自然流产在妇产科临床颇为常见，并有反复发作的倾向。黄体功能不全是导致自然流产的常见因素， 其证候表现主要是肾虚或脾肾两虚。本实验以抗孕激素制剂ＲＵ４８６建立黄体功能不全的流产模 型，观察补肾健脾的“助孕３号丸”对妊娠期孕激素水平和子宫蜕膜孕激素受体的影响，以及对胚 胎的保护作用。１材料与方法１．１分组及建立ＲＵ４８６流产模型选用健康、未产、８周龄、体 重为２００～２５０ｇ的ＳＤ雌性大鼠，按雌性与雄性的只数比例为２∶１合笼，置于１８～２４ ℃动物房中喂养。人工控制光照、饮食，每日早晨阴道涂片，以发现大量精子者作为妊娠第１天（ ｄ１）。盲法随机分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四组，每组均为１０只雌鼠。在妊娠第１天至第１１天（Ｄ １～Ｄ１１），Ａ组灌服“助孕３号”水提浓缩液，Ｂ组隔天肌注黄体酮（４ｍｇ／ｋｇ），Ｃ、 Ｄ组灌服等量生理盐水。在妊娠第１０天（Ｄ１０），Ａ、Ｂ、Ｃ组均灌服ＲＵ４８６（５ｍｇ／ ｋｇ）［１，２］，Ｄ组灌服等量生理盐水。至妊娠第１２天（Ｄ１２），各组均处死解剖，剪取 子宫，称重，记录胚胎数和流产数。１．２激素测定在用ＲＵ４８６第１、２、３天，即Ｄ１０、 Ｄ１１和Ｄ１２分别采血，分离血清，－２０℃保存，酶联免疫法检测血清孕酮（ｃ孕酮）水平（ 采用珠海爱康生物医学工程有限公司ＰｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅＳｅｒｏｚｙｍｅ试剂盒）。１ ．３子宫蜕膜孕激素受体检测子宫标本置液氮罐保存，冰冻切片，Ｓ＿Ｐ免疫组化染色［采用美国 Ｄｕｋｅ公司ＭｏｕｓｅＡｎｔｉ－ＨｕｍａｎＰｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅＲｅｃｅｐｔｏｒ（Ｐ ｇＲ）试剂盒］，光镜检测孕激素受体（ＰＲ）阳性数，计算ＰＲ阳性率。２结果从表１结果可以 看出，各组流产率差异无显著性。孕激素水平在使用ＲＵ４８６前后各组有显著性差异。用药２４ ｈ后（ｃ孕酮１），Ａ、Ｂ组下降幅度明显比Ｃ组下幅降度小；用药４８ｈ后（ｃ孕酮２），Ａ、 Ｂ组激表１各组流产率及使用ＲＵ４８６前后孕酮（ｃ孕酮）变化（ｘ±ｓ）ｎｍｏｌ／Ｌ组别Ｎ ／只ｐ流产／％ｃ孕酮１ｃ孕酮２ｃ孕酮３Ａ组（中药＋ＲＵ４８６）８６６．９７△４８．８± ２１．６３９４８．８１±１９．８０９５９．２８±２６．９５６Ｂ组（黄体酮＋ＲＵ４８ ６）８７１．３３△５０．９５±２７．１７３４２．２１±２３．６９７４７．０６±２６． ３２２Ｃ组（ＲＵ４８６对照组）８８６．３６５５．０９±１８．６９９２５．４０±１６． ０９３１０．３７±１１．３５７Ｄ组（正常妊娠组）８０４２．４５±２２．８８９５９．５ ４±１７．２８２７６．７８５±１４．２３２用ｔ检验统计：与Ｃ组比较Ｐ＜０．０５；用卡 方四围表格统计：△与Ｃ组比较Ｐ＞０．０５表２“助孕３号丸”对妊娠大鼠子宫蜕膜孕激素受体 （ＰＲ）的影响组别Ｎ／只ＮＰＲ阳性／只ｐＰＲ阳性／％Ａ组（中药＋ＲＵ４８６）８８１００ Ｂ组（黄体酮＋ＲＵ４８６）８５６２．５Ｃ组（ＲＵ４８６对照组）８３３７．５Ｄ组 （正常妊娠组）８８１００用卡方四围表格统计：与Ｃ组比较Ｐ＜０．０１素水平呈回升态势 ，Ｃ组则呈下降态势（Ｐ＜０．０５）。