川参通注射液是由丹参、当归、川芎、麦冬等中药制成。在生产过程中经过高浓度（８０％）乙醇处 理，去除了多糖及鞣质、树胶等其他大分子物质。为了有效地保证注射液的质量，尽可能弄清楚其 主要成分的含量，在研究测定本品原儿茶醛、总黄酮方法的基础上，又进一步研究了用比色法测定 川参通注射液中糖的含量的测定方法。１实验材料川参通注射液（中国人民解放军第９１医院提供 ，每ｍｌ含生药１．１ｇ）；无水葡萄糖，分析纯；蒽酮，化学纯；硫酸，分析纯；紫外分光光度 计（ＵＶ－２４０，日本岛津）。２标准曲线的制备２．１对照品溶液的配制：精密称取无水葡萄 糖３０．０ｍｇ，置１００ｍｌ量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀即得（每ｍｌ中含无水葡萄 糖０．３ｍｇ）。２．２显色剂的配制：称取蒽酮０．２ｇ，加８０％（Ｖ／Ｖ）硫酸溶液１００ ｍｌ，使溶解，摇匀即得（临用时现配）。２．３测定波长的确定：取对照品溶液及样品溶液，按 标准曲线绘制方法项下，自“加水至２．０ｍｌ……”起，至“照分光光度法（《中国药典》１９ ９５年版１部附录ＶＢ页）”止，于６００～７００ｎｍ波长范围内扫描，结果样品与对照品溶液 均在６２５ｎｍ波长处有最大吸收。２．４标准曲线的制备：精密吸取对照品溶液０．０、０．１ 、０．２、０．３、０．４、０．５ｍｌ，分别置于１０ｍｌ量瓶中，各加水至２．０ｍｌ，加新 鲜配制的蒽酮硫酸溶液至刻度，摇匀，置沸水中加热５ｍｉｎ，取出，再置冰浴中冷却５ｍｉｎ后 ，照分光光度法（《中国药典》１９９５年版１部附录ＶＢ页）在６２５ｎｍ波长处测定吸收度。 结果见表１。表１葡萄糖量与吸收度的关系浓度（ｍｇ）０．００００．０３００．０６００．０ ９００．１２００．１５０吸收度０．００００．１６２０．３２６０．４７２０．６１４０．７ ８８以吸收度与葡萄糖量作回归分析，得回归方程：Ｃ＝０．１９４２Ａ－０．０００１２γ＝０ ．９９９３，表明吸收度与葡萄糖含量在０～０．１５ｍｇ之间呈良好线性关系。３方法学考察３ ．１蒽酮－硫酸显色剂的稳定性考察：按样品测定方法项下，依法测定。室温下在０、１０、２０ 、３０、４０、５０ｍｉｎ时分别测定，其吸收值为０．４８５、０．４８２、０．４８０、０． ４７８、０．４７６、０．４７２。提示，在３０ｍｉｎ内测定是稳定的。３．２精密度试验：精 密吸取同一样品（９５０９１８）稀释液２ｍｌ，置１０ｍｌ量瓶中，照标准曲线制备项下的方法 ，自“加水至２ｍｌ……”起，测定６次，其吸收度为：０．４４６、０．４４６、０．４４５、 ０．４４７、０．４４７、０．４４６，平均为０．４４６±０．０００８，ＲＳＤ％＝０．１６ ９。３．３重现性试验：取同一样品（９５０９１８）的稀释液２ｍｌ，置１０ｍｌ量瓶中，同时 作６份，照标准曲线的制备项下的方法，自“加水至２ｍｌ……”起，依法测定，测定结果见表２ 。３．４回收试验：分别精密吸取样品稀释液（９５０９１８）１ｍｌ，共６份，其中１份作对照 ，加外５只加入葡萄糖对照液（０．３ｍｇ／ｍｌ）０．３ｍｌ，照标准曲线制备方法项下，自“ 加水至２ｍｌ……”起，依法测定。测定结果见表３。表２川参通注射液重现性试验结果测定次数 含量（ｍｇ／ｍｌ）平均浓度ＲＳＤ（％）１５３．２１２５３．３３３５３．３３５３．５３± ０．３７０．６８４５３．５３５５３．９４６５４．０６表３川参通注射液注射液回收试验结果 加样量（ｍｇ）实测得量（ｍｇ）回收率（％）平均回收率（％）ＲＳＤ（％）０．０９０．０９ １１０１．２０．０９０．０９４１０４．４０．０９０．０９２１０１．８１０１．６４±１． ６９０．０１７０．０９０．０８９９９９．９０．０９０．０９１１００．９４样品测定精密吸 取样品０．２ｍｌ，置２５０ｍｌ容量瓶中，加水至刻度，摇匀（文中简称为稀释液）精密吸取稀 释溶液２ｍｌ，置１０ｍｌ量瓶中，照标准曲线的制备项下，自“加水至２．０ｍｌ……”起，依 法测定吸收度，代入回归方程，计算，即得。结果见表４。表４川参通注射液糖含量测定结果（ｍ ｇ／ｍｌ）批号含量９５０９１８（ｎ＝６）５３．５３９５０９１３（ｎ＝３）５７．６９５０ １１８（ｎ＝３）５８．