糖尿病（中医消渴病）是一种常见、多发的内分泌代谢紊乱性疾病，其死亡率仅次于心血管疾病和肿 瘤，成为威胁人类生命的第三大疾病。因此，糖尿病及其慢性并发症的防治是当前世界各国医学界 重点研究的课题之一。本实验通过对链脲佐菌（ＳＴＺ）造成大鼠糖尿病模型的研究，探讨左归降 糖方对实验大鼠糖代谢及胰岛功能的影响。１材料与方法１．１动物健康ＳＤ大鼠，雌雄各半，３ 月龄，体重１００～１５０ｇ，由本院实验动物中心提供。１．２药物左归降糖方：药材购自湖南 中医学院杏林药号，药材鉴定后水煎两次，合并滤液，浓缩成２ｇ／ｍｌ生药浓度，冰箱贮存备用 。愈三消：吉林省辉南生化药业有限公司产品（９６卫药准字２－３１号），批号：９７０２１４ 。达美康：法国施维雅与天津华津药厂合作生产产品，批号：９７０１０６。１．３试剂链脲佐菌 素（ＳＴＺ）：美国Ｓｉｇｍａ公司产品；血糖测试盒：深圳月亮湾生物工程研究所提供；胰岛素 、胰高血糖素放免测试盒：北京邦定生物医学公司提供（批号：９７０６２５，９７０６２３）１ ．４实验性链脲佐菌素糖尿病大鼠模型制备方法参照文献［１、２］，并加以改进，以高热量饲料 （１０％花生油、１０％猪油、１５％炼乳、６５％普通饲料）喂饲４周后，禁食不禁水１４ｈ， 然后各鼠腹腔注射１％ＳＴＺ（０．０５ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸缓冲液稀释，ＰＨ４．４，４℃）剂量 ：每鼠３０ｍｇ／ｋｇ，２ｄ后，同样方法及剂量再注射１次。１．５实验方法将ＳＤ大鼠６０只 ，随机分为正常组（１０只）、糖尿病造模组（５０只），然后按上述模型制备方法造模，正常组 饲以普通饲料。当造模组大鼠第二次腹腔注射１％ＳＴＺ４８ｈ后，分别测定空腹血糖及葡萄糖耐 量试验，将糖负荷１ｈ后血糖＞１１．１ｍｌ／Ｌ的４８只大鼠纳入实验，并按体重、性别及血糖 值分层，随机分为模型组、左归降糖方组、愈三消中药对照组、达美康对照组（每组１２只）。然 后左归降糖方组按６．０３ｇ／ｋｇ灌胃，愈三消组以０．８６ｇ／ｋｇ、达美康组以７．２ｍｇ ／ｋｇ灌胃，正常组与模型组则以等量蒸馏水灌胃，容量１０ｍｌ／ｋｇ，每日１次，连续３０ｄ 。除正常组大鼠每日饲以普通饲料外，其余各组均隔日饲以１次高热量饲料，１次普通饲料。灌胃 第１５天及第３０天，分别作空腹血糖及糖耐量测定，末次给药半小时后，将各组大鼠颈动脉放血 处死，按要求分别留取血样及各组织脏器。１．６观察指标与测定方法血糖采用葡萄糖氧化酶法测 定；胰岛素、胰高血糖素均采用放射免疫法测试。以上操作方法参照试剂盒说明书。１．７统计学 处理多组计量资料数据处理，方差齐性的采用方差分析，组间比较用ｑ检验；方差不齐者采用秩和 检验。２结果２．１模型动物的考查造模组大鼠经喂饲高热量饲料以及ＳＴＺ腹腔注射后，表现出 活动减少，饮水量及小便排泄量明显增多，体重增长略高于正常组大鼠的特点。经灌服葡萄糖（灌 胃浓度：６．７５ｇ／ｋｇ体重）作糖耐量试验结果如下：造模组大鼠与正常组大鼠的空腹血糖值 无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。而灌服葡萄糖１ｈ，造模组大鼠的血糖值明显增高，与正常组比 较具有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；灌服葡萄糖２ｈ及３ｈ后，造模组大鼠的血糖值仍明显高于 正常组大鼠（Ｐ＜０．０１），表明造模组大鼠糖耐量试验异常。此外，随机抽取正常组与造模组 大鼠作血清总胆固醇、甘油三酯测定，结果表明造模组大鼠的血清总胆固醇、甘油三酯含量明显高 于正常组（Ｐ＜０．