说明助孕３号能提高孕激素水平，与阳性对照药黄体酮有 同等效应。从表２看出，助孕３号使ＲＵ４８６与孕激素受体的结合率降低，增加了靶细胞ＰＲ含 量。Ａ组的受体水平与正常组相等同，阳性率达１００％，与ＲＵ４８６对照组比较，差异有显著 性（Ｐ＜０．０１）。提示该药可能在受体水平促进黄体功能，从而起到保胎作用。３讨论自然流 产（ＳＡ）是妇产科常见病之一。对患者身心伤害较大，并影响患者的家庭幸福。ＳＡ以其反复发 生的倾向威胁着妇女的健康和家庭的稳定。因此，如何有效地防治ＳＡ，降低ＳＡ的发生率，一直 是世界医学界关注的热点之一。ＳＡ原因复杂，遗传、内分泌、免疫、生殖道感染或子宫形态异常 等因素均可致之。而黄体功能不全是临床上较为常见的因素，各种原因引起黄体功能衰退，影响蜕 膜、胎盘功能，使妊娠难以继续而致流产［３］。中医学对ＳＡ的认识与治疗由来已久，历代医家 对其论述颇多，认为主要是肾气不足以至冲任不固，或脾气虚弱不能营养胎元，使胎元不固而堕胎 。屡孕屡堕则肾气更伤。治疗大法以补肾健脾为主。清代医家张锡纯的“寿胎丸”是补肾安胎的代 表方。临床研究表明，寿胎丸加味有较好的保胎效果，实验研究提示可增强垂体－卵巢促黄体功能 ［４］。当代名医罗元恺教授根据其临床经验创制了补肾为主、佐以健脾的“滋肾育胎丸”，对防 治自然流产有良好疗效，实验研究表明，该方能促进非妊娠雌兔的卵巢与子宫内膜分泌功能［５］ 。其后，进一步研究拟定了补肾与健脾并重的“助孕３号丸”，进行了一些临床与实验研究［６］ 。前一阶段的研究提示该药对免疫保护不足的反复自然流产有显著疗效，治疗后再次妊娠成功率达 ９５％，并有提高封闭效应的作用。笔者认为补肾健脾中药复方除了免疫调节作用外，还应有内分 泌调节效应。因而设计了本实验。“助孕３号丸”以寿胎丸和滋肾育胎丸为基础，由菟丝子、桑寄 生、川续断、黄芪、党参等８味中药组成。菟丝子性味辛甘平，入肝肾经，平补肾之阴阳，固精益 气以培本；桑寄生苦平补肝肾养血安胎；续断苦辛补肝益肾安胎；黄芪味甘补中益气健脾；党参具 有强壮补益的作用，能健脾补气，对阴道流血、下腹重坠有补气摄血之效。诸药合用具有补肾健脾 ，固气养血，安胎助孕之功，本方药性平和，补而不腻不燥。本实验结果提示，补肾健脾的中药复 方“助孕３号丸”具有内分泌调节作用。一方面促使孕激素分泌，另一方面又使子宫蜕膜的孕激素 受体含量增加，从而促进黄体功能，发挥保胎效应。目前，ＲＵ４８６已被证实是一种孕酮受体阻 断剂。在大鼠实验中，ＲＵ４８６对下丘脑、垂体、卵巢和子宫内膜（蜕膜）的孕激素受体有很强 的亲和力，在受体水平特异性阻断孕酮作用，引起蜕膜退变，对妊娠大鼠有良好的抗生育效果［７ ］。ＲＵ４８６终止妊娠是模仿了自然流产过程［８］。因其具有高效拮抗孕酮作用而被应用于抗 早孕，这是本实验动物流产模型的造模依据。利用流产模型做药理实验，可以较好地达到了解药物 对黄体功能的调节作用的目的。补肾健脾中药对妊娠大鼠孕激素及其受体的影响@李小球$广州中 医药大学助孕３号丸／药理学；流产.习惯性／中药疗法；补益脾肾；孕酮／血液；受体.孕酮／ 药物作用；疾病模型.动物；大鼠为探讨补肾健脾中药对妊娠大鼠子宫蜕膜孕激素受体的影响，设 计了补肾健脾药“助孕３号丸”（菟丝子、川续断、桑寄生、党参、黄芪等组成），并通过建立米 非司酮（ＲＵ４８６）流产模型，设立阳性药和空白对照与之对照观察。