新疆是全国著名的瓜果之乡；但野生植物是发展食品工业的重要资源。野生植物覆盆子的营养价值尚 未开发。为此，我们观察了其水溶性提取物的诱变和抗诱变作用，为开发其成为保健食品提供科学 依据。l材料与方法1．1材料1·l·l样品：覆盆子采自新疆伊犁地区新源县。将样品研碎， 以蒸馏水浸泡24h，低速离心并弃渣，取上清液滤菌待用。1．1．2实验菌株：菌株TA。s 、TA；。。由中国预防医学科学院提供。主要遗传性状经鉴定合格。大肠杆菌PQ3。，由上海 第二军医大学提供，主要遗传性状经鉴定合格。1．1．3实验动物：～级昆明种小白鼠（雌雄各 半，体重18一229），由新疆制药厂动物室提供。1．1．4主要试剂：今硝基奎宁氧化物（ 4NQ）、黄曲霉毒素B；（AFB；）、叠氮销（NaN。）、2一氨基药（ZAF），均为S igma公司产品。环磷酸胺（cp）为上海第十二制药厂产品。丝裂霉素（MMC）为上海药物 研究所产品。1·l·5主要仪器：恒温震荡培养箱、普通恒温培养箱、超净工作台。1．2方法 1·ZIAmes试验：试验用已鉴定的营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌株TAs和TA；。。。按卫 生部颁发的“食品安全性毒理学评价程序”规定的方法进行。设三个剂量组、一个空白对照组。分 别以ZAF、4NQO、AFB；、NaN。为阳性对照物。分为加S-9和不加S-9系统，M R＞2判之为阳性结果。在抗诱变试验中，设三个剂量组，分别加到阳性诱变物培养皿中，分为十 S-g和一S-9，余之同上。抗诱变效果评价：／；。。。。。，。。／，，。、＿＿阳性组菌 落数一测定组菌落数‘，、。。回复突变抑制率％（IP）一￡击美兰群岛鲜1哭8公里会会充X 100””—”““‘『”“”-”””““”阳性绿茵落数一自发回变菌落数”“””1．1． 2微核试验：选用昆明种小白鼠，体重209左右，随机分成3组，每组8只，雌雄各半，设一个 较高剂量组，一个空白对照组，一个阳性对照组（CP：0089·Kg-’·BW一句，采用一 次性腹腔注射，隔z‘h取材制片，计数1000个小鼠骨髓嗜多染红细胞（PCE）的微核（M PCE），算出微核率（MNR斯）。在抗CP诱发小鼠MPCE的抑制试验中，设三个剂量组， 一个对照组，一个阳性对照组（CP：15g·Kg-‘·BW一句，其余同上。算出抑制率IP 。1．23SOS显色试验：定量测定SOS显色试验，利用大肠杆菌菌株PQ。，，按Quil lardet等建立的方法略加改进进行。接种PQ。，于lmlLB培养基中，37C振荡培养 8～10h，将活化培养的LB菌液按l％比例转接至新鲜LB培养基中，37C振荡培养肽（O D。。。一0．4左右）。取转接培养Zh后菌液100ul加入10mmX15turn／J＼ 试管中，同时加入阳性物或溶剂20ul、检样液20iii及LB培养基、S一以加或不加）、 B或P缓冲液等测定终点指示酶活性。诱导抑制试验是加化学物（或诱导物）后加抑制物，余同上 。若样品有色，采用离心并洗涤脱色。测定结果按公式IF一RC／RO计算RC指在浓度C时的 R值，R。指空白对照值，IF为SOS诱导系数。IF＞2为阳性。2统计学处理2．lAme s试验：试验数据按MR＞2判定为阳性结果。IP＞40％为抑制有效。据Tonsen等人的 方法进行T检验。22微核试验：用双侧t检验和x’检验。IP＞40％为抑制有效。2．3S t）S显色反应：用成组比较的t检验、直线相关分析。3实验结果3．lAmes试验3．亚． l由表1可见，显盆子水溶性提取物100～300mg／皿各剂量组中，对菌株TA。（＋S- o或一S-o）和TA。；；（＋S-9或一S-9）回变菌落数影响不大（MR＜2）。3．1 ．2表2结果表明，覆盆子水溶性提取物对ZAF、4NQ（）（TA。。、APB；、NaN。 （TA；；；。）均有较明显抗诱变作用。对TA。。＋S-o系统的抗诱变作用为［。」，对T A。。一S-o系统为「＋＋」，对TA；。。（＋S-o或一S-o）分别为「＋」和【＋＋＋ ］，且有剂量一反应关系。3·2微核试验3．2．l覆盆子水溶性提取物809·Kg-’·B W-’时，小鼠PCE的MNR为217％，与空白相比较无显著性差异。3．2．2由表4可见 ，覆盆子水溶性提取物低，剂量组十CP的MNR为1820％。与阳性组比较有显著性差异（P wto．05）。其抑制率rt40％。高剂边组的MNR与阳性组比无显著性差异，抑制率wt lo％。3·3S（）S显色反应3．3．l覆盆子水溶性提取物各剂量组40ms～ZO0mg ／20ul中皆不能明显诱导S（）S反应（IF＜2）。3．3．2由表6可见，覆盆子水溶性 提取物40mg／20UI剂量对S（）S反应有明显抑制作用，对AFB；的抑制作用为［＋十 个」，对4NQ（）抑制作用为r＋」，对MMC的抑制作用为「＋＋」。