抗肝炎病毒冲剂是在中西医结合治疗经验和研究基础上合理处方的新药。除乙型肝炎外，对于丙型肝 炎和了型肝炎合并重叠以及亚临床肝癌均有疗效。抗肝炎病毒冲剂是由柴胡、白芍、赤芍等17种 中药组成的大复方制剂。为了更好地控制产品质量，采用薄层扫描法、高效液相色谱法对其组成和 主要化学成分进行定性鉴别和含量测定，并报告对1992～1994年3年完成抗肝炎病毒冲剂 治疗的330例慢性肝炎进行了疗效观察。l实验部分1．l实验材料、仪器试剂：均为分析纯。 对照品：芍药成、阿魏酸均为中国药典化学对照品，中国药品生物制品检定所提供。样品：抗肝炎 病毒冲剂由哈尔滨医科大学附属第二医院制剂科生产。薄层板：青岛海洋化工厂生产。仪器：岛津 CS－930双波长薄层扫描仪。美国Waters液相色谱仪（600E泵，996二级管阵列 检测器，717自动进样器，2010色谱管理系统）。1．2处方组成柴胡、党参、白芍、赤芍 、元革、生甘草、黄茂、桑寄生、兔丝子、当归、生地、熟地、羊火叶、丹参、半夏、生姜、生大 黄。1．3制备工艺将处方中药材挑选后称量，洗净后水煎煮2次，第1次1．sh，第2次lh ，过滤，合并滤液浓缩成稠膏（1：2以上），烘干后粉碎成细粉，与烘干的糖粉混合均匀，制粒 ，干燥后分装，每包sg。1．4质且标准1．4．1薄层扫描及鉴别分析：样品制备：取抗肝炎 病毒冲剂309，水煎30min，煎液浓缩至250ml左右，经过处理后备用。对照液制备： 模拟制剂处方比例称取标准药材，制成相当于309成药的阴性、阳性对照品（阳性对照品为单味 标准药材；阴性对照品为成方中减去相应一味标准药材），分别按样品液制备方法制备成阴、阳对 照液，备用。大黄和甘草的鉴别薄层板：硅胶G板（展开前105oC，活化lh），展开剂：苯 ：氯仿：甲醇（10：10：2），展开方式：上行法，展距：16Cffi。展开后吹干，在3 65urn紫外灯下定位。甘草扫描：荧光检测器，激发波长为365urn，发射滤光片为3“ ，扫描方式为反射式直线扫描，灵敏度为中、狭缝为1．2X6mm，结果见图1。大黄的扫描： 可见光检测器，吸收波长为400urn结果见图2。当归的鉴别：称取阿魏酸对照品8．07m g，加人甲醇使溶解并定容至100ml，得80．7pg／ml的阿魏酸标准品溶液，备用。薄 层层析用展开剂为乙醇：苯（1：9），展距为15cm，展开后吹干，于365urn紫外灯下 定位。薄层扫描为荧光检测器，激发波长为365urn，结果见图3。白芍和赤芍的鉴别：取抗 肝炎病毒冲剂309，加水浸泡，煎煮30min，过滤浓缩至250ml，离心取上清液10m l，加人26．3ml无水乙醇，使乙醇含量达70％，沉降4～sh，过滤，备用。模拟制剂处 方比例称取标准药材，制成相当于309抗肝炎病毒冲剂的阴、阳性对照品，按样品制备方法制成 阴、阳对照液各用．HPI。C沃色谱条件：流动相为甲醇：水（3：70），流速为0．sml ／min，检测波长为230run，灵敏度为0．IAUFS，结果见图4。14．2芍药成的
含量测定：标准液的配制与直线回归方程的测定：精密称取干燥至恒重的芍药成对照品5．38m g，加人50％乙醇使溶解井定容至100ml容量瓶中，得53．spg／ml的芍药式标准液 。标准液分别进样2、4、6、8、10pl，按上述色谱条件测定，微机计算出峰面积，以峰面 积（X）对进样量（Y）回归得直线方程：Y一5．348X10一4X十34．095v一0． 9995。样品测定：精密称取抗肝炎病毒冲剂粉末sg，加人50％乙醇50ml，超声提取3 0min，将提取滤液人100ml容量瓶中，并用50％乙醇洗涤残渣数次，洗涤液并人容量瓶 中，稀释至刻度。Zpl进样，按上述色谱条件测定并计算含量，结果见表1。回收率测定：精密 称取样品5份，分别精密加人芍药成标准品，同样品项下处理，结果平均回收率为98．69％， RSD—1．61％。羌1技阿格病理冲剂中注较成会且（、＝“2
疗效观察2．l对象与方法2 ．1．1病例：符合1990年全国肝炎会议制订的《病毒性肝炎诊断标准》，临床诊断明确，具 备血清病毒学标志检验者330例。抗肝炎病毒冲剂治疗组170例，对照组160例。两组的一 般资料数据各具可比性，见表2。2．1．2治疗方法：治疗组每日早晚各服抗肝炎病毒冲剂1包 ，连表2治疗前病人基本资料数据服200天。对照组服用市售一般“护肝、利肝”成药及维生素 类。两组患者均不用降酶、免疫抑制和免疫调节药以及干扰素等生物制剂。2．1．3观察方法： 疗程前及疗程后3～6个月内检测HBV、HCV血清免疫学标志（均ELISA法）和肝功酶学 指标；保留血清检测HBV－DNA（生物素探针法）及HCV－RNA（PCR法）。2．2疗 效以病毒DNA或RNA阴转或HBSAg阴转，同时抗一HBS阳转，并且异常的肝功指标（包 括ALT升高）、体征与症状消失，而恢复正常生活与工作能力为“显效”；HBeAg阴转或并 抗一HBe形成，肝功能、体征与症状复常，而基本恢复正常生活能力为“有效”；疗程后改变未 达上述指标为“无效”，进行综合评价，效果如表3。