５种抗菌药物对无芽胞厌氧菌体外抗菌作用的研究邓志爱廖筑华梁娇玲陈艳玲＊（广东药学院微生 物学教研室，广州５１０２２４）关键词无芽胞厌氧菌；药敏试验；最低抑菌浓度中图号Ｒ９７８ 近几年来，临床上无芽胞厌氧菌的感染日益增多。而无芽胞厌氧菌作为人体的正常菌群存在于人体 与外界相通的各个腔道内，当机体抵抗力降低或机体的正常菌群生态平衡受到破坏时，常引起机体 的内源性感染。又因为无芽胞厌氧菌对氨基糖苷类药物具有天然的耐药性，因此开发新的抗无芽胞 厌氧菌药物用于临床治疗很有必要。我们选择５种抗菌药物对无芽胞厌氧菌的体外抗菌活性进行了 初步研究，为临床用药提供参考。１材料和方法１．１仪器厌氧罐（８２５－Ａ型，沈阳市第三人 民医院），温箱（上海医疗器械厂），高压灭菌器（广州医疗设备厂），冰箱（意大利）。１．２ 培养基［１］牛心、牛脑浸出液，ＢＨＩ肉汤，ＢＨＩ琼脂血液培养基，庖肉培养基，血琼脂培养 基。１．３菌种临床分离的脆弱拟杆菌１１株，变形链球菌４株，卟啉单胞菌４株，药敏参考菌株 为脆弱拟杆菌（日本九州大学惠赠）。菌液制备是用接种环挑取ＢＨＩ琼脂血培养基中４８小时纯 培养物，置入０．５ｍｌ生理盐水制成细菌悬液，按比浊法与细菌标准比浊管比浊，使细菌浓度达 １０５～１０６ＣＦＵ／ｍｌ。１．４药物甲硝唑（ＭＮ，临床供静脉点滴用药，广东永康药业股 份有限公司），万古霉素（ＶＭ）、红霉素（ＥＭ）、四环素（ＴＥＴ）、氯霉素（ＣＭ）（国家 标准品，中国药品生物制品检定所）。以上药物均配制成１２８０μｇ／ｍｌ，置－２０℃冰箱保 存，临用时再作对倍稀释至所需浓度［１］。１．５无芽胞厌氧菌体外抗菌活性测定采用国际厌氧 菌药敏标准方法——琼脂稀释法［２］。１．６厌氧培养法将接种好的平板置于８２５－Ａ型厌氧 罐中，３７℃培养４８小时后观察结果。２结果５种抗菌药物对临床分离的１９株无芽胞厌氧菌及 对照参考株的最小抑菌浓度见表１。５种抗菌药物对无芽胞厌氧菌的最小抑菌浓度范围见表２。表 １５种抗菌药物对２０株无芽胞厌氧菌的ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）菌种号ＭＮＶＭＥＭＣＭＴＥＴ脆 弱拟杆菌１８１６１４０．２５２８＞１２８３２４１３４１２８１６１０．２５４１６１１０． １２５０．２５５３２１２８８４０．２５６４＞１２８１４０．２５７３２＞１２８８４３２８ ＞１２８＞１２８１４０．２５９４＞１２８３２４０．２５１０１２８１６１８２１１１２８１ ２８８４０．２５对照株１２８０．５１４０．２５卟啉单胞菌１＞１２８＞１２８４４０．２５ ２＞１２８１４０．５１６３＞１２８＞１２８８８８４＞１２８０．５８８１６变形链球菌１＞ １２８６４８４０．２５２＞１２８０．５１６８０．２５３＞１２８＞１２８６４４１６４０． ５１３２０．２５０．２５表２５种抗菌药物对２０株无芽胞厌氧菌的ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）范围 药物ＭＮＶＭＥＭＣＭＴＥＴＭＩＣ范围０．