藏产红景天混合提取物对BALB/c小鼠免疫功能的影响赵文王庭欣蒋东升秦淑珍马晓彤张俊刚边 庆荣(指导)河北省卫生防疫站毒理科(保定市071000)〔摘要〕选择淋巴器官脏器系数、 迟发型变态反应、脾脏抗体生成细胞数、巨噬细胞吞噬指数等免疫学指标观察藏产多种红景天对B ALB/c小鼠免疫功能的影响。结果表明,在500~2000mg/kg剂量范围内能增加B ALB/c小鼠胸腺的相对重量、足跖厚度及脾脏抗体生成细胞的数量。因此,藏产红景天能增强 小鼠细胞免疫及体液免疫的功能。关键词:藏产红景天BALB/c小鼠免疫功能西藏的红景天资 源非常丰富,约有三十多个品种,包括圣地红景天、背药红景天、圆齿红景天、西藏红景天、长鞭 红景天、大花红景天等。多年来,藏族人民将其用于活血止血、清肺止咳〔1〕。近年来,许多资 料表明,藏产多种红景天分别有抗疲劳、延缓衰老、抗辐射、抗炎抗毒等作用〔2~5〕。但将上 述多种红景天的混合提取物进行综合研究,以比较其各种功能是否优于单一品种,目前尚未见报道 ,作者拟在此方面进行探索,为进一步开发西藏的红景天资源提供依据。本文所报告的是藏产多种 红景天混合提取物在调节免疫功能方面的研究结果。材料与方法1、实验动物:雌性BALB/c 小鼠,购于中国医科院实验动物繁育场,批准号为医动字第01-3000号,体重18~22g 。2、样品:藏产红景天混合提取液由河北太行博世佳酿酒有限公司提供,每毫升含干品025 g。3、豚鼠血清(补体):购于北京夏川生物技术有限责任公司。4、试剂:均为实验室分析纯 试剂。5、方法:将体重为18~22g的雌性BALB/c小鼠随机分为四组,每组10只,其 中三组为实验组(剂量为2000、1000、500mg/kg体重),一组为阴性对照组(蒸 馏水),采用等体积灌胃法每天定时灌胃,连续14天,第15天进行下述指标的测定。(1)淋 巴器官脏器系数:用脏/体比值表示。(2)迟发型变态反应(DTH):采用足跖增厚法。灌胃 第十天时,各组小鼠腹腔注射2%(V/V)的SRBC02mL,致敏后四天测量小鼠左右足 跖厚度,后于测量部位注射20%(V/V)SRBC20μL/每鼠,24h后再次测量其左右
足跖厚度。同一部位测量三次,取平均值。以攻击前后足跖厚度的差值(足跖肿胀度)来表示DT H的程度)脾脏抗体生成细胞检测:采用Jerne改良玻片法。灌胃至第十天时,所有小鼠均腹 腔注射2%(V/V)的SRBC02mL,免疫5天后处死动物,取脾制成脾细胞悬液。将表 层培养基加热溶解后,与等量双倍浓度的Hanks液混合,分装小试管,每管05mL,再向 管内加入50μL10%的SRBC(V/V,用SA液配制)及10μL脾细胞悬液,迅速混匀 后倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上,待琼脂凝固后,将玻片水平扣放在片架上,放入二氧化碳培养 箱中温育15h,然后用SA缓冲液稀释的补体(1:10)放入玻片架凹槽内,继续温育1 5h后,计数溶血空斑数。(4)巨噬细胞吞噬功能检测:采用小鼠碳粒廓清试验方法。实验末期 ,小鼠尾静脉注射1:3稀释的印度墨汁02mL,待墨汁注入后立即计时,于注入后1、10 min,分别从内眦静脉丛取血20μL,并将其加入到2mL的Na2CO3溶液中。用721 分光光度计在600nm波长处测光密度值(OD),以Na2CO3溶液作空白对照。将小鼠处 死,称其肝脏和脾脏重。计算吞噬指数。结果1、淋巴器官脏器系数见表1结果显示,高剂量组的 平均脏/体比值与对照组比较差异显著(P<005),且各组平均胸/体比值表现一定的剂量 反应关系;脾脏的脏器系数各剂量组与对照组间差异不显著(P>005)。表1藏产红景天混 合提取物对小鼠淋巴器官脏器系数的影响剂量(mg/kg)动物数(只)脏/体*10-3(X ±SD)脾/体*10-3(X±SD)010189±101690±1625001 0200±093702±136100010259±125639±076 200010301±110699±112*P<0052、迟发型变态反应(D TH)见表2结果表明,经给予不同剂量的藏产红景天混合提取物15天,其低、中、高剂量组的 平均足跖肿胀度与对照组比较差异均显著(P<005)。表2藏产红景天混合提取物对小鼠D TH的影响剂量(mg/kg)动物数(只)足跖肿胀度(mm)(X±SD)010028± 00850010037±0111000100388±0122000100 41±013*P<0053、脾脏抗体生成细胞检测见表3由表3可见,经口给予不同 剂量的藏产红景天混合提取物15天,能明显提高脾脏抗体生成细胞的数量,中、高剂量组与对照 组比较差异有极显著性(P<001)。