近年来，随着分子生物学研究的发展，有关自由基损伤与疾病的发生、发展关系的研究受到国内外学 者的普遍关注：机体内酶与非酶系统抗氧化防御机制的下降，可致超氧自由基02z浓度的增加及 脂质过氧化作用的加强，使细胞受损并进而发生老化或其他病变’‘。大量研究亦表明，脂质过氧 化物与冠心病、高血压病、高脂血症、糖尿病等多种疾病的发生密切相关，而生物体内天然存在的 抗氧化酶能防御自由基的损伤。脉通平系我院附属医院与附属中医院联合研制的复方中药冲剂，具 有降压、降脂、补益肝肾之功能，临床用于治疗各类高血压病、高脂血症、冠心病及肝肾功能不足 等收到良好疗效，能明显改善症状。本研究旨在探讨脉通平对小鼠体内脂质过氧化作用与抗氧化系 统的影响，以期为临床应用提供一定的科学实验依据。1实验材料1．1动物昆明种小白鼠，体重 18-229，一级合格，由沙州医学院实验动物科提供。1．2药品H钾牌酸钠：AR，上海化 学试剂采购供应站分装厂，批号对03％。二乙三胺五乙酸：AR，上海化学试剂采购供应站经销 ，批号900306。邻苯三酚：AR，遵义市第二化工厂，批号940101。正丁醇：AR应 庆东方红试剂厂，批号941017。硫代巴比妥酸：生化试剂，华美生物工程公司。四乙氧基丙 烷（TE）：标准品（25nmol／ml），Sigma公司出品。三氯甲烷：AR，重庆化学 试剂厂，批号gill26oGSH．PX试剂盒：南京聚力生物医学工程研究所。脉通平冲剂： 棕褐色液体（每毫升合原生药3．og），由沙州医学院附属医院、附属中医院联合研制，批号对 0317。所有试剂均用重寨水配制。1．3仪器日本岛津UVI20型紫外分光光度计。WH· l微型旋蜗混合仪，上海沪西分析仪器厂生产。组织匀浆器。小型三用水箱，北京医疗设备厂生产 。2方法与结果小白鼠30只，体重18-229，雌雄各半，随机分为3组：脉通平匕．og生 药／kg组、7．sg生药／kg组、对照组。给药组每天定量灌胃给药一次，对照组灌眼等量生 理盐水，连续用药35天。于停药后次日，分别按以下方法步骤测定小鼠血液超氧化物歧化酶（S ODX谷脱甘肽过氧化物酶（GSH．PX）活性，血清及心、肝、脑组织脂质过氧化物（LPO ）含量。2．1对小鼠红细胞内SOD活性的影响2．1．ISOD抽提液制备小鼠眼眶采血50 UI，冲入盛有5ml冷生理盐水的刻度高心管中，混匀，离心，弃去上清液，于沉淀血细胞中加 人预冷双蒸水O．Zml，混匀，使之溶血，再加入预冷的95％乙醇0．lml，振荡30秒后 ，加入三氯甲烷0．lml，置旋蜗混合仪抽提1分钟，然后以4cpc转／分离心3分钟，上清 液即为SOD抽提液，计量体积后备用。2．1．2SOD活性测定取SOD抽提液0．lml， 按邻苯三酚法进行操作［‘J，于日本岛津UV．120型紫外分光光度计入420urn测定其 OD值，并计算SOD活力。结果表明，脉通平两个剂量组均能显著提高小鼠红细胞内SOD活性 ，与对照组比较，其差别具有显著性和非常显著性意义（P＜0．05或0．01）。（表1）。 表1脉通平对小鼠SOD、GSH．PX活性的影响（三tS）注：与对照组比较、P＜0．山， 、、P＜O．w2．2对小鼠全血GSH-PX活性的影响小鼠眼眶采血100UI，制成1：1 00溶血液，取溶血液0．Zml，采用5，5’一二硫双（a一硝基苯甲酸）（DTNB）比色 法．’·“，于日本岛津UV-120型紫外分光光度计人422urn测定OD值，并计算GS H-PX活性。结果如表1所示：15．og生药／kg脉通平能显著提高小鼠全血GSH·PX 活性，与对照组相比较，有显著性差异（P＜o．05）。7．sg生药／kg脉通平组小鼠血液 GSH-PX活性高于对照组，但无统计学意义（P＞o．05）。2．3对小鼠血清及心、肝、 脑组织LPO的影响小鼠眼眶系血，离心分离血清，采用硫代已比安酸（TBA比色法’，于紫外 分光光度计入500urn测定OD值，并计算LPO含量。脱颈椎处死小鼠．剪开颅骨，取脑组 织0．Zg。剖开胸腔、腹腔，分别取心组织0．ig、肝组织0．Zg，按W／V二l：10加 入生理盐水，制成10％组织匀浆，离心，取上清液，按上法测定组织中LPO含量。结果表明， 脉通平两个剂量组均能显著降低小鼠血清与心。肝、脑重要器官组织的Deo含量，与对照组比较 ，其差别具有显著性和非常显著性意义（P＜o．05或0．01〕。（表2〕n表2脉通平对小 鼠血清及重要器官ryo含量的影响（三tS）注：与对照组比较。P＜o．仍，。。P＜0．W 3讨论随着自由基生物学与自由基医学的迅速发展，研究表明许多病理生理现象均与自由基引起的 脂质过氧化有关”-’‘。