亲3＆盆产水溶性提取 物对小鼠P（IE微核率（％0）的影响4讨论已知评价化学物的诱变作用，要用多种试验运用的 遗传终点评价。微核试验是检测化学或／和其它物质诱发染色体完整性改变和染色体分离改变这两 种遗传学终点。而Ames试验能反映基因水平诱变。这三个终点属于具有导致遗传性疾病的突变 潜在能力［’］。同时S（）S显色法也是对致突变物和致癌物进行筛选的方法之一，其灵敏度与 Ames法接近，其特异性远较Ames法高，还能检测一些非遗传性致癌物［’1。致癌性与S （）S显色反应之间的相关性是较好的D’，St）S显色反应试验为致癌物的快速检测提供了一 种新的补充手段。由此可见，用上述三种试验的综合利用，能提高对受试物诱变性及抗诱变性检测 的可靠性，较全面反映受试物的某些性能。本研究结果表明，覆盆子水溶性提取物的诱变性在上述 三项试验中，均为阴性结果，表明其水溶性提取物不具有明显的诱变作用。同时，在抗诱变试验中 发现，在Ames试验与S（）S反应中，覆盆子对阳性诱变物具有很强的诱导抑制作用，但对C P诱导小鼠MNR的抑制作用不明显。本研究结果提示，覆盆子水溶性提取物在细菌中具有抗诱变 性，而对高等动物则抗诱变作用不明显，为覆盆子开发成保健食品提供了一定的科学依据。覆盆子 抗诱变作用的实验研究@付德润$新疆医学院预防医学系!830054@钟承民$新疆医学院预 防医学系!830054@郭伟$新疆医学院预防医学系!830054@张月明$新疆医学院预 防医学系!830054@李新威$新疆医学院预防医学系!830054@封春林$新疆医学院 预防医学系!830054覆盆子;;诱变性;;抗诱变作用为了解新疆野生植物覆盆子的抗诱变 作用，我们采用Ames试验、小鼠骨髓微核试验、SOS显色反应，对覆盆子的水溶性提取物进 行诱变与抗诱变研究。结果表明，覆盆子水溶性提取物在三项试验中均无诱变性，在抗诱变试验中 ，对Ames试验中阳性诱变物2AF、4NQO、AFB；、NaN3的诱变抑制作用分别为［ ＋］、［＋＋］、［＋＋］、［＋＋＋］；抑制CP诱发小鼠MNR的作用不明显；对AFB1、 4NQO、MMC诱导SOS显色反应的抑制作用分别为［＋＋＋］、［＋］、［＋＋］。本研究结果揭示覆盆子水溶性提取物具有一定抗诱变作用，为其可作为开发保健食品提供一定的科学依据。1刘毓谷.外来化合物致突变作用及从评价.卫生毒理学基础,第2版,北京:人民卫生出版社,1994,91～114
2 Quillardet P.The SOS Chromotest Res.1985,147:79～95
3 Andson WA, Mutet Res, 1980, 72～ 314用上述三种试验的综合利用，能提高对受试物诱变性及抗诱变性检测的可靠性，较全面反映受 试物的某些性能。本研究结果表明，覆盆子水溶性提取物的诱变性在上述三项试验中，均为阴性结 果，表明其水溶性提取物不具有明显的诱变作用。同时，在抗诱变试验中发现，在Ames试验与 S（）S反应中，覆盆子对阳性诱变物具有很强的诱导抑制作用，但对CP诱导小鼠MNR的抑制 作用不明显。本研究结果提示，覆盆子水溶性提取物在细菌中具有抗诱变性，而对高等动物则抗诱 变作用不明显，为覆盆子开发成保健食品提供了一定的科学依据。覆盆子抗诱变作用的实验研究@ 付德润$新疆医学院预防医学系!830054@钟承民$新疆医学院预防医学系!830054 @郭伟$新疆医学院预防医学系!830054@张月明$新疆医学院预防医学系!830054 @李新威$新疆医学院预防医学系!830054@封春林$新疆医学院预防医学系!83005 4覆盆子;;诱变性;;抗诱变作用为了解新疆野生植物覆盆子的抗诱变作用，我们采用Ames 试验、小鼠骨髓微核试验、SOS显色反应，对覆盆子的水溶性提取物进行诱变与抗诱变研究。结 果表明，覆盆子水溶性提取物在三项试验中均无诱变性，在抗诱变试验中，对Ames试验中阳性 诱变物2AF、4NQO、AFB；、NaN3的诱变抑制作用分别为［＋］、［＋＋］、［＋＋ ］、［＋＋＋］；抑制CP诱发小鼠MNR的作用不明显；对AFB1、4NQO、MMC诱导S OS显色反应的抑制作用分别为［＋＋＋］、［＋］、［＋＋］。本研究结果揭示覆盆子水溶性提 取物具有一定抗诱变作用，为其可作为开发保健食品提供一定的科学依据。1刘毓谷.外来化合物致突变作用及从评价.卫生毒理学基础,第2版,北京:人民卫生出版社,1994,91～114
2 Quillardet P.The SOS Chromotest Res.1985,147:79～95
3 Andson WA, Mutet Res, 1980, 72～ 314
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