鲎试剂用于乳酸环丙沙星注射液的细菌内毒素检测胡汉昆查仲玲（湖北医科大学附属第二医院武汉４ ３００７１）吴菁（同济医科大学附属协和医院）摘要本试验采用最大有效稀释法，分析并解决了 ０．２％乳酸环丙沙星注射液对鲎试剂的干扰作用。经抑制增强试验表明，样品１∶６稀释，选用 灵敏度为０．２５Ｅｕ·ｍｌ－１的鲎试剂可以检测样品的细菌内毒素。关键词乳酸环丙沙星注射 液，细菌内毒素，鲎试剂鲎试剂能与细菌内毒素发生非常灵敏的特异性反应，凡影响凝胶形成的因 素，对实验结果会产生影响，出现假阴性或假阳性结果。我们参照中国药典１９９５年版“细菌内 毒素检查法”中干扰试验的基本原理及细菌内毒素检测方法，对０．２％乳酸环丙沙星注射液的细 菌内毒素检测方法进行了研究。１实验材料１．１鲎试剂批号９６０５０８，每支０．１ｍｌ，标 示灵敏度０．２５Ｅｕ·ｍｌ－１，厦门鲎试剂厂。１．２细菌内毒素工作标准品批号９６０１０ １，每支１０Ｅｕ，厦门鲎试剂厂。１．３鲎试剂溶解液批号９６０５２３，每支２ｍｌ，厦门鲎 试剂厂。１．４
乳酸环丙沙星注射液１００ｍｌ（２００ｍｇ），批号９６０５２４、９６０５３ １、９６０６１２、９６０６１９、９６０６２６，本院制剂，热原检查合格。１．５玻璃仪器１ ｍｌ注射器等，均经除热原处理。２方法与结果２．１细菌内毒素限值计算按部颁标准ＷＳ－１４ ６（Ｘ－１３１）－９３（２），本品热原检查注射剂量Ｄ＝３ｍｌ·ｋｇ－１。据中国药典１９ ９５年版，细菌内毒素对家兔致热阈改为Ｋ＝５Ｅｕ·ｋｇ－１，本品细菌内毒素理论限值Ｌ＜Ｋ ／Ｄ即５／３Ｅｕ·ｍｌ－１。２．２本品最大有效稀释倍数ＭＶＤＭＶＤ＝Ｌ／λｂ＝５３／０ ．２５＝６．６７即１∶６倍。λｂ为鲎试剂灵敏度标示值０．２５Ｅｕ·ｍｌ－１。２．３鲎试 剂灵敏度标定据中国药典１９９５年版附录，用溶解液将细菌内毒素工作标准品按１→２等比稀释 成系列浓度的内毒素溶液，然后与鲎试剂混和置３７℃水浴６０ｍｉｎ，结果见表１。标定值０． ２５Ｅｕ·ｍｌ－１符合规定。表１鲎试剂灵敏度标定结果细菌内毒素浓度（Ｅｕ·ｍｌ－１）结 果１．０＋＋＋＋０．５＋＋＋＋０．２５＋＋＋＋０．１２５－－－－０．０６２５－－－－２ ．４干扰试验用溶解液将样品稀释成１∶２，１∶４，１∶６系列浓度，以各稀释浓度样品将细菌 内毒素工作标准品按１→２等比稀释成系列浓度的内毒素溶液，以各稀释浓度的样品稀释的内毒素 系列溶液与鲎试剂混和进行抑制增强试验，结果见表２。５份样品反应结果均相同。表２抑制增强 试验结果稀释比例内毒素系列溶液（Ｅｕ·ｍｌ－１）０．１０．５０．２５０．１２５０．０６ ２５原液－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－１∶２＋＋＋＋－－－－－－－－－－－－ －－－－１∶４＋＋＋＋＋＋＋＋－－－－－－－－－－－－１∶６＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－ －－－－－－－２．５将５批样品稀释６倍与０．２５Ｅｕ·ｍｌ－１灵敏度的鲎试剂混和结果均 为阴性，５批样品热原检查结果均为阴性；另于５批样品中加入细菌内毒素工作标准品，使内毒素 在样品中含量为１．６７Ｅｕ·ｍｌ－１，各稀释６倍与０．２５Ｅｕ·ｍｌ－１灵敏度的鲎试剂 混和，结果均呈阳性。３讨论由表２可知，样品及１∶２，１∶４稀释液均对鲎试剂有抑制作用， 但在最大有效稀释１∶６时，抑制作用消失。以上试验表明，将样品１∶６稀释，以标示灵敏度０ ．２５Ｅｕ·ｍｌ－１的鲎试剂可用于样品的细菌内毒素检测。鲎试剂用于乳酸环丙沙星注射液的
细菌内毒素检测@胡汉昆@查仲玲$湖北医科大学附属第二医院@吴菁$同济医科大学附属协和医 院乳酸环丙沙星注射液，细菌内毒素，鲎试剂本试验采用最大有效稀释法，分析并解决了０．２％乳酸环丙沙星注射液对鲎试剂的干扰作用。经抑制增强试验表明，样品１∶６稀释，选用灵敏度为０．２５Ｅｕ·ｍｌ－１的鲎试剂可以检测样品的细菌内毒素。