克乳痛胶囊是江苏省中医院临床验方，使用已数十年，具有滋补肝肾、调摄冲任、散结止痛等功效， 主治乳腺小叶增生症，效果显著。本方由牡丹皮、鹿角、何首乌等药物组成，丹皮酚和芍药甙是牡 丹皮中的有效成分。为了控制制剂的质量，我们用ＲＰ－ＨＰＬＣ法对克乳痛胶囊中丹皮酚和芍药 甙的含量进行了测定。１仪器与试药１．１仪器Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪，ＲｅｓｏｌｖｅＯ ＤＳ－Ｃ１８柱，５１０泵，４８６可调紫外检测仪，Ｕ６Ｋ进样器；Ｈ６６０２５Ｔ型超声清洗 机。１．２试药克乳痛胶囊由江苏省中医院药剂科生产，批号分别为９７０５１２、９７０５２３ 、９７０６１０、９７０６２０；丹皮酚及芍药甙对照品，标准号分别为７０８－９００３和７３ ６－９４０７，均购于中国药品生物制品检定所；牡丹皮经鉴定为毛茛科植物牡丹Ｐａｅｏｎｉａ ｓｕｆｆｒｕｔｉｃｏｓａＡｎ－ｄｒ．干燥根皮。２方法与结果２．１丹皮酚的ＲＰ－ＨＰＬＣ 测定２．１．１色谱条件［１］ＲｅｓｏｌｖｅＯＤＳ－Ｃ１８柱，流动相为甲醇－醋酸－水（５ ８２４０），检测波长为２７４ｎｍ，流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ，进样量为１０μｌ。２．１． ２标准曲线的制备精密称取干燥至恒重的丹皮酚对照品４．０ｍｇ，置１０ｍｌ量瓶中，加甲醇溶 解并稀释至刻度，摇匀，即得（每１μｌ中含丹皮酚０．４μｇ）。精密量取上液２，４，６，８ ，１６，２０μｌ，照上述色谱条件测定。结果表明，丹皮酚峰面积积分值Ｙ与浓度Ｘ呈良好的线 性关系，回归方程为：Ｙ＝２．７２３×１０６Ｘ＋７．５５５×１０４，ｒ＝０．９９９９（线 性范围０．８～８μｇ）。２．１．３回收率测定取已知含量的克乳痛胶囊内容物０．２５ｇ，精 密称定，共５份，每份精密加入丹皮酚适量，用样品溶液制备方法制备并依法测定，结果见表１。 Ｔａｂ１．ＲｅｃｏｖｅｒｙｏｆｐａｅｏｎｏｌｉｎｔｈｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎＮｏ．Ａｄ ｄｅｄ（ｍｇ）Ｆｏｕｎｄ（ｍｇ）Ｒｅｃｏｖｅｒｙ（％）Ａｖｅｒａｇｅ（％）ＲＳＤ（％） １０．５３１０．５２８９９．４４２０．５０４０．４９３９７．８２３０．５１５０．４９８ ９６．７０９７．９１．０１４１．０１８０．９９４９７．６４５１．０６３１．０４１９７． ９３２．１．４精密度试验取对照品溶液进样１０μｌ，重复５次，测得丹皮酚峰面积积分值相对 标准偏差（ＲＳＤ）为１．２％。２．１．５样品溶液的制备与测定取胶囊内容物１．５ｇ，精密 称定，超声提取４次，每次加甲醇５ｍｌ，提取１５ｍｉｎ，滤过，合并滤液，滤液置２５ｍｌ量 瓶中，加甲醇稀释至刻度。吸取样品溶液１０μｌ，注入ＨＰＬＣ仪，测定。不同批号克乳痛胶囊 中丹皮酚的含量见表３。２．１．６重现性试验取批号９７０６１０供试品内容物１．５ｇ，精密 称定，共５份，分别超声提取４次，每次加甲醇５ｍｌ，每次１５ｍｉｎ，滤过，合并滤液，定容 至２５ｍｌ。吸取供试品溶液各１０μｌ，注入ＨＰＬＣ仪，依上述条件测定。结果见表４。２． ２芍药甙的测定２．２．１色谱条件［２］ＲｅｓｏｌｖｅＯＤＳ－Ｃ１８柱，流动相为乙腈－水 （２０８０），检测波长为２４３ｎｍ，流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ，进样量为１０μｌ。２．２ ．２标准曲线的制备精密称取干燥至恒重的对照品５．０ｍｇ，置２５ｍｌ量瓶中，加甲醇溶解并 稀释至刻度，摇匀，即得（每１μｌ中含芍药甙０．２μｇ）。精密吸取上液２．５，５，１０， １５，２０，２５μｌ，以上述色谱条件测定。结果表明，芍药甙峰面积积分值Ｙ与浓度Ｘ呈良好 的线性关系，回归方程为：Ｙ＝９．０３２×１０６＋６．４７８×１０６Ｘ，ｒ＝０．９９９８ （线性范围０．５～５μｇ）。２．２．３回收率测定取已测含量的克乳痛胶囊内容物０．５ｇ， 精密称定，共５份，每份精密加入芍药甙适量，用样品溶液制备方法制备并依法测定，结果见表２ 。Ｔａｂ２．Ｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎｉｎｔｈｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏ ｎＮｏ．Ａｄｄｅｄ（ｍｇ）Ｆｏｕｎｄ（ｍｇ）Ｒｅｃｏｖｅｒｙ（％）Ａｖｅｒａｇｅ（％） ＲＳＤ（％）１０．