表3观察病例疗效综合评价3讨论3．1． 1薄层扫描时采用荧光检测，其基线较稳定，干扰峰、杂峰少。但对大黄进行薄层扫描时，因其吸 收波长太，J’254nm，硅胶G板板面产生的紫外吸收对它产生了一定的影响，效果不理想， 因此采用可见光检测，经测定其最大吸收波长为400urn，以可见光40（）n对其进行薄层 扫描定性，取得满意效果。3．2．2在提取制剂中的芍药成时，分别用甲醇和乙醇为溶剂，从回 收率角度看，两者无显著性差异，由于乙醇较之甲醇毒性小，故选用乙醇作为提取溶剂。对超声提 取后的样品残渣，按同法处理，无芍药成吸收峰，说明芍药成提取完全。在流动相的选择上，我们 参考有关文献’‘”，曾用甲醇：水（40：60），甲醇：水（3：65），分离后杂质峰有干 扰，故选用甲醇：水（3：70），芍药成与杂质分离较好。3．3．3疗效观察应首先着眼于病 毒学标志的改变，本文观察到抗肝炎病毒冲剂疗程后的HBV－DNA阴转率为52．9％，与对 照组16．7％，相比较差异极显著（p＜0．01）。采用传统的HBeAg阴转率和抗一HB e阳转率比较，治疗组分别为76．8％和39．2％，均比对照组19．5％和20．0％明显 为高（p＜0．OU。近年已知HBV前C编码区突变可导致HBeAg阴转而病毒继续复制，须 警惕有可能使其病力增加“’。本文治疗组中17例HBeAg阴转后的疗程前后的HBV－DN A检测结果为转阴9例（52．9％），仍阳性4例（23．5％），仍阴性3例（17．6％） ，另有1例（5．9％）由治疗前的阴性转为阳性。由此可知，HBe系统绝大多数仍与病毒活性 消长相关。3．4．4抗肝炎病毒冲剂的综合疗效评估总有效率近70％，较对照组约40％显著 为优。本文观察用药为作者自70年代以来的第三代治疗慢性肝炎药物，抗肝炎病毒冲剂对于乙型 和丙型肝炎病毒慢性感染可发挥满意的治疗效果。抗肝炎病毒冲剂的研制与临床应用@吴琳华$哈 尔滨医科大学临床药学药物研究所!150086@孙考祥$哈尔滨医科大学临床药学药物研究所 !150086@黄海燕$哈尔滨医科大学临床药学药物研究所!150086@贾丽艳$黑龙江 中医药科大学@姚贞$哈尔滨医科大学附属第二医院!150086抗肝炎病毒冲剂;;HPLC ;;
芍药甙;;临床应用本文介绍抗肝炎病毒冲剂的处方组成、制备工艺、质量标准以及临床应用 研究。HPLC法对主药之一芍药的有效成分芍药甙进行含量测定，重现性良好，平均回收率98 ．69％，RSD=1．61％。据33cd分组观察，治疗组HBV－DNA阴转率52．9％，对照组为16．7％；HBeAg阴转率和抗-HBe阳转率分别为76．8％和39．2％，对照组分别为19．5％和20．0%。1李俊,胡志厚.高效液相色谱法测定八珍制剂中的芍药甙.中国药学杂志,1991,5:289
2李章万,刘立康,郭平,等.高效液相色谱法测定芍药及14种含白芍药成药中芍药甙的含量.药物分析杂志,1990,10(6):331
3田庚善.病毒性肝炎研究中两个值得注意的问题.中华内科杂志,1994,33(4):219 黑龙江省“八·五”攻关课题，经测定其最大吸收波长为400urn，以可见光40（）n对其 进行薄层扫描定性，取得满意效果。3．2．2在提取制剂中的芍药成时，分别用甲醇和乙醇为溶 剂，从回收率角度看，两者无显著性差异，由于乙醇较之甲醇毒性小，故选用乙醇作为提取溶剂。 对超声提取后的样品残渣，按同法处理，无芍药成吸收峰，说明芍药成提取完全。在流动相的选择 上，我们参考有关文献’‘”，曾用甲醇：水（40：60），甲醇：水（3：65），分离后杂 质峰有干扰，故选用甲醇：水（3：70），芍药成与杂质分离较好。3．3．3疗效观察应首先 着眼于病毒学标志的改变，本文观察到抗肝炎病毒冲剂疗程后的HBV－DNA阴转率为52．9 ％，与对照组16．7％，相比较差异极显著（p＜0．01）。采用传统的HBeAg阴转率和 抗一HBe阳转率比较，治疗组分别为76．8％和39．2％，均比对照组19．5％和20． 0％明显为高（p＜0．OU。近年已知HBV前C编码区突变可导致HBeAg阴转而病毒继续 复制，须警惕有可能使其病力增加“’。本文治疗组中17例HBeAg阴转后的疗程前后的HB V－DNA检测结果为转阴9例（52．9％），仍阳性4例（23．5％），仍阴性3例（17 ．6％），另有1例（5．9％）由治疗前的阴性转为阳性。由此可知，HBe系统绝大多数仍与 病毒活性消长相关。3．4．4抗肝炎病毒冲剂的综合疗效评估总有效率近70％，较对照组约40％显著为优。本文观察用药为作者自70年代以来的第三代治疗慢性肝炎药物
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