结果表明“助孕３号丸” 能促使孕激素分泌，并使ＲＵ４８６与孕激素受体的结合率降低，提示该药可能在受体水平促进黄 体功能，从而起到保胎作用。为补肾健脾法防治自然流产提供了理论依据１苏萍，蒋长松，吴熙瑞 ．利洛司酮终止早孕作用的实验药效学研究．同济医科大学学报，１９９４，２３（６）：４７３ ２李晓艳，胡伦颖，高秉兰，等．米非司酮抗着床作用的实验研究．中国计划生育学杂志，１９９ ６，６（６）：３２９３陈红，童夙明，陈萍，等．ＲＵ４８６对大鼠早、中期妊娠影响的研究． 生殖与避孕，１９９４，１４（５）：３３２４朱金凤，佘运初，周楚华，等．寿胎丸加味治疗先 兆流产的临床观察及实验研究．中西医结合杂志，１９８７，７（７）：４０７５张玉珍，罗颂平 ，刘菊芳．罗元恺教授经验方“滋肾育胎丸”临床总结．新中医，１９８３（３）：１１６罗颂平 ，梁国珍．自然流产的免疫学因素与中医药治疗．中国医药学报，１９９６，１１（４）：２７７ 佘微明，李慧蕊，谢衷明．ＲＵ４８６对体外大鼠垂体胞液孕激素受体的作用．生殖与避孕，１９ ９０，１０（１）：８８张俊慧，周剑萍，陆湘云，等．米非司酮对人蜕膜雌、孕激素受体及血清 生殖激素的影响．中华妇产科杂志，１９９６，３１（１０）：６１０”以寿胎丸和滋肾育胎丸为 基础，由菟丝子、桑寄生、川续断、黄芪、党参等８味中药组成。菟丝子性味辛甘平，入肝肾经， 平补肾之阴阳，固精益气以培本；桑寄生苦平补肝肾养血安胎；续断苦辛补肝益肾安胎；黄芪味甘 补中益气健脾；党参具有强壮补益的作用，能健脾补气，对阴道流血、下腹重坠有补气摄血之效。 诸药合用具有补肾健脾，固气养血，安胎助孕之功，本方药性平和，补而不腻不燥。本实验结果提 示，补肾健脾的中药复方“助孕３号丸”具有内分泌调节作用。一方面促使孕激素分泌，另一方面 又使子宫蜕膜的孕激素受体含量增加，从而促进黄体功能，发挥保胎效应。目前，ＲＵ４８６已被 证实是一种孕酮受体阻断剂。在大鼠实验中，ＲＵ４８６对下丘脑、垂体、卵巢和子宫内膜（蜕膜 ）的孕激素受体有很强的亲和力，在受体水平特异性阻断孕酮作用，引起蜕膜退变，对妊娠大鼠有 良好的抗生育效果［７］。ＲＵ４８６终止妊娠是模仿了自然流产过程［８］。因其具有高效拮抗 孕酮作用而被应用于抗早孕，这是本实验动物流产模型的造模依据。利用流产模型做药理实验，可 以较好地达到了解药物对黄体功能的调节作用的目的。补肾健脾中药对妊娠大鼠孕激素及其受体的 影响@李小球$广州中医药大学助孕３号丸／药理学；流产.习惯性／中药疗法；补益脾肾；孕酮 ／血液；受体.孕酮／药物作用；疾病模型.动物；大鼠为探讨补肾健脾中药对妊娠大鼠子宫蜕膜 孕激素受体的影响，设计了补肾健脾药“助孕３号丸”（菟丝子、川续断、桑寄生、党参、黄芪等 组成），并通过建立米非司酮（ＲＵ４８６）流产模型，设立阳性药和空白对照与之对照观察。结 果表明“助孕３号丸”能促使孕激素分泌，并使ＲＵ４８６与孕激素受体的结合率降低，提示该药可能在受体水平促进黄体功能，从而起到保胎作用。为补肾健脾法防治自然流产提供了理论依据１苏萍，蒋长松，吴熙瑞．利洛司酮终止早孕作用的实验药效学研究．同济医科大学学报，１９９４，２３（６）：４７３２李晓艳，胡伦颖，高秉兰，等．米非司酮抗着床作用的实验研究．中国计
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