妥布霉素滴眼液的比色分析法长沙市第一医院易爱纯张顺芝朱兆新妥布霉素是氨基糖甙类抗生素之一 。抗菌谱与庆大霉素近似，对于绿脓杆菌的抗菌作用较庆大霉素强３～５倍，毒性仅为其１／８［ １］。我院从１９９３年至今用妥布霉素滴眼液治疗急、慢性结膜炎，角膜炎，绿脓杆菌引起的眼 部感染等共７５８例，治愈率９３．２％［２］。该滴眼液的含量测定法是采用微生物法。此方法 繁琐、费时、易受条件所限，难以用于生产过程中的质量控制和医院快速分析。作者从硫酸庆大霉 素与碱性酒石酸铜试剂（ＡＣＴ试剂）形成络合物以及硫酸新霉素的比色分析法［３］中受到启发 ，利用妥布霉素与庆大霉素同属由氨基环醇与氨基糖缩合而成的氨基甙类抗生素，化学性质相似［ ４］，均能与ＡＣＴ试剂形成有色的络合物来进行比色分析，通过标准品回收试验，获较满意结果 。１仪器、试剂与药品１．１仪器采用上海光学仪器厂生产的７５３ＢＩ－微机型紫外可见分光光 度计。１．２试剂与药品五水硫酸铜（ＡＲ）系湖南试剂厂生产。四水酒石酸钠钾（ＡＲ）系江苏 镇江胜利试剂厂生产。氢氧化钠（ＡＲ）天津化学试剂厂生产。妥布霉素标准品由中国药品生物制 品检定所提供，批号３４０８９０１，效价８６２ｕ／ｍｇ。２实验条件的选择２．１酒石酸铜试 剂配制把２．５ｇＣｕＳＯ４·５Ｈ２Ｏ和６．０ｇＣ４Ｈ４Ｏ６ＫＮａ·４Ｈ２Ｏ分别溶于２５ ｍｌ蒸馏水中，完全溶解，将两者混匀，边搅边加入１０％ＮａＯＨ溶液近５０ｍｌ，然后移入１ ００ｍｌ容量瓶中，用１０％ＮａＯＨ溶液加至刻度，贮于有色试剂瓶中，室温可放置１月。２． ２波长选择用空白和样品在４００～７００ｎｍ处扫描，选择吸收度差值最大处（即Ａ最大处）为 测定波长。本实验选择５６０ｎｍ为测定波长。２．３稳定性实验本品４０００ｕ／ｍｌ与酒石酸 铜络合物，在５６０ｎｍ波长处分别在５ｍｉｎ，１０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，１ｈ，１．５ｈ，２ ．０ｈ测其吸收度几乎无变化。证明此络合物在２ｈ内是稳定的。３测定方法３．１绘制标准曲线 精密称取妥布霉素标准品适量，加水配成４０５７．４３ｕ／ｍｌ妥布霉素的标准溶液，精密吸取 此标准液０．５，１．０，１．５，２．０，２．５，３．０ｍｌ于６个小烧杯中，然后分别加Ａ ＣＴ试剂１．０ｍｌ，再分别加蒸馏水２．５，２．０，１．５，１．０，０．５，０ｍｌ，在５ ６０ｎｍ处测其吸收度。以蒸馏水水代替妥布霉素按上法操作为空白对照。结果如下：样品号Ｃ（ ｕ／ｍｌ）Ａ值１２０２８．７１０．０２３２４０５７．４３０．０４２３６０８６．１４０． ０６５４８１１４．８６０．０８６５１０１４３．５７０．１０４６１２１７２．２９０．１２ ５把上述结果进行线性回归，其回归方程为Ａ＝１．００９８×１０－５Ｃ＋２．４６６７×１０ －３ｒ＝０．９９９５３．２回收率试验精取妥布霉素标准品０．４７２１ｇ溶于１００ｍｌ容量 瓶中，加蒸馏水水稀释至刻度，分别吸取此溶液０．５，１．０，１．５，２．０，２．５ｍｌ按 上法依次测定吸收度，代入回归方程计算其含量。