短毛五加总皂苷在体外抑制人血小板聚集和血小板因子４释放１陈小川，夏兰２，胡松３，黄光（海 南医学院药理教研室，海口５７０１０２；２海南省人民医院血液室，海口５７００１１；３海南 心血管病医院，海口５７０２０８，中国）关键词短毛五加；皂苷类；血小板聚集；血小板因子４ ；血栓形成目的：研究短毛五加总皂苷（ＡＧＶＰＳ）在体外对人血小板聚集和血小板因子４（Ｐ Ｆ４）释放反应的影响．方法：采用比浊法测定人血小板聚集，肝素凝血酶凝集时间（ＨＴＣＴ） 法测定人ＰＦ４释放反应．结果：ＡＧＶＰＳ浓度依赖性地抑制血小板ＡＲｍａｘ，其ＩＣ５０分 别为１３３（ＡＤＰ诱导），１６６（肾上腺素诱导）和４２ｇ·Ｌ－１（胶原诱导）．同 时提高ＤＲ５ｍｉｎ（ＡＤＰ诱导）及延长诱导迟缓期（胶原诱导）；在ＡＤＰ和胶原刺激的人Ｐ Ｆ４释放反应中，ＡＧＶＰＳ延长其ＨＴＣＴ．同时，ＡＧＶＰＳ减轻体外形成血栓的干、湿重． 结论：ＡＧＶＰＳ在体外对人血小板聚集和释放反应及血栓形成具有显著的抑制作用．Ｉｎｈｉｂ ｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔｓｏｆＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｇｒａｃｉｌｉｓｔｙｌｕｓｓａｐｏｎ ｉｎｓｏｎｈｕｍａｎｐｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎａｎｄｐｌａｔｅｌｅｔｆａｃ ｔｏｒ４ｌｉｂｅｒａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏ１ＣＨＥＮＸｉａｏＣｈｕａｎ，ＸＩＡＬａｎ ２，ＨＵＳｏｎｇ３，ＨＵＡＮＧＧｕａｎｇ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏ ｇｙ，ＨａｉｎａｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｈａｉｋｏｕ５７０１０２；２Ｌａｂｏｒａ ｔｏｒｙｏｆＨｅｍａｔｏｌｏｇｙ，ＨａｉｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＰｅｏｐｌｅｓＨｏ ｓｐｉｔａｌ，Ｈａｉｋｏｕ５７００１１；３ＨａｉｎａｎＣａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒＨｏ ｓｐｉｔａｌ，Ｈａｉｋｏｕ５７０２０８，Ｃｈｉｎａ）ＫＥＹＷＯＲＤＳＡｃａｎｔｈｏｐａ ｎａｘｇｒａｃｉｌｉｓｔｙｌｕｓ；ｓａｐｏｎｉｎｓ；ｐｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇａｔｉ ｏｎ；ｐｌａｔｅｌｅｔｆａｃｔｏｒ４；ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓＡＩＭ：Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅ ｅｆｅｃｔｓｏｆＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｇｒａｃｉｌｉｓｔｙｌｕｓｖａｒｐｕｂｅｓｃｅ ｎｓＬｉｓａｐｏｎｉｎｓ（ＡＧＶＰＳ）ｏｎｈｕｍａｎｐｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇａｔｉ ｏｎａｎｄｐｌａｔｅｌｅｔｆａｃｔｏｒ４（ＰＦ４）ｌｉｂｅｒａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏ． ＭＥＴＨＯＤＳ：ＨｕｍａｎｐｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙＡ ＤＰ，ａｄｒｅｎａｌｉｎｅ，ａｎｄｃｏｌａｇｅｎｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｔｕｒｂｉｄｉ ｍｅｔｒｉｃａｌｙ．Ｔｈｅａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎｃｕｒｖｅｗａｓｒｅｃｏｒｄｅｄｏｎａ ｐｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇｏｍｅｔｅｒａｎｄｔｈｅｍａｘｉｍａｌａｇｇｒｅｇａｔｉｏ ｎｒａｔｅ（ＡＲｍａｘ），ｅｆｅｃｔｉｖｅｄｅａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎｒａｔｅｉｎ５ｍｉ ｎ（ＤＲ５ｍｉｎ）ａｎｄｌａｇｔｉｍｅ（ＬＴ）ｗｅｒｅａｕｔｏｃａｌｃｕｌａｔｅｄｂｙ ｔｈｅｂｕｉｌｔｉｎｍｉｃｒｏｃｏｍｐｕｔｅｒ；ＰＦ４ｌｉｂｅｒａｔｉｏｎｆｒｏｍｈ ｕｍａｎｐｌａｔｅｌｅｔｓｓｔｉｍｕｌａｔｅｄｂｙＡＤＰａｎｄｃｏｌａｇｅｎｗａｓｄｅ ｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｒｅｃｏｒｄｉｎｇｔｈｅｈｅｐａｒｉｎｔｈｒｏｍｂｉｎｃｌｏｔｉｎ ｇｔｉｍｅ（ＨＴＣＴ）．Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｗａｓｔｅｓｔｅｄｂｙｗｅｉｇｈｉｎｇｔｈ ｅｗｅｔａｎｄｄｒｙｔｈｒｏｍｂｉｆｏｒｍｅｄｉｎａｓｉｌｉｃｏｎｉｚｅｄｒｅｖｏｌｖ ｉｎｇｒｉｎｇ．ＲＥＳＵＬＴＳ：ＡＧＶＰＳｉｎｈｉｂｉｔｅｄｉｎｖｉｔｒｏｔｈｅＡＲｍ ａｘｗｉｔｈＩＣ５０ｏｆ１３３（９５％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｌｉｍｉｔｓ：１０９－１ ６３，ＡＤＰｉｎｄｕｃｅｄ），１６６（１５４－１７９，ａｄｒｅｎａｌｉｎｅ ｉｎｄｕｃｅｄ），ａｎｄ４２ｇ·Ｌ－１（０６－２９，ｃｏｌａｇｅｎｉｎｄｕｃｅｄ ）．ＴｈｅＤＲ５ｍｉｎ（ｏｎＡＤＰｉｎｄｕｃｅｄａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ）ａｎｄＬＴ（ ｃｏｌａｇｅｎｉｎｄｕｃｅｄ）ｗｅｒｅａｌｓｏｉｎｃｒｅａｓｅｄａｓｗｅｌ．Ｍｅａｎ ｗｈｉｌｅ，ＡＧＶＰＳ０６３－２５０ｇ·Ｌ－１ｐｒｏｌｏｎｇｅｄＨＴＣＴｏｎＡＤＰ ａｎｄｃｏｌａｇｅｎｓｔｉｍｕｌａｔｅｄＰＦ４ｌｉｂｅｒａｔｉｏｎ．Ａｔ０３４－ １３９ｇ·Ｌ－１，ＡＧＶＰＳｒｅｄｕｃｅｄｔｈｅｗｅｔａｎｄｄｒｙｗｅｉｇｈｔｏｆｔ ｈｒｏｍｂｉｆｏｒｍｅｄｉｎｖｉｔｒｏ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ：ＡＧＶＰＳｉｎｈｉｂｉｔ ｓｈｕｍａｎｐｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ，ｌｉｂｅｒａｔｉｏｎ，ａｎｄｔｈｒ ｏｍｂｏｓｉｓｉｎｖｉｔｒｏ，ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇｉｔｓｐｏｓｓｉｂｌｅａｎｔｉｔｈｒ ｏｍｂｏｔｉｃａｃｔｉｏｎｉｎｍａｎ．Ｔｈｅｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓｅｘｔｒａｃｔｅ ｄｆｒｏｍＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｇｒａｃｉｌｉｓｔｙｌｕｓｖａｒｐｕｂｅｓｃｅｎｓ （ｐａｍｐａｎｉｎ）Ｌｉ（ＡＧＶＰＳ），ｓｈｏｗｅｄｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｓｏ ｎｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈｅｍｉａ〔１〕，ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ 〔２〕，ａｎｄｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｅｆｅｃｔｓａｇａｉｎｓｔａｒｈｙｔｈｍｉａｓｉｎｄ ｕｃｅｄｂｙｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ，ＢａＣｌ２，ｉｓｏｐｒｅｎａｌｉｎｅ，ａｎｄｏｕａｂ ａｉｎｅ〔３〕ａｓｗｅｌａｓｂｙｉｓｃｈｅｍｉａａｎｄｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ〔４〕．Ｔ ｈｅｐｌａｔｅｌｅｔｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍ ｅｎｔｏｆｃｏｒｏｎａｒｙｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅｓａｎｄａｒｈｙｔｈｍｉａｓ〔５－６ 〕．Ｏｕｒｐｒｅｓｅｎｔｗｏｒｋｗａｓｕｎｄｅｒｔａｋｅｎｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｅｃ ｔｓｏｆＡＧＶＰＳｏｎｈｕｍａｎｐｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ，Ｐｌａｔｅｌｅ ｔｆａｃｔｏｒ４（ＰＦ４）ｌｉｂｅｒａｔｉｏｎ，ａｎｄｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｉｎｖｉｔｒ ｏ．ＭＡＴＥＲＩＡＬＳＡＮＤＭＥＴＨＯＤＳＤｒｕｇｓａｎｄｒｅａｇｅｎｔｓＡＧＶＰＳ， ａｙｅｌｏｗｉｓｈｃｒｙｓｔａｌｐｏｗｄｅｒ，ｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅＣ ｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｇｒａｃｉｌｉｓｔｙｌｕｓｖａｒｐｕｂｅｓ ｃｅｎｓｗｉｔｈｃｌａｓｉｃａｌｍｅｔｈｏｄ〔７〕ａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｉｎＧｕａ ｎｇｚｈｏｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃａｌａｎｄＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＩｎ ｄｕｓｔｒｙ．