新疆红景天水提取液抗诱变作用的实验研究新疆医学院预防医学系(乌鲁木齐830054)马龙徐 臻荣付德润钟承民郭伟封春玲提要用Ames试验和小鼠骨髓细胞微核试验对新疆红景天水提取液 进行抗诱变作用研究,结果表明:对2-氨基芴(2AF)和黄曲霉毒素B1(AFB1)诱发的 TA98和TA100回复突变抑制率分别为33%~100%和21%~44%。微核抑制率为 193%~591%。关键词红景天抗诱变Ames微核红景天(Rhodiola.L)为 多年生草本植物。因其具有滋补、康复、强壮、保健作用而被开发为保健品,但对其抗诱变作用尚 未见报道。因此我们用Ames试验和小鼠骨髓细胞微核试验,观察了红景天的抗诱变作用。1材 料和方法11样品蔷薇红景天,采自新疆伊犁地区。12实验菌株鼠伤寒沙门氏菌株TA98 、TA100由中国预防医学科学院提供。主要遗传性状鉴定合格。13实验小鼠18g~22 gNIH种小鼠,由新疆医学实验动物中心提供。14试剂4-硝基奎宁氧化物(4NQO)、 AFB1、叠氮钠(NaN3)、2AF均为Sigma公司提供。环磷酰胺(CP)上海第十二 制药厂产品。15方法1.5.1样品制备称取10g红景天,用组织捣碎机打成均浆、将样品 匀浆定量浸于生理盐水,置4℃冰箱浸泡24小时,抽滤除菌,取滤液为红景天制备液。15 2Ames试验采用平板渗入法。实验分为5个组(见表1和表2)。试验重复一次,每次两个平 行样。153小鼠微核试验实验用18g~22g小鼠,随机分为8组。其中溶剂对照组、受 试物组(分为A、B、C三个剂量)和受试物加阳性物CP(分为D、E、F三个剂量),分别以 灌胃方式将溶剂给予受试物,每天1次,连续4天。受试物加CP组第4天灌胃后,与阳性对照组 同时以腹腔注射的方式,给予CP30mg/kgWB。各组小鼠均于最后一次灌胃后24小时脱 颈椎处死,取股骨骨髓制片,姬姆萨液染色,每只小鼠镜检1000个嗜多染红细胞(PCE), 计PCE微核(Mn)率。154结果判断(1)任一菌株任一浓度回变菌落数大于或等于空 白对照组回变菌落数2倍者为阳性。回复突变抑制率(IP)=阳性组菌落数—测定组菌落数阳性 组菌落数—自发回变菌落数×100%(2)微核抑制率(IP)=CP引起的MnPCE—CP 和样品引起的MnPCECP引起的MnPCE—自发的MnPCE×100%2结果21Am es试验211诱变作用从表1可见,TA98和TA100各样品组菌落回变数与空白对照 组比较比值均小于2。表1红景天水提取液在Ames试验中回变菌落数(x±S)受试物浓度( mg/皿)TA98+S-9-S-9TA100+S-9-S-9自发回变28±412±5 5113±2385±205阳性对照290±75469±124778±521450± 134红景天5015±0517±05132±12574±2010016±7 59±10163±52130±1415041±13012±45150±051 27±45注阳性物:TA98+S-9用2AF100μg/皿;TA98-S-9用4N Q01μg/皿;TA100+S-9用AFB10μg/皿;TA100-S-9用NaN33 15μg/皿。212抗诱变作用表2红景天水提取液对四种阳性诱变剂诱变作用的抑制效应 受试物TA98+S-92AF(100μg/皿)回变菌落数(x±S)IPTA98-S-9 4NQO(1μg/皿)回变菌落数(x±S)IPTA100+S-9AFB1(10μg/皿 )回变菌落数(x±S)IPTA100-S-9NaN3(15μg/皿)回变菌落数(x±S )IP自发回变28±4012±55113±5285±205阳性对照387±34 0509±860820±941168±117红景天5271±90033471±10 358640±14721733±80540(mg/皿)1083±2258543 0±13521587±75133897±1635251524±4100496±6 523512±11744661±60746表3A、B、C受试物组及D、E、F受试 物组MnPCE发生率的比较分组红景天用量(g/kgWB)CP用量(mg/kgWB)PC E数(个)MnPCE数(个)MnPCE发生率(‰)MnPCE抑制率(%)P值溶剂对照0 060001423阳性对照0406000237395A002060001322 >005B020060001525>005C200060001220> 005D002406000194323193<005E0204060 0096160632<005F200406000105175591<0 05注:为A、B、C分别与溶剂对照组比较;为D、E、F分别与阳性对照组比较 。