０５）。以上结果显示，该模型大鼠类似于人类非胰岛素依赖型糖尿病的发病 特点，亦说明该模型成功，与文献报导一致。２．２左归降糖方对葡萄糖耐量的影响治疗给药第１ ５天时，空腹血糖各组之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５），而糖负荷１ｈ的血糖值，模型组与正 常组比较有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１），提示模型是成功的。此外，左归降糖方组与模型组 、愈三消组、达美康组比较均有显著性差异（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），表明左归降糖方能 明显抑制糖负荷后血糖值的升高，且这种作用强于愈三消及达美康。糖负荷３ｈ时，左归降糖方又 能显著降低血糖（与模型组比较Ｐ＜０．０５）。治疗给药３０ｄ时，模型组大鼠的空腹血糖显著 升高（与正常组比较，Ｐ＜０．０１）。而达美康、左归方均显示出明显地抑制空腹血糖升高的作 用（与模型组比较，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）；糖负荷１ｈ时，达美康对糖负荷后血糖的升 高没有明显地抑制作用。而左归降糖方有抑制糖负荷１ｈ后血糖升高的作用趋势。糖负荷３ｈ时， 则左归降糖方组的血糖值与模型组比较具有显著性差异（Ｐ＜０．０５），表明左归降糖方能明显 降低糖负荷３ｈ时的血糖，见表１。表１左归降糖方治疗给药对大鼠糖耐量试验中血糖值的影响（ ｍｍｏｌ／Ｌ，ｘ±ｓ）正常组模型组达美康组愈三消组左归组治疗前ｎ１０１２１２１２１２空 腹３．７４±１．０３４．３７±１．３１５．０１±１．０１６．０５±４．２６４．４６±２ ．０２糖负荷１ｈ８．９６±１．７７※※１９．５４±８．０２２０．６４±７．５３１９．４ ０±６．５７１９．９５±７．１６糖负荷３ｈ３．８５±０．７０※※１０．６４±６．８２８ ．７３±３．９６９．９９±６．９６９．４１±５．６９治疗１５天ｎ９１１１２１２１１空腹 ４．７３±０．６４５．１４±１．０７４．２４±０．６１４．３３±１．７５３．９４±０． ８９糖负荷１ｈ７．８６±１．１４※※２０．６６±５．５２１８．３２±５．８９１９．９３ ±７．４９１２．０１±３．７１※※△＃糖负荷３ｈ６．６４±１．３６９．７８±１．９２７ ．０８±２．１２８．５４±４．３１５．４０±１．７６治疗３０天ｎ８１１１２１１９空腹２ ．８６±１．３４※※９．４５±５．３３４．１７±１．０７※※７．３４±３．３７６．１０ ±１．０４※糖负荷１ｈ７．９１±０．８０※※２２．４６±１１．８４２１．８７±７．４６ ２２．５１±８．１８１６．６０±８．０６糖负荷３ｈ５．９２±１．０１※１０．６２±７． ５４４．８３±２．０９１０．０７±５．３２４．６１±１．０６※注：与模型组比较※Ｐ＜０ ．０５※※Ｐ＜０．０１与达美康组比较△Ｐ＜０．０５与愈三消组比较＃Ｐ＜０．０５２．３左 归降糖方对空腹血胰岛素、胰高血糖素的影响治疗用药３０ｄ时，模型组大鼠空腹血中胰岛素含量 降低，与正常组比较具有显著性差异（Ｐ＜０．０５），表明该模型存在着胰岛素的不足。此外， 左归降糖方虽与模型组比较无显著性差异，但左归降糖方有升高空腹血胰岛素含量的趋势。对胰高 血糖素的影响方面，虽然模型组大鼠与正常组相比具有升高胰高血糖素的作用趋势，而左归降糖方 、达美康组与模型组比较具有降低胰高血糖素的作用趋势，但经统计分析其总体差异无显著性意义 （Ｐ＞０．