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一种植物消毒剂杀菌性能的实验室观察

摘要撰写人 : TsingHua
浏览次数 : 6  词语: 300   出版日期: 六月 30, 1999
由汕头某公司生产的一种植物消毒剂,其主要杀菌成份为金银花、山渣、乌梅等中草药提取液,再经 调配而成,在实验室对其杀菌效果、有机物影响、稳定性与毒性等进行了试验观察,现将结果分析 如下。1方法11中和剂选择试验试验菌为白色念珠菌(ATCC10231)。试验分为(1 )消毒剂+菌液;(2)(消毒剂+菌液)+中和剂;(3)中和剂+菌液;(4)(消毒剂+中 和剂)+菌液;(5)正常菌液对照;(6)未接种细菌的培养基对照。若结果符合第1组无菌生 长,或仅有少数菌落生长,第2组有菌生长并较第1组为多,但较第3、4、5组为少,第3、4 、5组有相似量试验菌生长,菌量达106CFU/ml,其组间差应不超过三组回收菌数平均数 的15%;第6组不长菌,则表明所用中和剂及其浓度适宜。12定量杀菌试验试验菌为大肠杆 菌(8099)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、白色念珠菌(ATCC10231)。 试验用悬液定量法进行,将05ml菌悬液与45ml消毒液混合,作用至预定时间,取0 5ml菌药混合液,加入45ml中和剂溶液中混匀,中和10min,取该液或稀释液05 ml接种平皿,倾注普通营养琼脂并混匀。置37℃温箱培养48小时(白色念珠菌用沙堡氏培养 基,32℃培养48h),计算杀灭率。13有机物影响试验试验菌用大肠杆菌,在菌液中加入 小牛血清,使菌液中血清最终浓度达10%,进行定量杀菌试验,并比较0、10%小牛血清两组 的杀灭率。14稳定性试验将包装完好的植物消毒剂置54~57℃14天,于放置前、后用定 量消毒试验检测杀灭大肠杆菌效果。15毒性试验151急性经口毒性试验:试验用成年健 康NIH小白鼠,随机分5个剂量组(10000、4640、2150、1000mg/kg及 对照组),每组10只,雌、雄各半。试验前将药物摇匀,用灭菌水稀释成所需浓度,以002 ml/g体重灌胃量对试验组作一次性灌胃染毒,对照组以相同灌胃量灌给灭菌水,立即观察并记 录动物的中毒表现、症状出现和消失及死亡情况。灌药后2小时试鼠正常饲养,观察期为14天。 以霍恩氏法计算LD50,152急性皮肤刺激试验:选用健康成年新西兰家兔4只,雌雄各 半。试验前24小时将动物背部脊柱两侧披毛剪去(2×3)cm2,并将05ml受试物(已 摇匀)直接涂在一侧去毛区,然后用一层油纸覆盖,再用胶布和绷带固定;另一侧涂敷相同量灭菌 水作对照,涂敷4h后用温水除去残留受试物,分别于去除受试后4h、24h和48h观察受试 皮肤局部反应。2结果21中和剂试验结果预试验表明,含05%卵磷脂+05%吐温80 的磷酸盐缓冲液可有效中和植物消毒剂原液的消毒作用。试验结果中和剂、中和产物对试验菌无不 良影响,正式中和试验用消毒剂原液,作用20min,结果符合中和剂试验的各项要求(表1) 。表1植物消毒剂中和剂试验组别平均菌数(CFU/ml)消毒剂+菌液0(消毒剂+菌液)+ 中和剂410×102中和剂+菌液237×106(消毒剂+中和剂)+菌液222×1 06正常菌液对照225×106未接种细菌的培养基对照0注:试验温度为20℃,结果为3 次试验平均值。21杀菌效果试验表明,植物消毒剂25%浓度作用7分钟,对大肠杆菌的杀灭 率达9992;625%浓度作用7分钟,对金黄色葡萄球菌的杀灭率为9990%;原液 作用20分钟,对白色念珠菌的杀灭率达9997%(表2)。表2植物消毒剂对微生物的杀灭 效果试验菌种消毒剂浓度(%)对照组平均菌数(CFU/ml)不同时间(min)的杀灭率( %)1357102030大肠杆菌5027800099569998101002588 74983699879992金葡球菌12520200010100101006 259871995699789990白念菌10990499559997 9995022700089869647991396223有机物对植物消毒剂 杀菌效果的影响试验结果,菌悬液中含10%小牛血清对植物消毒剂的杀菌效果基本没有影响(表 3)表3有机物对植物消毒剂杀灭大肠杆菌效果的影响小牛血清浓度(%)消毒剂浓度(%)对照 组平均菌数(CFU/ml)不同时间(min)的杀灭率(%)13570502780000 9956999810010025887498369987999210501 8400009016999499991002571148793979398 97注:试验温度为20℃,结果为5次试验平均值。24稳定性试验将植物消毒剂置54~ 57℃烘箱14天,其对大肠杆菌的杀灭效果无明显变化(表4)表4植物消毒剂的稳定性试验结 果放置时间(天)消毒剂浓度(%)对照组平均菌数(CFU/ml)不同时间(min)的杀灭 率(%)1357050278000099569998100100145018800 0099509996100100注:试验温度为20℃,结果为5次试验平均值。25 毒性试验251试验表明,急性经口毒性试验最高剂量组试鼠均未出现中毒症状及死亡情况, 故雌、雄小鼠急性经口LD50>10000mg/kg。属实际无毒级。252急性皮肤刺 激试验,在各观察时间内,受试皮肤均无红斑、水肿等异常反应,平均积分值为00。属无刺激 性。3结语结果表明,25%植物消毒剂在20℃作用7分钟,对大肠杆菌的杀灭率为9992 %;625%浓度作用7分钟,对金黄色葡萄球菌的杀灭率为9990%;原液作用20分钟 ,对白色念珠菌的杀灭率达9997%;10%小牛血清对该植物消毒剂影响不大。54~57 ℃存放14天杀菌效果基本稳定。该植物消毒剂的急性经口毒性属实际无毒级,对皮肤无刺激性。 一种植物消毒剂杀菌性能的实验室观察@黄美卿@方苓$广东省卫生防疫站569998100 1001450188000099509996100100注:试验温度为20℃,结果 为5次试验平均值。25毒性试验251试验表明,急性经口毒性试验最高剂量组试鼠均未 出现中毒症状及死亡情况,故雌、雄小鼠急性经口LD50>10000mg/kg。属实际无毒 级。252急性皮肤刺激试验,在各观察时间内,受试皮肤均无红斑、水肿等异常反应,平均 积分值为00。属无刺激性。3结语结果表明,25%植物消毒剂在20℃作用7分钟,对大肠 杆菌的杀灭率为9992%;625%浓度作用7分钟,对金黄色葡萄球菌的杀灭率为99 90%;原液作用20分钟,对白色念珠菌的杀灭率达9997%;10%小牛血清对该植物消毒剂影响不大。54~57℃存放14天杀菌效果基本稳定。该植物消毒剂的急性经口毒性属实际无毒级,对皮肤无刺激性。一种植物消毒剂杀菌性能的实验室观察@黄美卿@方苓$广东省卫生防疫站

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