从表2可见:红景天水提取液对2AF诱发的TA98回复突变抑制率为33%~100%;对 AFB1诱发的TA100回复突变抑制率为21%~44%。两者均呈剂量效应关系。而对4N QO和NaN3诱发的TA98和TA100抑制率较低,也无剂量效应关系。22小鼠微核试 验从表3可见:A、B、C三个受试物组的小鼠MnPCE发生率与空白对照组非常接近。而D、 E、F3个受试物加CP组的MnPCE发生率明显低于单纯用CP的阳性对照组,骨髓细胞微核 抑制率分别达到193%、632%和591%。3讨论31外界致突变的化学物质种类 繁多,各种抗突变物质抑制致突变物的作用特点各异本文应用体内与体外试验从不同角度不同水平 上观察红景天水提取液对四种致突变物的抑制作用。结果表明对间接致突变物2AF诱导碱基置换 型突变抑制率高达33%~100%,对间接致突变物AFB1诱导移码型突变抑制率为21%~ 44%。均呈剂量效应关系。而且对CP诱导的小鼠骨髓细胞微核发生率亦有明显的抑制作用,表 明红景天水提取液具有抗突变作用。32红景天是近几十年被民间发掘的保健植物它不仅有人参 、剌五茄的功能,而且在某些方面优于前二者。如人参燥热,剌五茄易致便秘,均不宜久服,而红 景天则无上述副作用〔1〕。前苏联民间已将红景天作为一种强壮剂,50年代即开始研究,其制 剂已被前苏联卫生保健部批准使用,将其制成高级补品投放市场,并用于宇航员航天环境适应剂〔 2〕。其制剂有抗衰老,抗疲劳、抗病毒、抗缺氧等多种功能〔3〕。红景天中的甙和甙元等还对 老年性心脏病,心机能衰竭,阳萎有治疗作用。干燥的根茎也可用于治疗糖尿病,肺结核,贫血, 以及神经衰弱和低血压〔4〕。红景天水提取液具有抗突变作用,进一步显示了新疆红景天的开发 利用价值。参考文献1邱林刚:《圣地红景天的成分研究》,载《天然产物研究与开发》,19 91(1),1页。2王淑兰:《红景天抗衰老作用的实验研究》,载《白求恩医科大学学报》 ,1991(1),6页。3吴维春:《高山红景天》吉林,吉林科技出版社,1987。4 那中凯:《红景天属植物的研究与概况》,载《特产研究》,1989(3)。新疆红景天水提取 液抗诱变作用的实验研究$新疆医学院预防医学系@马龙@徐臻荣@付德润@钟承民@郭伟@封春 玲红景天,抗诱变,Ames,微核用Ames试验和小鼠骨髓细胞微核试验对新疆红景天水提取 液进行抗诱变作用研究,结果表明:对2-氨基芴(2AF)和黄曲霉毒素B1(AFB1)诱发 的TA98和TA100回复突变抑制率分别为33%~100%和21%~44%。微核抑制率 为193%~591%。1邱林刚:《圣地红景天的成分研究》,载《天然产物研究与开发 》,1991(1),1页。2王淑兰:《红景天抗衰老作用的实验研究》,载《白求恩医科大 学学报》,1991(1),6页。3吴维春:《高山红景天》吉林,吉林科技出版社,198 7。4那中凯:《红景天属植物的研究与概况》,载《特产研究》,1989(3)。组比较; 为D、E、F分别与阳性对照组比较。从表2可见:红景天水提取液对2AF诱发的TA98 回复突变抑制率为33%~100%;对AFB1诱发的TA100回复突变抑制率为21%~4 4%。两者均呈剂量效应关系。而对4NQO和NaN3诱发的TA98和TA100抑制率较低 ,也无剂量效应关系。22小鼠微核试验从表3可见:A、B、C三个受试物组的小鼠MnPC E发生率与空白对照组非常接近。而D、E、F3个受试物加CP组的MnPCE发生率明显低于 单纯用CP的阳性对照组,骨髓细胞微核抑制率分别达到193%、632%和591%。 3讨论31外界致突变的化学物质种类繁多,各种抗突变物质抑制致突变物的作用特点各异本文 应用体内与体外试验从不同角度不同水平上观察红景天水提取液对四种致突变物的抑制作用。结果 表明对间接致突变物2AF诱导碱基置换型突变抑制率高达33%~100%,对间接致突变物A FB1诱导移码型突变抑制率为21%~44%。均呈剂量效应关系。而且对CP诱导的小鼠骨髓 细胞微核发生率亦有明显的抑制作用,表明红景天水提取液具有抗突变作用。32红景天是近几 十年被民间发掘的保健植物它不仅有人参、剌五茄的功能,而且在某些方面优于前二者。如人参燥 热,剌五茄易致便秘,均不宜久服,而红景天则无上述副作用〔1〕。前苏联民间已将红景天作为 一种强壮剂,50年代即开始研究,其制剂已被前苏联卫生保健部批准使用,将其制成高级补品投放市场,并用于宇航员航天环境适应剂〔2〕。其制剂有抗衰老,抗疲劳、抗病毒、抗缺氧等多种功能〔3〕。红景天中的甙和甙元等还对老年性心脏病,心机能衰竭,阳萎有治疗作用。干燥的根茎也可用于治疗糖尿病,肺结核,贫血,以及神经衰弱和低血压〔4〕。红景天水提取液具有抗突
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