５１８０．５０１９６．７２０．５３２０．５２３９８．３３０．５０７０ ．５１０１００．５９８．４７１．５２４１．０１６１．００８９９．２５１．０４３１．０１ ７９７．５２．２．４样品溶液的制备与测定吸取２．１．５项下制备的样品溶液１０μｌ，注入 ＨＰＬＣ仪，测定。不同批号克乳痛胶囊中芍药甙的含量见表３。２．２．５重现性试验吸取２． １．５项下制备的供试品溶液１０μｌ，注入ＨＰＬＣ仪，测定。结果见表４。Ｔａｂ３．Ｒｅｓ ｕｌｔｏｆｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓａｍｐｌｅｓ（ｎ＝２）ＢａｔｃｈＰｅａｏｎｏ ｌ（ｍｇ／ｇ）Ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ（ｍｇ／ｇ）９７０５１２１．２９０．４８９７０５ ２３１．７１０．４５９７０６１０１．５３０．５７９７０６２０１．７４０．６６Ｔａｂ４． ＲｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙｏｆｔｅｓｔｓＢａｔｃｈＰｅａｏｎｏｌ（ｍｇ／ｇ）Ｐａｅ ｏｎｉｆｌｏｒｉｎ（ｍｇ／ｇ）９７０６１０１．５３０．５６１．４９０．５６１．５５０． ５７１．５７０．５９１．５００．５５Ｍｅａｎ１．５３０．５７ＲＳＤ（％）２．１９２．６ ６３结论与讨论１）测定结果看出，样品中丹皮酚含量最高为１．７４ｍｇ／ｇ，最低为１．２９ ｍｇ／ｇ，故建议其含量应不得低于１．２０ｍｇ／ｇ；芍药甙含量最高为０．６６ｍｇ／ｇ，最 低为０．４５ｍｇ／ｇ，故建议其含量应不得低于０．４０ｍｇ／ｇ。２）由于芍药甙与丹皮酚化 学结构和理化行为的不同，故用同一种流动相并不能使两者得以分离、测定。RP-HPLC法测 定克乳痛胶囊中丹皮酚和芍药甙的含量@刘志辉@朱耕新@许毅@褚雪溪$江苏省中医院克乳痛胶 囊；ＲＰ－ＨＰＬＣ；丹皮酚；芍药甙建立了ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定克乳痛胶囊中丹皮酚和芍药甙 的含量，均用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；前者以甲醇－醋酸－水（５８２４０）为流动相， 检测波长为２７４ｎｍ；后者以乙腈－水（２０８０）为流动相，检测波长为２４３ｎｍ。本法简 便、快速、重现性好。１刘放，黄卫平．ＨＰＬＣ法测定牡丹皮及其制剂中丹皮酚含量．基层中药 杂志，１９９７，１１Ｓ（１）：３２２李益福，李践，章建民．中药丹皮木心药用价值研究芍药 甙的定性鉴别和含量含量测定．中草药，１９９４，２５（１１）：５８ｓＢａｔｃｈＰｅａｏｎ ｏｌ（ｍｇ／ｇ）Ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ（ｍｇ／ｇ）９７０６１０１．５３０．５６１．４ ９０．５６１．５５０．５７１．５７０．５９１．５００．５５Ｍｅａｎ１．５３０．５７ＲＳ Ｄ（％）２．１９２．６６３结论与讨论１）测定结果看出，样品中丹皮酚含量最高为１．７４ｍ ｇ／ｇ，最低为１．２９ｍｇ／ｇ，故建议其含量应不得低于１．２０ｍｇ／ｇ；芍药甙含量最高 为０．６６ｍｇ／ｇ，最低为０．４５ｍｇ／ｇ，故建议其含量应不得低于０．４０ｍｇ／ｇ。２ ）由于芍药甙与丹皮酚化学结构和理化行为的不同，故用同一种流动相并不能使两者得以分离、测 定。RP-HPLC法测定克乳痛胶囊中丹皮酚和芍药甙的含量@刘志辉@朱耕新@许毅@褚雪溪 $江苏省中医院克乳痛胶囊；ＲＰ－ＨＰＬＣ；丹皮酚；芍药甙建立了ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定克乳 痛胶囊中丹皮酚和芍药甙的含量，均用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；前者以甲醇－醋酸－水（ ５８２４０）为流动相，检测波长为２７４ｎｍ；后者以乙腈－水（２０８０）为流动相，检测波 长为２４３ｎｍ。本法简便、快速、重现性好。１刘放，黄卫平．ＨＰＬＣ法测定牡丹皮及其制剂中丹皮酚含量．基层中药杂志，１９９７，１１Ｓ（１）：３２２李益福，李践，章建民．中药丹皮木心药用价值研究芍药甙的定性鉴别和含量含量测定．中草药，１９９４，２５（１１）：５８
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