粒细胞集落刺激因子和免疫球蛋白在母婴分布的探讨北京医科大学人民医院(100044)儿科刘 桂兰蒋佩华殷慧君妇科魏艳秋免疫科杨铁生樊春红摘要目的:为了找到脐血中粒细胞集落刺激因子 (G-CSF)产生的部位,为脐血的基础研究和临床应用提供科学依据。方法:应用G-CSF ELISA试剂盒采用酶联免疫方法,分别测定了48例妊娠37~38周健康孕妇静脉血清和5 0例正常足月新生儿脐静脉血清和49例脐动脉血清G-CSF阳性率和含量。结果:阳性率分别 为833%、74%和816%,并测定了37例阳性脐静脉血中G-CSF的含量,结果S /N最高1994,最低21,x±s为59±395。经统计学处理,脐静脉血和孕妇 静脉血阳性率有显著性差异(P<001),脐静脉血和脐动脉血阳性率也有显著性差异(P< 001)。并用单向环状免疫扩散(RID)法测得51例正常足月儿脐静脉血中免疫球蛋白I gG含量明显高于正常值(P<005)。结论:测得结果显示,脐血中G-CSF主要来源于 脐静脉的胎盘中。推测胎盘的某些细胞具有产生G-CSF的功能。脐血中含有高水平的IgG。 关键词脐血粒细胞集落刺激因子免疫球蛋白现已证实,脐血中促粒单核系集落刺激因子(GM-C SF)、G-CSF和促单核巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)水平较高,尤以G-CSF为 甚[1,2]。但脐血中的造血因子究竟产生于何处,目前尚无定论,至于脐血中免疫球蛋白含量 如何,也无确切报道。我们应用G-CSFELISA试剂盒分别测得了48例妊娠37~38周 健康孕妇静脉血清和50例正常足月新生儿脐静脉血清和49例脐动脉血清G-CSF阳性率和含 量,并测得51例正常足月儿脐静脉血中免疫球蛋白(IgG)含量。现将其结果报告如下。1材 料与方法11脐动、静脉血的收集脐血标本来源于我院产科出生的正常足月儿,在胎盘未娩出前 采集标本。脐动脉血的采集在胎儿娩出后,用止血钳夹住脐静脉,剪断脐动脉,将来自胎儿的血收 集在10ml的玻璃试管内。取脐静脉血时,用血管钳夹住脐动脉,剪断脐静脉,将来自胎盘的血 收集在试管内,分离血清待测。12孕妇血标本的收集孕妇来自我院产科门诊妊娠37~38周 的体检健康的孕妇,清晨空腹抽取静脉血1ml,分离备用。13方法采用ELISA法检测, G-CSFELISA试剂盒购自北京协和医院诊断试剂厂,按其说明及文献进行测定[3]。所 得OD值按下述公式计算:S/N=样品OD值/阳性对照OD值均值。S/N≥21为阳性, <21为阴性。14免疫球蛋白的测定检测方法及结果判断见文献[4]。2结果测得孕妇静 脉血清4/48例阳性(833%);足月新生儿脐动脉血中4/49阳性(816%);脐 静脉血中31/50阳性(74%)。并测定其中37例阳性脐静脉血清中G-CSF含量,结果 S/N最高1994,最低21,x±s为59±395。经统计学处理,脐静脉血和孕 妇静脉血阳性率有显著性差异(P<001),脐静脉血与脐动脉血阳性率也有显著性差异(P <001)。并用单向环状免疫扩散(RID)法检测51例正常足月儿脐静脉血中免疫球蛋白 (IgG)含量,测得结果均值为(1314±367)g/L,高于正常值,经统计学处理 ,脐静脉血中免疫球蛋白(IgG)含量与正常值对照有显著性差异(P<005),IgA未 测到。IgM阳性率为196%,含量明显低于正常值,均值为(830±78)mg/L,经 统计学处理,脐静脉血IgM含量与正常值对照有显著性差异(P<005)。3讨论G-CS F由单核细胞、内皮细胞、成纤维细胞和激活的T淋巴细胞所产生,其主要生物活性是刺激粒细胞 克隆生长,并激活成熟的粒细胞,增强中性粒细胞通过抗体依赖细胞介导的细胞毒(ADCC)途 径杀伤肿瘤细胞的功能[5]。我们曾用G-CSFELISA试剂盒测定的50例阳性脐静脉血 中G-CSF含量比正常人血清中G-CSF含量高10倍以上[6],为了确定脐血中如此高的 G-CSF来源何处,我们分别测定了48例妊娠37~38周健康孕妇的静脉血中G-CSF阳 性率为833%,正常足月新生儿脐动脉血阳性率为816%,50例脐静脉血阳性率为74 %,并测定了其中37例阳性脐静脉血中G-CSF含量,结果表明,来源于胎盘的脐静脉血中G -CSF阳性率及含量明显高于孕妇静脉血及来源于胎儿的脐动脉血。证明G-CSF主要来源于 胎盘血中,可推测胎盘的某些细胞具有产生G-CSF的功能。我们还用RID法测定了51例正 常足月儿脐静脉血中IgG、IgA、IgM含量,测定结果,脐静脉血中IgG高于正常值,经 统计学处理,脐静脉血中免疫球蛋白(IgG)含量与正常值对照有显著性差异(P<005) ,IgA未测到,IgM含量明显低于正常值。从测定结果可以表明,正常足月儿脐静脉血中除了 含有非常高的G-CSF外,还含有较高的IgG,因此在有条件的地方,可以把被丢弃的来自胎 盘的脐静脉血收集起来,在无菌条件下提取脐血浆,保存在-20℃~-30℃冰箱内备用(
