栽培霍山石斛茎ＳＯＤ、ＰＯＤ和ＣＡＴ活性及细胞膜脂质过氧化作用的研究⒇张鹤英于力文蔡永萍 徐云昌鸟（安徽农业大学生物工程系，合肥２３００３６）摘要研究霍山石斛不同年龄茎的ＳＯＤ 、ＰＯＤ和ＣＡＴ活性以及细胞膜脂质过氧化作用，结果表明，霍山石斛３年茎的ＳＯＤ、ＰＯＤ 和ＣＡＴ活性最高，其茎显示出活跃的生理状态，采收栽培后的３年茎为药最适宜。霍山石斛茎中 ＭＤＡ含量随茎年龄增加而积累。同时，还测定了霍山石斛根、茎、叶中的Ｖｃ、可溶性糖和蛋白 质含量，结果表明，霍山石斛不仅可采茎为药，而且根、叶等其它部分也有较高的营养成分，可进 行综合利用。关键词霍山石斛茎膜脂过氧化叶根分类号Ｒ２８４．２产于安徽霍山的“霍山石斛” 茎加工成名贵中药“枫斗”，具有滋阴清热，养胃生津等功效，它原为野生状态，由于野生资源缺 乏保护，已濒临绝迹，在模拟其生态条件下，改为人工栽培后，虽获成功，但由于它要求生长在温 凉高湿的背阴山地环境，生长速度慢，植株数量少，生物产量低，因此是目前市场上仍为紧缺昂贵 的药材。前人对霍山石斛的光合特性以及激素作用，微量元素、氨基酸、生物碱等含量方面做过不 少研究［１～６］。霍山石斛茎细胞膜脂过氧与其长势及药用价值有关，但这方面的研究目前尚未 见报道，我们对霍山石斛不同年龄的不同器官中细胞膜脂过氧化进行了探讨，并对不同年龄的不同 器官的维生素Ｃ、可溶性糖、蛋白质的含量进行了比较分析，为霍山石斛的综合利用和合理采收提 供理论依据。１材料与方法１．１材料供试材料采摘于霍山县境内石斛生长基地，品种为霍山石斛 （Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍｈｕｏｓｈａｎｅｎｓｅ）的１年生、２年生、３年生茎、根和叶。１． ２方法取鲜叶１ｇ，加少量ＣａＣＯ３、石英砂研磨成匀浆，用蒸馏水提取定容至２５ｍｌ，于１ ３０００ｒｐｍ，０℃离心１５ｍｉｎ，取上清液测定。丙二醛（ＭＤＡ）含量用硫代巴比妥酸法 测定，过氧化物酶（ＰＯＤ）活性用愈创木酚氧化法测定，过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性用碘量法进 行测定，超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性用ＮＢＴ光化还原法测定，维生素Ｃ含量用２，６－二氯 酚靛酚法进行测定，可溶性糖含量用蒽酮法测定，蛋白质含量用考马斯亮蓝显色法测定［７］。２ 结果与分析２．１霍山石斛茎丙二醛含量由于霍山石斛的主要药用部分是茎，为了了解不同年龄茎 的生长状态，我们测定了茎中膜脂过氧化的产物丙二醛的含量。从图１可见霍山石斛茎中丙二醛含 量随栽培期的延长逐渐增加，ＭＤＡ含量为１年茎＜２年茎＜３年茎。由此可见，随着栽培期的延 长，霍山石斛茎细胞膜脂过氧化程度逐年增大，表现为其产物ＭＤＡ水平渐次升高。图１霍山石斛 茎ＭＤＡ含量Ｆｉｇｕｒｅ１ＭＤＡｃｏｎｔｅｎｔｏｆｓｔｅｍｏｆｃｕｌｔｕｒｅｄＤ．ｈｕ ｏｓｈａｎｅｎｓｅａｔｄｉｆｅｒｅｎｔａｇｅ图２霍山石斛１～３年茎ＰＯＤ、ＳＯＤ、ＣＡ Ｔ酶活性Ｆｉｇｕｒｅ２ＴｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＰＯＤ、ＳＯＤ、ＣＡＴｉｎｓｔｅｍｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅｄＤ．ｈｕｏｓｈａｎｅｎｓｅ２．２霍山石斛茎中ＳＯＤ、ＰＯＤ、ＣＡＴ酶活 性植物对膜脂过氧化有酶促和非酶促两类图３霍山石斛的Ｖｃ、可溶性糖、蛋白质含量Ｆｉｇｕｒ ｅ３ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｖｉｔａｍｉｎＣ，ｓｏｌｕｂｌｅｓｕｇａｒａｎｄｐｒｏｔｅ ｉｎｓｉｎＤ．