青蛤扇贝肉提取液对老龄鼠免疫器官巨噬细胞淋巴细胞α—萘酯酶活性影响的定量研究张桂兰刘翠蒙 一纯候秋凤盛梅海洋生物种类繁多，资源丰富，自古以来，对其医食就有众多研究。青蛤、扇贝 属双壳贝类，历代《本草》及《神农本草经》中记载，其肉含有丰富的蛋白质，脂肪、碳水化合物 、无机盐、氨基酸及维生素等，有清热、利湿、化痰、散结、润毛发、消瘿气等功效［１］。近代 文献记载贝类具有治疗高血压、眩晕、抗心律失常作用［２］。文蛤、扇贝有防癌、抗癌、提高免 疫力的作用［３］［４］［５］［６］。但对免疫器官的巨噬细胞及淋巴细胞标记酶的定量研究文 献未见报道。因此，我们采用青蛤（Ｃｙｃｌｉｎａｓｉｎｅｎｓｉｓ）、扇贝肉（Ａｅｑｕｉ ｐｅｃｔｅｎｉｒａｄｉａｎｓ）提取液腹腔注射，观察对老龄小鼠淋巴器官内巨噬细胞、淋巴细 胞ＡＮＡＥ酶的活性影响进行定量研究。现将结果报告如下。资料与方法１．１制备青蛤、扇贝 肉提取液［７］１．２实验动物及分组选用中国药品生物制品所实验动物中心提供的ＢＡＬＢ／ Ｃ纯系小鼠２７只，雌雄不限（１８个月），随机分为三组，每组各９只；其中一组为对照组，腹 腔注射生理盐水，每只０．３ｍｌ／天，另两组为实验组，腹腔分别注射青蛤、扇贝肉提取液，每 只０．３ｍｌ／天（每毫升含原药材１．５克），连续注射三周。１．３检验方法１．３．１ 取材与制片：将小鼠于最后一次给药后２４小时处死。剖腹取脾脏、淋巴结，用组织碾磨器制成组 织悬液、涂片，备用。１．３．２ＡＮＡＥ酶的定量检测方法：将涂版置于４℃甲醛一丙酮固定 液（ｐＨ６．０），固定４５秒，取出后马上流水冲洗２～３分钟，室温自然干燥；入预热３７℃ 孵育液（１／１５ｍｌ磷酸缓冲液８９ｍｌ，六偶氮副品红液６ｍｌ，２％ａ一醋酸萘酯溶液２． ５ｍｌ，ｐＨ６．０）孵育２小时；水冲洗，干燥，２％甲基绿３７℃复染３０分钟。二甲苯透明 后封片。油镜下每份标本随机输入２０个ＡＮＡＥ阳性细胞，ＰＩＰ图象分析系统对灰度值进行定 量分析，数据进行统计学处理（ｔ检验）。结果２．１实验结果实验结果提示：青蛤、扇贝肉提 取液可明显降低老龄小鼠脾脏内巨噬细胞、淋巴细胞和淋巴结内巨噬细胞的灰度值，使其中ＡＮＡ Ｅ酸性酯酶活性明显增强，与对照组比较相差均非常显著（详见附表）。附表青蛤、扇贝肉提取液 对老龄小鼠免疫器官巨噬细胞、淋巴细胞灰度值的影响（ｘ±ｓ）组名淋巴结巨噬细胞脾脏巨噬细 胞淋巴细胞对照组１８８．８１±６１．２６１８１．１４±５７．９２４９．０４±１．７２青 蛤组１４９．１１±６２．８４１４２．６０±５４．４８２１．６７±０．６６ 扇贝组１６３．６９±５９．９０１５０．７５±５８．０１３３．９１±１．２１ 注：Ｐ＜０．０５Ｐ＜０．０１Ｐ＜０．００１讨论机体的衰老和疾病的发生均与免 疫功能低下有关。淋巴细胞、巨噬细胞是免疫系统中的重要成分，是免疫反映的核心和关键。ＡＮ ＡＥ酶是反映吞噬细胞消化功能的可观察的特异性酶类之一。其酶的活性增强，促进细胞氧化代谢 ，增强吞噬细胞对病原微生物或肿瘤靶细胞的吞噬杀伤功能和释放更多的淋巴因子，扩大对细胞的 免疫效应，扩大细胞免疫功能。本实验证明青蛤、扇贝肉提取液均能使老龄小鼠脾脏内巨噬细胞、 淋巴细胞和淋巴结内巨噬细胞ＡＮＡＥ酶活性明显增强。有促进免疫细胞应答反应和提高机体免疫 力的作用。为青蛤、扇贝在保健、抗衰老和增强健康水平等方面的研究提供了可靠的理论依据。其 作用机制可能与青蛤、扇贝肉所含成分有关。有文献报道，无脊椎软体海洋生物的软体部分含有糖 原、氨基酸、牛黄酸、硒及丰富的矿物质。其中牛黄酸是一种含硫氨基酸，有多种生理活性，具有 解热、抗炎、抗氧化、增强机体免疫力、降血脂等作用［８］［９］；糖蛋白对癌细胞有直接杀伤 的作用［６］；硒有增强机体免疫力的能力，有抗癌、防癌、预防老年病作用［１０］；日本抗癌 中心研究发现扇贝可以破坏癌细胞［４］。这说明海洋生物除含有丰富的营养素、维生素和矿物质 外，还有增强机体免疫力、防病治病之功效，这为我们充分利用丰富的海洋生物资源，不仅把青蛤 、扇贝做为美味食品，同时还利用“药食同源”的学说，使其成为防病、治病、抗衰老的药膳食品 ，青蛤、扇贝肉有较好的研究前景和很大的实用价值。