４５讨论５．１糖和多糖广泛存在于中药中。尤其是根类中药中含量更高 。本品中麦冬、当归、川芎等中均含有大量的糖类成分。经水煎煮提取，部分多糖水解成单糖，加 之原来存在的单糖，均溶于水提取液中。虽经８０％乙醇处理，除去了鞣质、树胶及多糖等大分子 物质，但单糖类成分仍然存在于溶液中，占有总固体的量。因此，测定糖的含量，对控制制剂质量 有非常重要的意义。５．２多糖含量测定方法较多，胡奇芬等用蒽酮显色法［１］测定多糖［２， ３］、酚－硫酸显色法测定单糖、多糖［４，５］、３．５－二硝苯水杨酸法（ＰＮＳ法）测定单 糖［６，７］重量法［８］。川参通注射液中４种中药均含有多糖成分，故样品实际是一多种单糖 与多糖的混合物。同时经过煎煮提取、浓缩、灭菌等加热过程，多糖可能部分水解，故选用酚－硫 酸法测定。对单糖、多糖可同时测定。５．３样品的处理是糖含量测定中的关键。文献报道的方法 ，大部分是用其多糖纯品测定。中药制剂尚含有其他成分，为了排除其他成分对吸收度的影响，胡 氏［１］用样品０．５ｍｌ，加无水乙醇９ｍｌ，冷藏、放置过滤。张氏［２］取样品０．５ｍｌ ，加无水乙醇５ｍｌ，３０００ｒ／ｍｉｎ，离心１５ｍｉｎ，沉淀中再加无水乙醇３ｍｌ，同上 操作２次。本项研究中认为取样品０．５ｍｌ，加无水乙醇９ｍｌ，（含醇量９４．７％）静置， 多糖沉淀比较完全。５．４用蒽酮－硫酸法比色测定糖的含量，方法可靠。但是，在测定过程中应 严格控制比色条件，尽可能减少操作误差。川参通注射液中糖的比色测定方法研究@申庆亮@唐启 令$中国人民解放军第９１医院１胡奇芬，苏彦珍，夏晓君，等．不同工艺对复方中药制剂中多糖 含量的影响．中成药，１９９０，１２（１１）∶６２张卫星，王乃华．麦冬多糖及其口服液的含 量测定．中成药，１９９２，１４（４）∶８３费寿耆．猪苓多糖含量测定方法的研究．中成药研 究，１９８６，（４）∶９４朱立文，郁瑞昌．黄芪多糖含量测定方法的探讨与比较．中成药研究 ，１９８７，（６）∶１１５臧其中，万淑莹，何光星，等．蚕蛹多糖的分离与分析．中成药，１ ９９２，１４（３）∶３５６朱立文，郁瑞昌．黄芪多糖含量测定方法的探讨与比较．中成药研究 ，１９８７，（６）∶１１７董文慧，肖春娥，沙英威，等．云芝肝泰中匀芝多糖的工业分析方法 ．中成药，１９９０，１２（２）∶３３８叶萍．大菟丝子与菟丝子化学成分的比较研究．中成药 ，１９９２，１４（３）∶３６菌等加热过程，多糖可能部分水解，故选用酚－硫酸法测定。对单 糖、多糖可同时测定。５．３样品的处理是糖含量测定中的关键。文献报道的方法，大部分是用其 多糖纯品测定。中药制剂尚含有其他成分，为了排除其他成分对吸收度的影响，胡氏［１］用样品 ０．５ｍｌ，加无水乙醇９ｍｌ，冷藏、放置过滤。张氏［２］取样品０．５ｍｌ，加无水乙醇５ ｍｌ，３０００ｒ／ｍｉｎ，离心１５ｍｉｎ，沉淀中再加无水乙醇３ｍｌ，同上操作２次。本项 研究中认为取样品０．５ｍｌ，加无水乙醇９ｍｌ，（含醇量９４．７％）静置，多糖沉淀比较完 全。５．４用蒽酮－硫酸法比色测定糖的含量，方法可靠。但是，在测定过程中应严格控制比色条 件，尽可能减少操作误差。川参通注射液中糖的比色测定方法研究@申庆亮@唐启令$中国人民解 放军第９１医院１胡奇芬，苏彦珍，夏晓君，等．不同工艺对复方中药制剂中多糖含量的影响．中 成药，１９９０，１２（１１）∶６２张卫星，王乃华．麦冬多糖及其口服液的含量测定．中成药 ，１９９２，１４（４）∶８３费寿耆．猪苓多糖含量测定方法的研究．中成药研究，１９８６， （４）∶９４朱立文，郁瑞昌．黄芪多糖含量测定方法的探讨与比较．中成药研究，１９８７，（ ６）∶１１５臧其中，万淑莹，何光星，等．蚕蛹多糖的分离与分析．中成药，１９９２，１４（ ３）∶３５６朱立文，郁瑞昌．黄芪多糖含量测定方法的探讨与比较．中成药研究，１９８７，（６）∶１１７董文慧，肖春娥，沙英威，等．云芝肝泰中匀芝多糖的工业分析方法．中成药，１９９０，１２（２）∶３３８叶萍．大菟丝子与菟丝子化学成分的比较研究．中成药，１９９２，１４（３）∶３６
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