ＴｈｅｓａｐｏｎｉｎｃｏｎｔｅｎｔｏｆＡＧＶＰＳｗａｓ２８９％ｄｅｔｅ ｒｍｉｎｅｄｗｉｔｈｐｈｏｔｏｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄ．Ｔｅｎｓｐｏｔｓｏ ｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓｗｅｒｅｓｈｏｗｎｏｎｔｈｅｓｉｌｉｃａｇｅｌｔｈｉｎｌａ ｙｅｒｐｌａｔｅ，ｆｏｕｒｏｆｔｈｅｍｈａｖｉｎｇｔｈｅｓａｍｅＲｆｖａｌｕｅｓａｓＲ ｂ１，Ｒｄ，Ｒｅ，ａｎｄＲｇｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ（Ｌａｂｏ ｒａｔｏｒｙｄａｔａｏｆＨｕｎａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）．Ｉｔｗａｓｄｉ ｓｓｏｌｖｅｄｉｎｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅａｎｄｔｈｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｗｅｒｅ ｆｒｅｓｈｌｙｍａｄｅｂｅｆｏｒｅｅａｃｈｕｓｅ．ＡＤＰｗａｓｐｕｒｃｈａｓｅｄｆｒｏ ｍＦｌｕｋａＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ，ｌｏｔ№２６３１３８３８７ ．Ａｄｒｅｎａｌｉｎｅ（ｌｏｔ№９１０１１８）ａｎｄｔｈｒｏｍｂｉｎ（ｌｏｔ№９２０８ １２）ｗｅｒｅｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙＧｕａｎｇｚｈｏｕＭｉｎｘｉｎａｎｄＺｈｕｈａｉＢｉ ｏｃｈｅｍｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃＦａｃｔｏｒｉｅｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ．Ｔｈｅｙｗｅｒｅｄｉｓｓｏｌｖｅｄｉｎ０２ｍｏｌ·Ｌ－１ｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｕｆｅ ｒｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＰＢＳ，ｐＨ７２）ａｎｄｓｔｏｃｋｅｄａｔ－２０℃．Ｃｏｌａｇｅ ｎｗａｓｍａｄｅｆｒｏｍｒａｂｂｉｔｔｅｎｄｏｎ〔８〕ａｎｄｓｔｏｒｅｄａｔ４℃ｆｏｒ ＜４ｄ．ＰｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎｔｅｓｔＶｅｎｏｕｓｂｌｏｏｄｗａｓｏｂ ｔａｉｎｅｄｂｙｖｅｉｎｐｕｎｃｔｕｒｅｆｒｏｍｈｅａｌｔｈｙｃｏｌｅｇｅｓｔｕｄｅｎ ｔｓｏｆｅｉｔｈｅｒｓｅｘ，ａｇｅｄ２１±２ａ，ｗｈｏｈａｄｔａｋｅｎｎｅｉｔｈｅｒｍ ｅｄｉｃｉｎｅｎｏｒｇｒｅａｓｙｆｏｏｄｆｏｒａｔｌｅａｓｔ２ｗｋ．Ｔｈｅｂｌｏｏｄｓ ａｍｐｌｅｓｗｅｒｅａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｅｄｗｉｔｈ３４％ｓｏｄｉｕｍｃｉｔｒａ ｔｅ（９∶１，ｖｏｌ／ｖｏｌ）ａｎｄｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅｄａｔ１９０×ｇｆｏｒ５ｍｉｎ ｔｏｇｅｔｐｌａｔｅｌｅｔｒｉｃｈｐｌａｓｍａ（ＰＲＰ）．Ｔｈｅｐｒｅｃｉｐｉｔａｔ ｅｗａｓｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅｄａｔ１８００×ｇｆｏｒ１０ｍｉｎｔｏｏｂｔａｉｎｔｈｅｐ ｌａｔｅｌｅｔｐｏｏｒｐｌａｓｍａ（ＰＰＰ）．Ｔｈｅｐｌａｔｅｌｅｔｃｏｕｎｔｉｎｅ ａｃｈＰＲＰｗａｓａｄｊｕｓｔｅｄｔｏ２５×１０１１·Ｌ－１ｂｙｄｉｌｕｔｉｏｎｗｉ ｔｈＰＰＰｆｒｏｍｔｈｅｓａｍｅｓａｍｐｌｅ．ＰＲＰ０２ｍＬｗａｓｐｌａｃｅｄｉｎａ ｃｕｒｖｅｔｔｅａｎｄｓｔｉｒｅｄｗｉｔｈＡＧＶＰＳｏｒｃｏｎｔｒｏｌｓｏｌｕｔｉｏｎ２５μＬａｔ３７℃ｆｏｒ５ｍｉｎ，ｔｈｅｎａｇｇｒｅｇａｔｉｎｇａｇｅｎｔ２５μＬｗａｓａｄｄｅｄ（ｆｉｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ：ＡＤＰ４７μｍｏｌ·Ｌ－１，ａｄｒｅｎａｌｉｎｅ６２μｍｏｌ·Ｌ－１ａｎｄｃｏｌａｇｅｎ４０ｍｇ·Ｌ－１）．Ｔｈｅｐ
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