脐血 必需取自孕妇产前查体乙肝、丙肝均阴性者)。可以用于某些血液病(如骨髓移植后,白血病、恶 性肿瘤用大剂量化疗或放疗后骨髓抑制者,
急性再生障碍性贫血,MDS及急性造血停滞等)和某 些非血液性重症感染性疾病(如新生儿败血症,感染性休克等)。我们已将混合脐血浆即几份血浆 混合,为急性白血病大剂量化疗后骨髓抑制期者输注190例次,新生儿败血症9人次,急性再生 障碍性贫血26人次。每次输注50~100ml,年长儿输200ml,共输3~5天,每次输 注前给地塞米松25~5mg,对促进造血恢复有明显疗效。在输注过程中除了3例对多种药物 过敏的白血病患儿皮肤出现荨麻疹外,其余均无任何不良反应。参考文献1L-aver.Hig hlevelsofgranuiocyteandgranuipcytemacrophag ecolonystimulatingfactorsincordofnormalful- term.JPediatr,1990;116(4):6272RothP.Ceony-s timulatingfactor1levelsinthehumannewbotninf ant.JPediatr,1991;119(1):1133牛占波.G-CSF酶联免疫检 测试剂盒在发热性疾病鉴别诊断中的应用.中国医学科学院学报,1994;16(5):370 4叶应无.单向环状免疫扩散法.全国临床检验操作规程,1991:2955LaverJ,M ooreMAS.Clinicaluseofrecombinanthumanhemato ieticgrowthfactors.JNatlCancerInst,1989;81( 18):13706刘桂兰,殷慧君,蒋佩华.酶联免疫吸附实验检测正常足月儿脐血中粒细胞集 落刺激因子含量.中华血液学杂志,1995;16(12):615粒细胞集落刺激因子和免疫 球蛋白在母婴分布的探讨$北京医科大学人民医院@刘桂兰@蒋佩华@殷慧君@魏艳秋@杨铁生@ 樊春红脐血,
粒细胞集落刺激因子,免疫球蛋白目的:为了找到脐血中粒细胞集落刺激因子(G- CSF)产生的部位,为脐血的基础研究和临床应用提供科学依据。方法:应用G-CSFELI SA试剂盒采用酶联免疫方法,分别测定了48例妊娠37~38周健康孕妇静脉血清和50例正 常足月新生儿脐静脉血清和49例脐动脉血清G-CSF阳性率和含量。结果:阳性率分别为8 33%、74%和816%,并测定了37例阳性脐静脉血中G-CSF的含量,结果S/N最 高1994,最低21,x±s为59±395。经统计学处理,脐静脉血和孕妇静脉血 阳性率有显著性差异(P<001),脐静脉血和脐动脉血阳性率也有显著性差异(P<00 1)。并用单向环状免疫扩散(RID)法测得51例正常足月儿脐静脉血中免疫球蛋白IgG含 量明显高于正常值(P<005)。结论:测得结果显示,脐血中G-CSF主要来源于脐静脉 的胎盘中。推测胎盘的某些细胞具有产生G-CSF的功能。脐血中含有高水平的IgG。1L- aver.Highlevelsofgranuiocyteandgranuipcytem acrophagecolonystimulatingfactorsincordofno rmalful-term.JPediatr,1990;116(4):6272RothP .Ceony-stimulatingfactor1levelsinthehumanne wbotninfant.JPediatr,1991;119(1):1133牛占波.G- CSF酶联免疫检测试剂盒在发热性疾病鉴别诊断中的应用.中国医学科学院学报,1994;1 6(5):3704叶应无.单向环状免疫扩散法.全国临床检验操作规程,1991:2955 LaverJ,MooreMAS.Clinicaluseofrecombinanthum anhematoieticgrowthfactors.JNatlCancerInst, 1989;81(18):13706刘桂兰,殷慧君,蒋佩华.酶联免疫吸附实验检测正常足月 儿脐血中粒细胞集落刺激因子含量.中华血液学杂志,1995;16(12):615G,因此 在有条件的地方,可以把被丢弃的来自胎盘的脐静脉血收集起来,在无菌条件下提取脐血浆,保存 在-20℃~-30℃冰箱内备用(脐血必需取自孕妇产前查体乙肝、丙肝均阴性者)。可以用于某些血液病(如骨髓移植后,白血病、恶性肿瘤用大剂量化疗或放疗后骨髓抑制者,急性再生障碍性贫血,MDS及急性造血停滞等)和某些非血液性重症感染性疾病(如新生儿败血症,感染性休克等)。我们已将混合脐血浆即几份血浆混合,为急性白血病大剂量化疗后骨髓抑制期者输注19
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