中药抗菌作用研究沈阳药科大学陈星灿刘定安宫锡坤摘要采用打孔法和试管法，从１４味中草药中 筛选出五倍子、丁香及乌梅等中药，研究出其对福氏志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄 球菌、绿脓杆菌等致病菌有较强的抑制和杀灭作用。并测出各药物的最小杀菌浓度。关键词五倍子 乌梅丁香最小杀菌浓度（ＭＢＣ）目前，国内外对大量的中草药进行了抑菌作用的筛选，在实验和 临床研究中都有很大进展〔１〕。但研究较多的仍是真菌。而对一些药敏性低的耐药细菌，目前多 应用抗生素。而中药方面的研究较少。如有“天然耐药菌”之称的绿脓杆菌对许多抗生素都不敏感 ，有文献报导［２］，中草药抗绿脓杆菌颇有前途。本实验选用１４味中草药，用不同的提取方法 ，提取有效成分，研究其抑菌作用，并测得其最小杀菌浓度（ＭＢＣ），为中药在临床上的应用提 供了科学依据。１实验材料中草药：藿香，茵陈、知母、射干、大黄、地榆、木香、丁香、五倍子 、桂皮、乌梅、肉豆蔻、苦参、黄柏（沈阳天益堂药房）。菌种：福氏志贺氏菌（５１５７３）（ 沈阳市防疫站提供）；沙门氏菌（５００９４）（沈阳市防疫站提供）；大肠杆菌（４４１０２） （本院微生物教研室提供）；金黄色葡萄球菌（２０９１２）（本院微生物教研室提供）；绿脓杆 菌（１０１０４）（本院微生物教研室提供）。２实验方法２．１药液的制备水煎法：取上述１１ 味中草药（除丁香、乌梅、肉豆蔻外），采用传统煎煮方法，分别称重、煎煮２次，得浓缩液浓度 为１００ｇ／１００ｍｌ，灭菌后备用。醇浸法：取乌梅、丁香、肉豆蔻三味药，适当粉碎称重， 加５倍量７０％乙醇浸泡７２小时，（有效成分在醇中溶解度较大），抽滤，残渣再用等量同等浓 度的乙醇浸泡７２小时后，合并醇浸液，回收乙醇。制成浓度为每１００ｍｌ含生药１００ｇ，不 含醇药液，灭菌备用。提油法：取单味药丁香，粉碎过２０目筛，回流提取挥发油，制成１００ｇ ／１００ｍｌ浓度的药液，灭菌备用。２．２培养基制备液体培养基：牛肉膏０．３ｇ、蛋白栋１ ｇ，氯化钠０．５ｇ，蒸馏水１００ｍｌ，１０％ＮａＯＨ调节ＰＨ７．２～７．４，１５磅高压 灭菌２０分钟，备用。固体培养基：液体培养基加琼脂２％，方法同上。２．３供试菌液的配制将 接种于斜面上的菌种，接种于液体培养基中，３７℃培养６～１２小时镜检，而将菌液稀释至１０ ５～１０６个／ｍｌ，备用。２．４实验方法打孔法〔３〕：制备无菌培养基平板，取０．１ｍｌ 供试菌液加在平板上，用Ｌ型玻棒将菌均匀涂布开，然后打３个直径为６ｍｍ的孔，在孔内加待测 药液０．０７ｍｌ，置３７℃培养２４小时后观察，测其抑菌圈直径，判定结果，如此平行３次， 取平均值。试管法：根据打孔法所获得的结果，选出对细菌有中等强度抑菌作用的药物作试管法实 验，测其ＭＢＣ。采用两倍稀释法［３］，配制成八份不同浓度的供试药液，用于每份中加入０． １ｍｌ待测供试菌液。另取１支试管不加药液，同样加入０．１ｍｌ菌液作空白对照。培养条件同 上。培养后从每支试管中取出０．１ｍｌ混合液于平板培养基上培养后观察，没有细菌生长的最低 药物浓度，即为该药物相对应的ＭＢＣ。３实验结果与讨论表１１４种中药打孔法抑菌圈直径实验 结果（ｍｍ）菌种藿香茵陈射干知母地榆大黄木香五倍子丁香液丁香油桂皮乌梅肉豆蔻丁香 液苦参黄柏福氏志贺氏菌沙门氏菌大肠杆菌全黄色葡萄球菌绿脓杆菌－－－－－１１－－－－－－ －－－－－－－－－－－１７１１－－－２１１２－－－１２１２１２２２１８２７２１１６１６ １６１９１８１４１６１５１４１５－－－－－１７１６１８１７１５－－－－－１９１９２０１ ９１７－－－－－－－－－－注：抑菌圈直径＜１０ｍｍ用“－”表示丁香水煎液；用醇浸 法得到的丁香液据文献报导药敏试验一般分四级，即高敏、中敏、轻敏和不敏或耐药。中草药的抗 菌药敏等级的划分，目前尚无统一标准，但可参照相应抗生素标准［３］。即出现抑菌环直径大于 ２０ｍｍ为高敏，１０～２０ｍｍ为中敏，小于１０ｍｍ为耐药。本实验结果表明五倍子、丁香水 煎液、丁香油水溶液、丁香液（醇提法）表现了广泛抑菌谱，且都达到了中强药敏以上。根据上述 实验结果，本实验选择了五倍子煎液、丁香液（二种）、乌梅液作ＭＢＣ实验。得如下结果，见表 ２、３、４。表２五倍子提取液对各菌种的ＭＢＣ值菌种浓度ｇ／ｍｌ０．５０．２５０．１２５ ０．０６２５０．０３１２０．０１５６０．００７８０．００３９福氏志贺氏菌沙门氏菌大肠杆 菌金黄色萄萄球菌绿脓杆菌－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－６２－－－ ＞１０＞１０－－３＞１０＞１０２１表３丁香浸渍液对各菌种的ＭＢＣ值菌种浓度ｇ／ｍｌ０． ５０．２５０．１２５０．０６２５０．０３１２０．０１５６０．００７８０．