表3藏产红景天混合提取物对小鼠脾脏抗体生成细胞数 的影响剂量(mg/kg)动物数(只)溶血空斑数(*103/全脾)0102512±2 00500104943±1861000108492±16120000101 2374±125**P<0014、小鼠巨噬细胞吞噬功能检测见表4结果表明,经 口给予不同剂量的藏产红景天混合提取物15天,其巨噬细胞吞噬指数各剂量组与对照组间比较差 异均无显著性(P>005)。表4藏产红景天混合提取物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响剂量 (mg/kg)动物数(只)吞噬指数010498±09850010535±042 100010521±085200010554±154讨论为了比较全面地研究藏产 多种红景天混合提取物对小鼠免疫功能的影响,我们选择了淋巴器官脏器系数、迟发性变态反应、 脾脏抗体生成细胞数、巨噬细胞吞噬功能等几项免疫学指标,从细胞免疫、体液免疫和非特异性免 疫等不同的角度研究了红景天的免疫调节功能。结果表明,藏产多种红景天混合提取物能较明显地 增加小鼠胸腺的相对重量、足跖厚度及脾脏抗体生成细胞的数量。说明藏产多种红景天混合提取物 能比较明显地提高BALB/c小鼠的体液免疫及细胞免疫功能。此外,张汝学等〔5〕研究表明 西藏红景天多糖不能增加正常小鼠胸腺的相对重量,而藏产多种红景天混合提取物有此特点,其机 制有待进一步研究。参考文献1中华人民共和国药典委员会.
中华人民共和国药典(77版)一部 .北京:人民卫生出版社,1978,2622张鑫生,等.红景天、枸杞、沙棘对野生麻蝇寿命 的影响.青海医药杂志,1990,(4):373张杰,等.藏药狭叶红景天对大鼠心、脑组织 中乳酸含量的影响.西北药学杂志,1990,(4):44骆传环,等.红景天多糖的抗放实验 研究.中华放射医学与防护杂志,1994,14(5):3405张汝学,等.红景天多糖对小 鼠体内脾淋巴细胞转化反应及NK细胞活性的影响.中国药理学通报,1993,9(4):27 EfectsofMixedExtractsofsomeRhodiolafromTibe tonImmuneFunctioninBALB/cMiceZhaoWenWangTin gxinJiangDongshengetalHebeiSanataryandAntie pidemicStationBaoDing071000〔Abstract〕Efects ofmixedextractsofsomeRhodiolafromTibetonimm unefunctionhavebeenstudiedinexperimentsonBA LB/cmice.Theexperimentsincludedrelativeweig htsofsplenandthymus,delayedhypersensitivity ,plaqueformingcelassayandmacroplagefunctio nasay.Theresultsshowedthatthemixedextracts( 500~2000mg/kg..bw.dfor14days)couldincreaset heweightofthymus,thethicknessoffoot-platean dtheamountofformingcelsofBALB/cmice.Sothemi xedextractsofsomeRhodiolafromTibetcouldimp rovethefunctionofhumoralimmunityandcelimmun ity.Keyword:RhodiolafromTibetBALB/cmiceFunc tionofhumoralimmunity藏产红景天混合提取物对BALB/c小鼠免疫功 能的影响@赵文@王庭欣@蒋东升@秦淑珍@马晓彤@张俊刚@边庆荣$河北省卫生防疫站毒理科 藏产红景天,BALB/c小鼠,免疫功能选择淋巴器官脏器系数、迟发型变态反应、脾脏抗体生 成细胞数、巨噬细胞吞噬指数等免疫学指标观察藏产多种红景天对BALB/c小鼠免疫功能的影 响。结果表明,在500~2000mg/kg剂量范围内能增加BALB/c小鼠胸腺的相对重 量、足跖厚度及脾脏抗体生成细胞的数量。因此,藏产红景天能增强小鼠细胞免疫及体液免疫的功 能。1中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典(77版)一部.北京:人民卫生出版社 ,1978,2622张鑫生,等.红景天、枸杞、沙棘对野生麻蝇寿命的影响.青海医药杂志, 1990,(4):373张杰,等.藏药狭叶红景天对大鼠心、脑组织中乳酸含量的影响.西北药学杂志,1990,(4):44骆传环,等.红景天多糖的抗放实验研究.中华放射医学与防护杂志,1994,14(5):3405张汝学,等.红景天多糖对小鼠体内脾淋巴细胞转化反应及NK细胞活性的影响.中国药理学通报,1993,9(4):27斑数(*103/全脾)
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