５－≥１２８０．５－≥１２８１－６４０．１２５ －８０．２５－３２３讨论从５种抗菌药物对２０株无芽胞厌氧菌的体外抗菌活性测定结果中发现 ，某些药物的抗菌作用与文献报道［２～７］有差异。熊德鑫等报道［２］，脆弱拟杆菌对四环素 耐药，是由于脆弱拟杆菌带有ＰＢＦ４质粒，但是使用多种ＤＮＡ分离方法都没有证明对四环素抗 性的传递与质粒有关。而我们的药敏结果则显示７２．８％的脆弱拟杆菌ＭＩＣ为０．２５μｇ／ ｍｌ，说明大多数的脆弱拟杆菌对四环素是敏感的。此外，四环素对变形链球菌、卟啉单胞菌也有 较强的抑制作用，其ＭＩＣ均为０．２５～１６μｇ／ｍｌ。王宇倩等人报道红霉素对革兰氏阴性 厌氧菌抗菌作用弱，但对革兰氏阳性厌氧菌极为敏感［５］。而我们的实验结果提示氯霉素、红霉 素对脆弱拟杆菌、卟啉单胞菌、变形链球菌亦有较好的体外抗菌活性，氯霉素的ＭＩＣ分别为０． １２５～８μｇ／ｍｌ，０．５～８μｇ／ｍｌ，０．２５～８μｇ／ｍｌ，红霉素的ＭＩＣ分别 为１～３２μｇ／ｍｌ，４～８μｇ／ｍｌ，８～６４μｇ／ｍｌ；而万古霉素则无抗菌活性，这 与文献报道［１，６，７］基本一致。过去甲硝唑是国际公认治疗拟杆菌感染的首选药。冯萍等报 道甲硝唑对３１株脆弱拟杆菌的ＭＩＣ范围为〈０．０３－≥３２μｇ／ｍｌ［３］。熊德鑫等的 研究结果显示甲硝唑对脆弱拟杆菌的ＭＩＣ为０．２４μｇ／ｍｌ［４］。张秀珍等人报道甲硝唑 对拟杆菌的ＭＩＣ为０．１２～３２μｇ／ｍｌ［７］。我们的研究结果与以上研究结果不同，１ １株临床分离株中有８株的ＭＩＣ为４～３２μｇ／ｍｌ，３株≥１２８μｇ／ｍｌ，参考株亦为 １２８μｇ／ｍｌ。这可能与临床应用甲硝唑治疗无芽胞厌氧菌较多，而把对甲硝唑的耐药株选择 出来；也可能由于我们所用的甲硝唑是临床供静脉点滴用药，其纯度没有标准品的纯，因此含量不 如标准品准确。综上所述，我们认为临床上对拟杆菌感染的治疗，最好先做药敏试验以选择最有效 的抗菌药物。参考文献１陈聪敏，王文风．厌氧菌及其感染．上海：上海医科大学出版社，１９８ ９．１８２，２２３，２３５２熊德鑫，吴周强，何丽娟．临床厌氧菌检验手册．北京：中国科学 技术出版社，１９９４．７８，１８６３冯萍，汪冰，余汝佳，等．５种抗菌药物对厌氧菌的体外 抗菌活性研究．中国抗生素杂志，１９９６，２１（１）：４０４熊德鑫，祝小枫，盛志勇，等． 厌氧菌对临床１０种药物的敏感性研究．中华医学检验杂志，１９９３，１６（２）：９９５王宇 倩，张永信，张婴之，等．５种抗菌药物对厌氧菌的体外抗菌活性．上海医学检验杂志，１９９１ ，６（４）：１９５６孙荫，杨丕山，葛平，等．龈下菌斑产黑色素普氏菌和卟啉单胞菌的检测． 中华医学检验杂志，１９９６，１９（２）：７７７张秀珍，陈东科，胡继红，等．甲硝唑等药物 对１１５株厌氧菌最低抑菌浓度测定．中华医学检验杂志，１９９６，１９（６）：３６６5种抗 菌药物对无芽胞厌氧菌体外抗菌作用的研究@邓志爱@廖筑华@梁娇玲@陈艳玲$广东药学院微生 物学教研室无芽胞厌氧菌；药敏试验；最低抑菌浓度１陈聪敏，王文风．