００３９福氏志 贺氏菌沙门氏菌大肠杆菌金黄色萄萄球菌绿脓杆菌－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ ＞１０－－＞１０２＞１０－＞１０＞１０＞１０＞１０７＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１ ０＞１０表４乌梅浸渍液对各菌种的ＭＢＣ值菌种浓度ｇ／ｍｌ０．５０．２５０．１２５０．０ ６２５０．０３１２０．０１５６０．００７８０．００３９福氏志贺氏菌沙门氏菌大肠杆菌金黄 色萄萄球菌绿脓杆菌－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－１－＞１０－＞１０＞１ ０－＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０从表２、３、４中可以看 出五倍子提取液对福氏志贺氏菌、金葡菌和绿脓杆菌的杀菌能力最强，其ＭＢＣ值为０．００７８ ｇ／ｍｌ；丁香浸渍液对大肠杆菌杀灭力最强，其ＭＢＣ值为０．０１５６ｇ／ｍｌ；乌梅浸渍液 对沙门氏菌、绿脓杆菌作用敏感，其ＭＢＣ值为０．０１５６ｇ／ｍｌ。丁香水煎液对各菌的ＭＢ Ｃ值均为０．５ｇ／ｍｌ，故表５略，比较丁香的两种提取方法所得到的提取液对各菌的杀菌作用 ，浸渍法强于水煎法，可能是杀菌的有效成分提取完全，成分破坏少，杀菌效果好。总之，实验证 明，某些中药的抗菌作用是肯定的，而且其中的一些中药在浓度很低的情况下，显示出了一定的杀 菌能力，并测出了ＭＢＣ（未见报导），为开发中药的抗菌作用，及应用于临床提供了科学依据。 ４参考文献１许冰，等．云南医药，１９８４，５（１）：５～９２荣先娣，等．河南中医，１９ ８８，５：４４～４５３郑钧镛．药品微生物及检验技术．人民卫生出版，１９８５：３５０～３ ５１中药抗菌作用研究$沈阳药科大学@陈星灿@刘定安@宫锡坤五倍子,乌梅,丁香,最小杀菌 浓度（ＭＢＣ）采用打孔法和试管法，从１４味中草药中筛选出五倍子、丁香及乌梅等中药，研究 出其对福氏志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌等致病菌有较强的抑制和 杀灭作用。并测出各药物的最小杀菌浓度。１许冰，等．云南医药，１９８４，５（１）：５～９ ２荣先娣，等．河南中医，１９８８，５：４４～４５３郑钧镛．药品微生物及检验技术．人民卫 生出版，１９８５：３５０～３５１０＞１０７＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０表 ４乌梅浸渍液对各菌种的ＭＢＣ值菌种浓度ｇ／ｍｌ０．５０．２５０．１２５０．０６２５０． ０３１２０．０１５６０．００７８０．００３９福氏志贺氏菌沙门氏菌大肠杆菌金黄色萄萄球菌 绿脓杆菌－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－１－＞１０－＞１０＞１０－＞１０ ＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０＞１０从表２、３、４中可以看出五倍子提 取液对福氏志贺氏菌、金葡菌和绿脓杆菌的杀菌能力最强，其ＭＢＣ值为０．００７８ｇ／ｍｌ； 丁香浸渍液对大肠杆菌杀灭力最强，其ＭＢＣ值为０．０１５６ｇ／ｍｌ；乌梅浸渍液对沙门氏菌 、绿脓杆菌作用敏感，其ＭＢＣ值为０．０１５６ｇ／ｍｌ。丁香水煎液对各菌的ＭＢＣ值均为０ ．５ｇ／ｍｌ，故表５略，比较丁香的两种提取方法所得到的提取液对各菌的杀菌作用，浸渍法强 于水煎法，可能是杀菌的有效成分提取完全，成分破坏少，杀菌效果好。总之，实验证明，某些中 药的抗菌作用是肯定的，而且其中的一些中药在浓度很低的情况下，显示出了一定的杀菌能力，并 测出了ＭＢＣ（未见报导），为开发中药的抗菌作用，及应用于临床提供了科学依据。４参考文献 １许冰，等．云南医药，１９８４，５（１）：５～９２荣先娣，等．河南中医，１９８８，５： ４４～４５３郑钧镛．药品微生物及检验技术．人民卫生出版，１９８５：３５０～３５１中药抗 菌作用研究$沈阳药科大学@陈星灿@刘定安@宫锡坤五倍子,乌梅,丁香,最小杀菌浓度（ＭＢ Ｃ）采用打孔法和试管法，从１４味中草药中筛选出五倍子、丁香及乌梅等中药，研究出其对福氏 志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌等致病菌有较强的抑制和杀灭作用。并测出各药物的最小杀菌浓度。１许冰，等．云南医药，１９８４，５（１）：５～９２荣先娣，等．河南中医，１９８８，５：４４～４５３郑钧镛．药品微生物及检验技术．人民卫生出版，１９８５：３５０～３５１
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