 8.2 6 2 781 .891 1Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 8.54 0 .441 2Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 9.0 5 5 .0 61 3Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 1 9.2 3 0 .2 81 4二十四烯酸甲酯 <(Ｚ) - 5 ,1 1 ,1 4 ,1 7-ｅｉｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏａｔｅｍｅｔｈｙｌ> Ｃ2 4Ｈ34 Ｏ2 1 9.57 31 83 .391 5十八碳三烯醇 <(Ｚ ,Ｚ ,Ｚ) - 9,1 2 ,1 5 -Ｏｃｔａｄｅｃａｔｒｉｅｎ - 1 -ｏ1 > Ｃ1 8Ｈ32 Ｏ 1 9.73 2 64 5 .1 41 6Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 2 1 .90 0 .2 11 7十五碳酸 (Ｐｅｎｔａｄｅｃａｎｏｉｃａｃｉｄ) Ｃ1 5 Ｈ30 Ｏ2 2 4 .0 92 4 2 1 3 .2 01 8十六碳烯酸 (9-Ｈｅｘａｄｅｃｅｎｏｉｃａｃｉｄ) Ｃ1 6 Ｈ30 Ｏ2 2 4 .71 2 54 7.711 9硬脂酸 (Ｓｔｅａｒｉｃａｃｉｄ)Ｃ1 8Ｈ36 Ｏ2 2 9.1 82 842 .2 72 0油酸 (ＯｌｅｉｃＡｃｉｄ)Ｃ1 8Ｈ34 Ｏ2 3 0 .2 0 2 82 1 6 .992 1Ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ 30 .35 1 0 .802 2亚油酸 (Ｌｉｎｏｌｅｉｃａｃｉｄ)Ｃ1 8Ｈ32 Ｏ2 3 2 .0 7 2 80 1 8.632 3亚油酸甲酯 (Ｌｉｎｏｌｅｎｉｃａｃｉｄｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ)Ｃ1 9Ｈ32 Ｏ2 3 4 .83 2 92 1 0 .1 23 讨 论3.1 本文采用ＳＦＥ技术 ,首次用于提取金毛狗脊根中的精油 ,得油率为 3.13% ,远远高于共水蒸馏法的得油率。且得到了许多新成分 ,再次显示了ＳＦＥ的优越性。3.2 通过ＧＣ -ＭＳ计算机联用技术对金毛狗脊根中的精油进行分析和测定 ,其中γ -松油烯等 12个化合物为首次从该植物中分到 ,是对系统研究金毛狗脊化学成分的补充
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