ｈｕｏｓｈａｎｅｎｓｅ防御系统，ＳＯＤ、ＰＯＤ、ＣＡＴ等是酶促防御系统的 重要保护酶［８］。保护酶的活性提高，能够抑制膜脂过氧化，延缓细胞衰老。图２表明，霍山石 斛茎中３种酶活性均是１年茎＜２年茎＜３年茎。这说明霍山石斛３年茎仍有较强的清除自由基能 力。２．３霍山石斛不同器官的维生素Ｃ、可溶性糖、蛋白质含量从图３可以看出，霍山石斛的各 种营养成分以叶内含量最高，Ｖｃ含量为叶＞根＞茎；蛋白质、可溶性糖含量为叶＞根＞茎。茎中 Ｖｃ含量为１年生茎＞２年生茎＞３年生茎；可溶性糖含量以２年茎最高；蛋白质含量为１年生茎 ＜２年茎＜３年茎。由此可见，霍山石斛不仅茎有药用价值，叶和根均含有较高的营养成分。３讨 论从上面实验结果分析不难看出，霍山石斛３年茎可溶性蛋白质含量和清除自由基的保护性酶系的 活性都较高，抗氧化能力较强，仍有较强的生活力。而且积累了较多的生物碱［６］，因此民间常 实行的“存三去四”的采收方法是合理的［９］，既保持了药用价值，又能防止器官衰老，使其生 长旺盛，保持了群体的更新复壮。霍山石斛不仅茎可做成名贵中药材，叶和根中均含有较高的营养 成份，这与前人报道的霍山石斛叶、根中含有较多的必需氨基酸和必需微量元素是一致的［４］。 这些营养物质对人体有着相当重要的作用。因此改变单一的采茎为药的传统，充分利用其叶和根器 官，对霍山石斛进行综合利用值得进一步研究。参考文献１徐云昌鸟，于力文，吴庆生等．霍山石 斛的光合特性研究．应用生态学报，１９９３，４（１）：１８～２１２徐云昌鸟，于力文，张鹤 英．激素对霍山石斛种子试管苗器官形成与转绿的作用．安徽农业科学，１９９１，１９（４）： ３７８～３８１３吴庆生，丁亚萍，杨道麒等．中药霍山石斛的微量元素分析及ＴＥ图谱鉴定．微 量元素与健康研究，１９９５，１２（１）：３１～３２４丁亚平，吴庆生，杨道麒．霍山石斛不 同部位中必需微量元素与必需氨基酸的相关性研究．安徽农业科学，１９９４，２２（３）：２６ ５～２６７５吴庆生，丁亚萍，杨道麒．安徽霍山三种石斛中游离氨基酸分析．安徽农业科学，１ ９９５，２３（３）：２６８～２７１６丁亚萍，杨道麒，吴庆生等．安徽霍山三种石斛总生物碱 的测定及其分布规律研究．安徽农业大学学报，１９９４，（４）：５０３～５０６７张宪政，陈 凤玉，王荣富主编．植物生理学实验技术．沈阳：辽宁科学技术出版社，１９９４，９９～１６５ ８陈少裕．膜脂过氧化对植物细胞的伤害．植物生理学通讯，１９９１，（２）：８４～８９９唐 振缁，程式君．中药“霍山石斛”原植物的研究．植物研究，１９８４，４（３）：１４１Ｉｎｖ ｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｎＳＯＤ，ＰＯＤ，ＣＡＴＡｃｔｉｖｉｔｙａｎｄＬｉｐｉｄＰｅｒｏ ｘｉｄａｔｉｏｎｉｎＳｔｅｍｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｈｕｏｓｈａｎｅｎｓｅＺｈａｎｇＨ ｅｙｉｎｇＹｕＬｉｗｅｎＣａｉＹｏｎｇｐｉｎｇＸｕＹｕｎｃｈａｎｇ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎ ｔｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＡｎｈｕｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔ ｙ，Ｈｅｆｅｉ２３００３６）ＡｂｓｔｒａｃｔＴｈｅｈｉｇｈｅｓｔａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＳ ＯＤ，ＰＯＤａｎｄＣＡＴｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｒｅｄｉｎｔｈｅｓｔｅｍｓｏｆｔｈｒｅｅｙ ｅａｒｓｏｌｄｐｌａｎｔｓｏｆＤ．