氧自由基（OZ：）是一类具有高度活性的物质，它能使生物膜上不饱 和脂肪酸发生过氧化而影响膜的结构和功能；使蛋白质产生交联而改变酶的功能；损伤DNA，导 致生物体老化及多种疾病的发生。在漫长的生物进化过程中，机体为了防御自由基的损伤和破坏， 组织和细胞建立了一整套完善的抗氧化防御系统，它们在清除自由基损伤中起着重要作用。超氧化 物歧化酶、谷脱甘肽过氧化物酶就是机体重要的抗氧化酶。超氧化物歧化酶（Superokid eDismutase简称SOD）属于机体唯一以自由基为底物的氧自由基捕获酶，它的主要功 能是将氧的单价还原产物OM化生成H20。：02：＋02z平ZH”——H刃2＋oZ清除过 多有害的超氧化物阴离子（02：），使细胞的结构成分及生物大分子物质免受过氧化损害，构成 氧自由基对机体损伤的第一道防线，因此若能提高SOD活性，则可明显降低LPO含量。谷航甘 肽过氧化物酶（GlutathionePeroxi．dase，简称GSH-PX），其主要 功能是将过氧化物还原成无毒的羟基化合物和水：以免它们分解形成强氧化活性的自由基重新对其 它不饱和脂肪酸分子发生过氧化作用，从而构成机体防御自由基损伤的第二道防线。本研究结果显 示，脉通平既能显著降低小鼠血清及心、肝、脑重要器官组织的Deo含量，减轻组织或细胞的过 氧化损伤，减少脂质过氧化物的形成；又能提高小鼠红细胞内SOD、全血GSH-PX的活性， 增强生物体对自由基损伤的防御功能。提示，脉通平对冠心病、各类高血压病、高脂血症能明显改 善症状，取得良好疗效，与其改善自由基代谢，显著的抗氧化作用密切相关。脉通平对小鼠抗氧化 作用的实验研究@何涛$泸州医学院生物化学教研室!646000@李万平$泸州医学院药理学 教研室!646000@杨烨$泸州医学院生物化学教研室!646000@李家富$泸州医学院 附属医院心血管内科!646000脉通平;;超氧化物歧化酶;;谷胱甘肽过氧化物酶;;脂质 过氧化物;;抗氧化;;自由基目的：探讨脉通平对小鼠体内脂质过氧化与抗氧化系统的影响。方 法：实验小鼠灌服脉通平，采用邻苯三酸法测定小鼠红细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性、5 ，5’-二流双（α-硝基苯甲酸）（DTNB）法测定小鼠全血谷脱甘肽过氧化物酶（GSH- PX）活性、硫代巴比妥酸（TBA）法测定小鼠血清及重要器官组织脂质过氧化物（LPO）含量。结果：脉通平既能显著降低小鼠血清及心、肝、脑组织LPO含量，又能显著提高小鼠红细胞内SOD、全血GSH-PX的活性。结论：脉通平具有显著的抗氧化作用。1.TrevorFS. Free-radical mechanisms in tissue injury.Biochem J, 1984; 222:1
2.丁克祥,钟水先,姚树人.微量指血超氧化物歧化酶快速测定法的研究.老年学杂志,1987;7(2):41
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7.方允中主编.自由基与酶.北京:科学技术出版社,1989;143胱樱?2：），使细胞的 结构成分及生物大分子物质免受过氧化损害，构成氧自由基对机体损伤的第一道防线，因此若能提 高SOD活性，则可明显降低LPO含量。谷航甘肽过氧化物酶（GlutathionePer oxi．dase，简称GSH-PX），其主要功能是将过氧化物还原成无毒的羟基化合物和水 ：以免它们分解形成强氧化活性的自由基重新对其它不饱和脂肪酸分子发生过氧化作用，从而构成 机体防御自由基损伤的第二道防线。本研究结果显示，脉通平既能显著降低小鼠血清及心、肝、脑 重要器官组织的Deo含量，减轻组织或细胞的过氧化损伤，减少脂质过氧化物的形成；又能提高 小鼠红细胞内SOD、全血GSH-PX的活性，增强生物体对自由基损伤的防御功能。提示，脉 通平对冠心病、各类高血压病、高脂血症能明显改善症状，取得良好疗效，与其改善自由基代谢， 显著的抗氧化作用密切相关。脉通平对小鼠抗氧化作用的实验研究@何涛$泸州医学院生物化学教 研室!646000@李万平$泸州医学院药理学教研室!646000@杨烨$泸州医学院生物 化学教研室!646000@李家富$泸州医学院附属医院心血管内科!646000脉通平;; 超氧化物歧化酶;;谷胱甘肽过氧化物酶;;脂质过氧化物;;抗氧化;;自由基目的：探讨脉通平对小鼠体内脂质过氧化与抗氧化系统的影响。方法：实验小鼠灌服
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