厌氧菌及其感染．上海： 上海医科大学出版社，１９８９．１８２，２２３，２３５２熊德鑫，吴周强，何丽娟．临床厌氧 菌检验手册．北京：中国科学技术出版社，１９９４．７８，１８６３冯萍，汪冰，余汝佳，等． ５种抗菌药物对厌氧菌的体外抗菌活性研究．中国抗生素杂志，１９９６，２１（１）：４０４熊 德鑫，祝小枫，盛志勇，等．厌氧菌对临床１０种药物的敏感性研究．中华医学检验杂志，１９９ ３，１６（２）：９９５王宇倩，张永信，张婴之，等．５种抗菌药物对厌氧菌的体外抗菌活性． 上海医学检验杂志，１９９１，６（４）：１９５６孙荫，杨丕山，葛平，等．龈下菌斑产黑色素 普氏菌和卟啉单胞菌的检测．中华医学检验杂志，１９９６，１９（２）：７７７张秀珍，陈东科 ，胡继红，等．甲硝唑等药物对１１５株厌氧菌最低抑菌浓度测定．中华医学检验杂志，１９９６ ，１９（６）：３６６菌及其感染．上海：上海医科大学出版社，１９８９．１８２，２２３，２ ３５２熊德鑫，吴周强，何丽娟．临床厌氧菌检验手册．北京：中国科学技术出版社，１９９４． ７８，１８６３冯萍，汪冰，余汝佳，等．５种抗菌药物对厌氧菌的体外抗菌活性研究．中国抗生 素杂志，１９９６，２１（１）：４０４熊德鑫，祝小枫，盛志勇，等．厌氧菌对临床１０种药物 的敏感性研究．中华医学检验杂志，１９９３，１６（２）：９９５王宇倩，张永信，张婴之，等 ．５种抗菌药物对厌氧菌的体外抗菌活性．上海医学检验杂志，１９９１，６（４）：１９５６孙 荫，杨丕山，葛平，等．龈下菌斑产黑色素普氏菌和卟啉单胞菌的检测．中华医学检验杂志，１９ ９６，１９（２）：７７７张秀珍，陈东科，胡继红，等．甲硝唑等药物对１１５株厌氧菌最低抑 菌浓度测定．中华医学检验杂志，１９９６，１９（６）：３６６5种抗菌药物对无芽胞厌氧菌体 外抗菌作用的研究@邓志爱@廖筑华@梁娇玲@陈艳玲$广东药学院微生物学教研室无芽胞厌氧菌 ；药敏试验；最低抑菌浓度１陈聪敏，王文风．厌氧菌及其感染．上海：上海医科大学出版社，１ ９８９．１８２，２２３，２３５２熊德鑫，吴周强，何丽娟．临床厌氧菌检验手册．北京：中国 科学技术出版社，１９９４．７８，１８６３冯萍，汪冰，余汝佳，等．５种抗菌药物对厌氧菌的 体外抗菌活性研究．中国抗生素杂志，１９９６，２１（１）：４０４熊德鑫，祝小枫，盛志勇， 等．厌氧菌对临床１０种药物的敏感性研究．中华医学检验杂志，１９９３，１６（２）：９９５ 王宇倩，张永信，张婴之，等．５种抗菌药物对厌氧菌的体外抗菌活性．上海医学检验杂志，１９ ９１，６（４）：１９５６孙荫，杨丕山，葛平，等．龈下菌斑产黑色素普氏菌和卟啉单胞菌的检测．中华医学检验杂志，１９９６，１９（２）：７７７张秀珍，陈东科，胡继红，等．甲硝唑等药物对１１５株厌氧菌最低抑菌浓度测定．中华医学检验杂志，１９９６，１９（６）：３６６
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