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慈菇对镉致大鼠脂质过氧化反应干预作用的探讨

摘要撰写人 : TsingHua
浏览次数 : 8  词语: 300   出版日期: 十一月 26, 1999
镉(Cd,Cadmium)是一种重要的重金属环境污染物。已有实验证实,镉能使细胞膜脂质过 氧化作用增强,由此影响生物膜的通透性〔1〕。一些研究显示,镉的毒性与其诱导的氧化损伤密 切相关,且抗氧化剂如抗坏血酸、α生育酚、硒等对镉的氧化毒性有一定的抑制作用〔2〕。实 验表明慈菇(Sagittariasagittifoila)对CCl4致小鼠实验性肝损伤 具有保护作用〔3〕。本文拟采用大鼠镉暴露致脂质过氧化损伤模型,试以新鲜慈菇汁对镉所致的 脂质过氧化损伤作用进行干预实验,探讨慈菇对镉中毒的营养保健作用。1 材料与方法1-1  实验样品 新鲜慈菇采自福建省连城县,取球茎清水洗净、风干,按重量比1∶1加蒸馏水于磨浆 机中磨碎,压滤取汁,于4℃冰箱保存,备用7天。1-2 实验动物及实验方法 选用由中国科 学院上海实验动物中心提供的清洁级健康Wistar大鼠(合格证号:中科动管第005号)体 重为172-36±11-47g。大鼠按体重随机分为6组,每组10只(雌雄各半)。各组每 日给食给水一次,记录进食和进水量。连续观测6周。(1)正常对照组:喂饲基础饲料和去离子 水。(2)镉处理组:喂饲基础饲料和含硫酸镉(CdSO4上海化学制药厂)50mg/L(溶 于去离子水)的水。(3)VE+镉联合处理(阳性对照)组:喂饲强化VE的基础饲料(VE含 量为328-5mg/kg饲料)和含50mg/LdSO4的水。(4)低剂量慈菇汁+镉联合 处理组:喂饲基础饲料和含50mg/LCdSO4的水,10分钟后再灌饲慈菇汁0-5ml/ 只。(5)中剂量慈菇汁+镉联合处理组:喂饲基础饲料和含50mg/LCdSO4的水,10 min后再灌饲慈菇汁1-0ml/只。(6)高剂量慈菇汁+镉联合处理组:喂饲基础饲料和含 50mg/LCdSO4的水,10min后再灌饲慈菇汁1-5ml/只。1-3 基础饲料的 组成(%)及VE含量 面粉40,玉米粉30,麦麸8,豆粉15,植物油1,鱼粉2-5,食 盐1,骨粉1,酵母1,鱼肝油0-5。VE含量为43-2mg/kg。1-4 观察指标及方 法 实验6周后,经眼框采血用于测定血清LPO和GSHpx。颈椎肿臼处死后,迅速分离肝 脏,冷生理盐水漂洗后,用滤纸去血污,剔除脂肪和结缔组织。称肝脏全湿重计算脏器系数。准确 称取1g肝组织,用0-25M蔗糖—0-01MTrisHCl缓冲液9ml,在冰浴中制成 10%肝匀浆。经4000r/min30min离心,取上清液备测。(1)血清及肝匀浆LP O的测定:按TBA比色法测定〔4〕。(2)肝匀浆GSHpx活性的测定:按DTNB直接 法测定〔5〕,结果以mmol/min.g表示。蛋白含量的测定:采用Lowry法测定〔6 〕。(3)肝组织Cd含量的测定:准确称取1g肝脏组织,剪碎后于2ml的硝酸高氯酸(4 ∶1)混合酸中,经电热板湿式消化成澄清溶液,经适当稀释后。用火焰原子吸收分光光度法测定 ,仪器为日立Z8000型原子吸收分光光度计。参比标准物由核工业部五所提供。2 结果2 -1 血清及肝匀浆LPO测定结果(表1)  由表1可见,镉处理及四个联合处理组的血清及 肝匀浆LPO均比正常对照组明显升高;VE+镉联合处理组及高剂量慈菇+镉处理组的血清LP O比镉处理组明显降低;低剂量慈菇+镉处理的血清LPO比VE+镉联合处理组明显高;VE+ 镉联合处理的肝匀浆LPO明显低于镉处理组。表1 各组血清及肝匀浆LPO测定值(-x±s )分 组血清LPO(nmol/ml)肝匀浆LPO(μmolg.w)正常对照组7-41± 1-2324-53±9-76镉处理组17-22±3-51**72-34±13-57** VE+镉联合处理组13-08±2-75**#52-47±2-13**#低剂量慈菇+镉处 理组16-74±3-27**△68-62±12-67**中剂量慈菇+镉处理组14-62 ±3-01**67-33±11-59**高剂量慈菇+镉处理组13-16±2-89**# 60-15±11-87**  注:经方差分析,与正常对照组比较★P<0-05 ★★P< 0-01,与镉处理组比较#P<0-05,##P<0-01与VE+镉联合处理组比较△P< 0-05 △△P<0-012-2 肝匀浆GSHpx及肝组织Cd测定结果(表2)表2  各组肝匀浆GSHpx及肝组织Cd测定值(-x±s)分 组别GSHpx(mmol/m ing)Cd(μg/g.w)正常对照组9-47±1-640-05±0-02镉处理组4 -52±1-21**1-78±0-22**VE+镉联合处理组7-26±1-37**#1 -34±0-18**#低剂量慈菇+镉处理组4-73±1-18**△△1-56±0-20 **##△高剂量慈菇+镉处理组8-85±1-36*##△1-39±0-12**##   注:经方差分析,与正常对照组比较★P<0-05 ★★P<0-01,与镉处理组比较#P< 0-05,##P<0-01与VE+镉联合处理组比较△P<0-05 △△P<0-01   由表2可见,镉处理及四个联合处理组的肝匀浆GSHpx均比正常对照组明显降低,而肝组织 Cd均比正常对照组明显升高;VE+镉联合处理组、中剂量慈菇+镉处理组及高剂量慈菇+镉处 理组的肝匀浆GSHpx均比镉处理组明显升高;低剂量慈菇+镉处理组的肝匀浆GSHpx 比VE+镉联合处理组明显低;低剂量慈菇+镉处理组的肝组织Cd比VE+镉联合处理组明显高 。3 讨论镉是脂质过氧化反应的诱导剂,一定剂量的镉可引起细胞膜的脂质过氧化反应,造成膜 结构的破坏〔1〕。给实验大鼠饮含CdSO450mg/L的水6周后,可致大鼠肝组织镉含量 明显升高,同时血清、肝组织LPO明显增高,肝组织中具有重要氧抗化作用的GSHpx活性 明显降低,镉导致大鼠机体脂质过氧化作用增强、抗氧化功能降低,表明镉致实验大鼠脂质过氧化 损伤模型诱导成功。本实验结果表明,VE+镉联合处理组及高剂量慈菇+镉处理组的血清LPO 比镉处理组明显降低,VE+镉联合处理组、中剂量慈菇+镉处理组及高剂量慈菇+镉处理织的肝 匀浆GSHpx均比镉处理组明显升高,四个联合处理组的肝组织Cd均比镉处理组明显低,提 示VE及中、高剂量的慈菇能够降低由于镉毒性损伤引起的血清及肝组织LPO升高、提高肝组织 抗氧化酶GSHpx的水平、降低由于镉毒性引起的肝组织镉含量,在3个剂量的慈菇组中,以 高剂量组的效果更佳,其血清LPO、肝匀浆GSHpx及肝组织Cd等指标水平接近VE处理 组;综合以上结果,提示慈菇具有与VE相似的拮抗镉致大鼠体内脂质过氧化反应水平过高的作用 。但本实验中3个剂量的慈菇组的肝匀浆LPO值与镉处理组比较均无明显差别,低、中剂量组的 肝组织镉含量还明显比VE+镉处理组高,说明慈菇在拮抗镉致大鼠本内脂质过氧化反应的作用和 过程中,干预剂量是一个重要因素,有关问题还需要继续深入探讨。已有研究表明给大鼠灌饲慈菇 汁有增加机体抗氧化能力的作用,对大鼠CCL4肝毒性具有保护作用,这种作用可能与慈菇含有 的多种维生素和微量元素有关〔3〕。据报道每100g慈菇的可食部含VC4mg、αVE2 -16mg、Se0-92g及其它多种维生素和微量元素〔7〕。与其它疏菜比较,慈菇以富含 αVE为特色,其增强机体抗氧化能力的作用可能与此有关。慈菇是一种珍贵的营养保健食物资 源,本实验初步表明其对镉所致大鼠体内的脂质过氧化反应有一定的干预作用,其详细作用机理有 待于进一步探讨。慈菇对镉致大鼠脂质过氧化反应干预作用的探讨$福建医科大学卫生学教研室! 福州350004@吴小南@汪家梨$福建医科大学卫生学教研室!福州350004@黄芳$福 建医科大学卫生学教研室!福州350004慈菇;;镉;;脂质过氧化为探讨慈菇对镉致大鼠脂 质过氧化反应的干预作用,采用纯种Wistar大鼠,随机分为6组:正常对照组、镉处理组、 阳性对照组、低剂是干预组、中剂量干预组和高剂量干预组,连续观测6周。观察血清及肝匀浆脂 质过氧化物(LPO)、肝匀浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSHpx)、血浆及肝组织镉(Cd) 含量等指标。结果显示中剂量和高剂量干预组的血LPO均比镉处理组明显降低(P<0-05) ,而与阳性对照组无差别:3个剂量干预组肝组织Cd含量均比镉处理组明显降低,高剂量组的肝组织Cd与阳性对照组无差别;3个剂量干预组肝匀浆LPO与镉处理组及阳性对照组均无明显差别;高剂量干预组的GSHpx比镉处理组及阳性对照均明显增高。提示较高剂量的慈菇汁具有拮抗Cd致大鼠脂质过氧化反应的作用。1- 叶建锋.卓鉴波.镉的毒性与脂制过氧化.环境与健康杂志1992 ;9(2) :45
2-  罗扬.镉的发育性机理.国外医学卫生学分册1997 ;24(3) :137
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6-  Lowry OH,etal.Protein measurement withthefolin phenolregent.JBiol Chem 1951 ;193(2) ;265
7-  中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所.食物成分表.第1 版北京:人民卫生出版社,1991 :1005 ★★P<0-01,与镉处理组比较#P<0-05,##P<0-01与VE+镉联合处理组比较△P<0-05 △△P<0-01  由表2可见,镉处

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