平均回收率９９．７２％，ＣＶ０．６５％：样 品号吸取量（ｍｌ）每毫升相当单位数每毫升实测单位数回收率１０．５２０３４．７５２０３３ ．４０９９．９３％２１．０４０６９．５０４１０３．９９９８．６４％３１．５６１０４．２ ５６０９３．６１９９．８２％４２．０８１３９．０８１７３．２３１００．４２％５２．５１ ０１７３．７５１０１５３．８２９９．８０％３．３与微生物效价法测定含量对比精密称取３个 不同批号的妥布霉素适量，依前法测定吸收度，用回归方程计算其含量，并与微生物法对照。结果 如下：批号本法测定（ｕ／ｍｌ）微生物法测定（ｕ／ｍｌ）回收率３４０８９０１２６５０．８ ０２６７４．６６１００．９％９５０８０８３０２３．６９３０４１．６１１００．５％９５０ ９０５４０１３．９９３９９３．９２９９．５％对２种方法作配对＃ＦＫｔ＃ＦＳ检验，结果表 明差异无显著性（＃ＦＫＰ＃ＦＳ＞０．５）。３．４样品测定方法拟定精密吸取４％妥布霉素滴 眼液１ｍｌ于小烧杯中，加ＡＣＴ试剂１ｍｌ，蒸馏水２ｍｌ，放置２０ｍｉｎ，以蒸馏水代替妥 布霉素按同样方法操作为空白对照。于５６０ｎｍ波长处测定吸收度，代入回归方程计算含量。４ 讨论从以上实验结果可看出，比色法与微生物法比较，具有操作简单、快速、经济、重现性好等特 点，适应于各医院、药厂、药检所对妥布霉素的快速分析。实验中我们发现酒石酸络合剂的量应尽 量饱和，加入妥布霉素后，摇匀，放置２０ｍｉｎ使之络合完全。测定样品配成３０００～６００ ０ｕ／ｍｌ溶液，结果误差较小。参考文献１陈新谦，金有豫主编．新编药物学．第１３版北京： 人民卫生出版社１９９２，８０２易爱纯，张顺芝，黄艳君，等．妥布霉素滴眼液的制备．中国医 院药学杂志１９９５，１５（增刊）：１８７３陈孝治，黎蒙山，邹蔼珍，等．硫酸新霉素的比色 分析法．湖南制药工业１９９１，２（４）：４２４南京药学院主编．药物分析．北京：人民卫生 出版社１９８６，２１９妥布霉素滴眼液的比色分析法$长沙市第一医院@易爱纯@张顺芝@朱兆 新１陈新谦，金有豫主编．新编药物学．第１３版北京：人民卫生出版社１９９２，８０２易爱纯 ，张顺芝，黄艳君，等．妥布霉素滴眼液的制备．中国医院药学杂志１９９５，１５（增刊）：１ ８７３陈孝治，黎蒙山，邹蔼珍，等．硫酸新霉素的比色分析法．湖南制药工业１９９１，２（４ ）：４２４南京药学院主编．药物分析．北京：人民卫生出版社１９８６，２１９２４南京药学院 主编．药物分析．北京：人民卫生出版社１９８６，２１９妥布霉素滴眼液的比色分析法$长沙市 第一医院@易爱纯@张顺芝@朱兆新１陈新谦，金有豫主编．新编药物学．第１３版北京：人民卫 生出版社１９９２，８０２易爱纯，张顺芝，黄艳君，等．妥布霉素滴眼液的制备．中国医院药学杂志１９９５，１５（增刊）：１８７３陈孝治，黎蒙山，邹蔼珍，等．硫酸新霉素的比色分析法．湖南制药工业１９９１，２（４）：４２４南京药学院主编．药物分析．北京：人民卫生出版社１９８６，２１９
More abstracts about the 妥布霉素滴眼液的比色分析法