０５），见表２。表２左归降糖方治疗给药３０天对大鼠空腹血胰岛素、胰高血糖素含 量的影响（ｘ±ｓ）组别ｎ胰岛素含量（μｍｏｌ／ｍｌ）ｎ胰高血糖素含量（ｐｇ／ｍｌ）正常 组８４０．０４±１６．０１※７１６５．０１±６１．５２模型组１０１８．３９±１３．６２ ８２９３．９６±９９．２６达美康组８２１．９６±９．０６７２０７．２３±４４．８７愈三 消组１０１９．９９±１３．８４７２３８．４３±１３４．５４左归方组７３４．４２±１５． １７７２０１．５２±７９．５５注：与模型组比较，※Ｐ＜０．０５３讨论现代研究表明，非胰 岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）的发病机理主要为胰岛素分泌不正常和胰岛素抵抗。而胰岛素抵 抗是ＮＩＤＤＭ发病的显著特征，其发生机理主要有三个方面的原因［３、４］：①胰岛β细胞分 泌胰岛素不正常。②血循环中存在胰岛素拮抗物质。其中激素类如胰高血糖素、生长激素、皮质醇 及儿茶酚胺等，均在周围组织有对抗胰岛素的作用。③周围组织靶细胞对胰岛素反应性有缺陷。上 述激素中，胰岛素与胰高血糖素均系胰岛细胞所分泌，它们是一对维持人体血糖平衡的重要激素。 我们以明代医家张景岳阴阳互济法的代表方左归丸、左归饮化裁组成的左归糖降方用于ＮＩＤＤＭ 的防治，取得了较为满意的疗效，前期实验研究也证实该方具有一定的降糖作用［５、６］。本实 验研究中，我们以小剂量链脲佐菌素给大鼠腹腔注射并配合高热量饲料喂饲造成实验性ＮＩＤＤＭ 同时给予药物进行治疗。结果表明，左归降糖方对高空腹血糖的降低作用与达美康相似，而且左归 降糖方又能抑制糖负荷后血糖的升高，这种作用则优于达美康。左归降糖方对实验大鼠胰岛功能的 影响方面，结果表明，模型组大鼠与正常大鼠比较存在着胰岛素分泌的不足以及胰高血糖素含量的 增高。左归降糖方治疗用药后，则有增加胰岛素含量和抑制胰高血糖升高的作用趋势。上述研究尚 有待进一步深入左归降糖方对实验性糖尿病大鼠糖代谢及胰岛功能的影响@喻嵘@葛金文@陈大舜 @易法银@邓奕晖@吴勇军@朱传湘$湖南中医学院内分泌疾病研究室左归降糖方,实验性糖尿病 ,血糖,糖耐量试验,胰岛试验以小剂量链脲佐菌素给大鼠腹腔注射并配合高热量饲料喂饲造成实 验性糖尿病，同时给予药物进行治疗。结果表明：左归降糖方对于增高的空腹血糖具有降低作用， 且又能抑制糖负荷后血糖的升高。对实验大鼠胰岛功能的影响方面，该方治疗用药后，又有增加胰 岛素含量和抑制胰高血糖素升高的作用趋势１谢明智，刘海帆，张凌云，等．实验性肥胖及糠尿病 大鼠模型．药学学报，１９８５，（２０）：８０１２雷涛，刘宋汉．实验性ＮＩＤＤＭ大鼠主动 脉内膜早期超微结构的改变．中华内分泌代谢杂志，１９９４，１０（４）：２０１３Ｏｌｅｆｓ ｋｙＪｍ，ｅｔａｌ·Ｉｎｓｕｌｉｎａｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎｏｂｅｓｉｔｙａｎｄｎｏｎ－ｉｎｓｕｌｉｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｔｙｐｅⅡｄｉａｂｅｔｅｓｍｉｌｅｔｕｓ．ＡｍＪｐｈｙｓｉｏｌ，１９８２，２４３：Ｅ１５４方圻主编．现代内科学．北京：人民军医出版社，１９９５．２７０５５陈大舜，易法银，葛金文，等．左归降糖灵对实验性糖尿病
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