参考文献１钱伯文，孟中法中国食疗学 ．第一版．上海·上海科学技术出版社１９８７，１９１～１９２２青岛医学院药理教究室贻 贝研究组贻贝对心血管系统的药理作用海洋药理１９８３，２（２）：９５～９６３张万 隆文蛤的养殖中国海洋药物１９９２，１１（４）：４５～４８４柯玲，丁建弥，梁橘声 海洋生物（ＨＳ～７２）对肺癌治疗的观察海洋药物１９８７，６（２）：２２～２４５ 禹志领，窦昌炎蒋文俊文蛤肉提取液对小鼠免疫功能的影响中国海洋药物１９９１，１０ （４）：１５～１７６吴元熙，丁源海洋保健食品．海洋药物．１９８７，６（１）：４０～ ４４７刘翠，张桂兰，欧文斌青蛤、扇贝肉提取液对小鼠血液细胞的影响中国老年医学杂志 １９９５，１５（专）：２６～２７８邱珊，林钧明牛黄酸药理作用的研究进展中国海洋 药物１９９２，１１（３）：３０～３２９李青选牡蛎保健食品及国外开发的概况中国海 洋药物１９８９，８（２）：４７～５１１０毛君，管华诗紫分贝和海湾扇贝生化成分中硒 的分布特点中国海洋药物１９９６，１５（１）：１６～１８青蛤扇贝肉提取液对老龄鼠免疫 器官巨噬细胞淋巴细胞α—萘酯酶活性影响的定量研究@张桂兰@刘翠@蒙一纯@候秋凤@盛梅$ 中国人民解放军空军北戴河疗养院１钱伯文，孟中法中国食疗学．第一版．上海·上海科学技 术出版社１９８７，１９１～１９２２青岛医学院药理教究室贻贝研究组贻贝对心血管系统 的药理作用海洋药理１９８３，２（２）：９５～９６３张万隆文蛤的养殖中国海洋药 物１９９２，１１（４）：４５～４８４柯玲，丁建弥，梁橘声海洋生物（ＨＳ～７２）对 肺癌治疗的观察海洋药物１９８７，６（２）：２２～２４５禹志领，窦昌炎蒋文俊文 蛤肉提取液对小鼠免疫功能的影响中国海洋药物１９９１，１０（４）：１５～１７６吴元 熙，丁源海洋保健食品．海洋药物．１９８７，６（１）：４０～４４７刘翠，张桂兰，欧文 斌青蛤、扇贝肉提取液对小鼠血液细胞的影响中国老年医学杂志１９９５，１５（专）：２ ６～２７８邱珊，林钧明牛黄酸药理作用的研究进展中国海洋药物１９９２，１１（３） ：３０～３２９李青选牡蛎保健食品及国外开发的概况中国海洋药物１９８９，８（２） ：４７～５１１０毛君，管华诗紫分贝和海湾扇贝生化成分中硒的分布特点中国海洋药物 １９９６，１５（１）：１６～１８健食品．海洋药物．１９８７，６（１）：４０～４４７刘 翠，张桂兰，欧文斌青蛤、扇贝肉提取液对小鼠血液细胞的影响中国老年医学杂志１９９５ ，１５（专）：２６～２７８邱珊，林钧明牛黄酸药理作用的研究进展中国海洋药物１９ ９２，１１（３）：３０～３２９李青选牡蛎保健食品及国外开发的概况中国海洋药物１ ９８９，８（２）：４７～５１１０毛君，管华诗紫分贝和海湾扇贝生化成分中硒的分布特点 中国海洋药物１９９６，１５（１）：１６～１８青蛤扇贝肉提取液对老龄鼠免疫器官巨噬细 胞淋巴细胞α—萘酯酶活性影响的定量研究@张桂兰@刘翠@蒙一纯@候秋凤@盛梅$中国人民解 放军空军北戴河疗养院１钱伯文，孟中法中国食疗学．第一版．上海·上海科学技术出版社 １９８７，１９１～１９２２青岛医学院药理教究室贻贝研究组贻贝对心血管系统的药理作用 海洋药理１９８３，２（２）：９５～９６３张万隆文蛤的养殖中国海洋药物１９９ ２，１１（４）：４５～４８４柯玲，丁建弥，梁橘声海洋生物（ＨＳ～７２）对肺癌治疗的 观察海洋药物１９８７，６（２）：２２～２４５禹志领，窦昌炎蒋文俊文蛤肉提取液 对小鼠免疫功能的影响中国海洋药物１９９１，１０（４）：１５～１７６吴元熙，丁源 海洋保健食品．海洋药物．１９８７，６（１）：４０～４４７刘翠，张桂兰，欧文斌青蛤、 扇贝肉提取液对小鼠血液细胞的影响中国老年医学杂志１９９５，１５（专）：２６～２７８ 邱珊，林钧明牛黄酸药理作用的研究进展中国海洋药物１９９２，１１（３）：３０～３２９李青选牡蛎保健食品及国外开发的概况中国海洋药物１９８９，８（２）：４７～５１１０毛君，管华诗紫分贝和海湾扇贝生化成分中硒的分布特点中国海洋药物１９９６，１５（１）：１６～１８
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