ｈｕｏｓｈａｎｅｎｓｅ，ａｍｅｄｉｃａｌｈｅｒｂ．Ｔ ｈｅＭＤＡｃｏｎｔｅｎｔｉｎｔｈｅｓｔｅｍｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅａｇｅｏｆ ｔｈｅｐｌａｎｔ．Ｉｔｗａｓａｌｓｏｆｏｕｎｄｔｈａｔｎｏｔｏｎｌｙｔｈｅｓｔｅｍｓｏ ｆｔｈｅｐｌａｎｔｂｕｔａｌｓｏｔｈｅｌｅａｖｅｓａｎｄｒｏｏｔｓｗｅｒｅｍｅｄｉｃａ ｌｙｅｆｆｅｃｔｉｖｅａｆｔｅｒａｎａｌｙｓｉｎｇｔｈｅｃｏｎ－ｔｅｎｔｏｆｖｉｔａｍ ｉｎＣ，ｓｏｌｕｂｌｅｓｕｇａｒａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｓ．ＫｅｙｗｏｒｄｓＤ．ｈｕｏｓｈ ａｎｅｎｓｅＳｔｅｍＬｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎＬｅａｔＲｏｏｔ栽培霍山石斛茎S OD、POD和CAT活性及细胞膜脂质过氧化作用的研究@张鹤英@于力文@蔡永萍$安徽农业 大学生物工程系霍山石斛,茎,膜脂过氧化,叶,根研究霍山石斛不同年龄茎的ＳＯＤ、ＰＯＤ和 ＣＡＴ活性以及细胞膜脂质过氧化作用，结果表明，霍山石斛３年茎的ＳＯＤ、ＰＯＤ和ＣＡＴ活 性最高，其茎显示出活跃的生理状态，采收栽培后的３年茎为药最适宜。霍山石斛茎中ＭＤＡ含量 随茎年龄增加而积累。同时，还测定了霍山石斛根、茎、叶中的Ｖｃ、可溶性糖和蛋白质含量，结 果表明，霍山石斛不仅可采茎为药，而且根、叶等其它部分也有较高的营养成分，可进行综合利用 。１徐云昌鸟，于力文，吴庆生等．霍山石斛的光合特性研究．应用生态学报，１９９３，４（１ ）：１８～２１２徐云昌鸟，于力文，张鹤英．激素对霍山石斛种子试管苗器官形成与转绿的作用 ．安徽农业科学，１９９１，１９（４）：３７８～３８１３吴庆生，丁亚萍，杨道麒等．中药霍 山石斛的微量元素分析及ＴＥ图谱鉴定．微量元素与健康研究，１９９５，１２（１）：３１～３ ２４丁亚平，吴庆生，杨道麒．霍山石斛不同部位中必需微量元素与必需氨基酸的相关性研究．安 徽农业科学，１９９４，２２（３）：２６５～２６７５吴庆生，丁亚萍，杨道麒．安徽霍山三种 石斛中游离氨基酸分析．安徽农业科学，１９９５，２３（３）：２６８～２７１６丁亚萍，杨道 麒，吴庆生等．安徽霍山三种石斛总生物碱的测定及其分布规律研究．安徽农业大学学报，１９９ ４，（４）：５０３～５０６７张宪政，陈凤玉，王荣富主编．植物生理学实验技术．沈阳：辽宁 科学技术出版社，１９９４，９９～１６５８陈少裕．膜脂过氧化对植物细胞的伤害．植物生理学 通讯，１９９１，（２）：８４～８９９唐振缁，程式君．中药“霍山石斛”原植物的研究．植物 研究，１９８４，４（３）：１４１的作用．安徽农业科学，１９９１，１９（４）：３７８～３ ８１３吴庆生，丁亚萍，杨道麒等．中药霍山石斛的微量元素分析及ＴＥ图谱鉴定．微量元素与健 康研究，１９９５，１２（１）：３１～３２４丁亚平，吴庆生，杨道麒．霍山石斛不同部位中必 需微量元素与必需氨基酸的相关性研究．安徽农业科学，１９９４，２２（３）：２６５～２６７５吴庆生，丁亚萍，杨道麒．安徽霍山三种石斛中游离氨基酸分析．安徽农业科学，１９９５，２３（３）：２６８～２７１６丁亚萍，杨道麒，吴庆生等．安徽霍山三种石斛总生物碱的测定及其分布规律研究．安徽农业大学学报，１９９４，（４）：５０３～５０６７张宪政，陈凤玉，王荣
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