“益气活血液”抗衰老作用的实验研究苏州市中医药研究所（２１５００３）江国荣，蒋金元，孙宏 文，欧阳莉敏，任光荣关键词：抗衰老；ＳＯＤ；ＬＰＰ；ＨＯ－Ｐｒｏ；益气活血液益气活血液 源自《医林改错》方补阳还五汤，由生黄芪、全当归、赤芍、川芎、桃仁、红花、地龙等组成［１ ］。具有补气活血，逐瘀通络等功能。本实验选用老龄小鼠，观察了益气活血液对某些衰老指标的 影响，以探讨益气活血液抗衰老作用机制。１材料与方法１．１材料本实验所用昆明种雄性小鼠， 体重２５～３０ｇ，昆明种老年雄性小鼠２０～２１周龄，均由苏州医学院动物中心提供。益气活 血液（每ｍｌ含生药３．２ｇ）由苏州市中医医院制剂室提供，批号为９３０２１３。羟脯氨酸标 准品，ＢＤＨ公司生产。硫代巴比妥酸（ＴＢＡ）、ＡＲ级，四乙氧基丙烷（ＴＥＰ）、ＡＲ级， 均购自上海化学试剂商店。７２１分光光度计，上海第三分析仪器厂生产。１．２方法取老年小鼠 ３０只，随机分成３组，每组１０只，分别灌服益气活血液６４ｇ／ｋｇ、３２／ｋｇ、生理盐水 ０．５ｍｌ／只，连续１个月。于末次给药后２小时眼眶采血，用于测定ＳＯＤ和ＬＰＯ，处死小 鼠后取尾腱测定ＨＯ－Ｐｒｏ含量。１．２．１红细胞ＳＯＤ活力测定取血样一滴，加入含生理盐 水的小尖塑管，离心并洗涤，弃上清得红细胞，以冷双蒸水溶血，标本分２份，一份比色法测Ｈｂ 量，另一份依次加入冷双蒸水、冷乙醇、冷氯仿抽提ＡＯＤ后，按文献［２］法于１６０ｎｍ比色 测定。１．２．２血清ＬＰＯ含量测定参照文献［３］，将血清加三氯醋酸、ＴＢＡ于沸水溶３０ 分钟，冷却后，加正丁醇抽提显色，高心取上层液，于５３５ｎｍ比色，以ＴＥＰ为标准，以产生 丙二醛含量来计算ＬＰＯ值。１．２．３尾腱ＨＯ－Ｐｒｏ含量测定参照文献［４］，将小鼠尾腱 经水漂洗，丙酮／乙醚脱脂后，于１０５℃烘干，加浓盐酸于１３０℃水解，并蒸干。样品再溶于 水，加入氯胺Ｔ、过氯酸、１０％对二甲氨基苯甲醛，６０℃水浴２０分钟后，于５６０ｎｍ比色 ，以标准ＨＯ－Ｐｒｏ制作标准曲线，求得样品ＨＯ－Ｐｒｏ值。１．２．４小鼠耐力测定将２４ 只小鼠随机分成２组，每组１２只，分别灌服益气活血液３２／ｋｇ、生理盐水０．５ｍｌ／只， 连续１０天，于末次给药２小时后对小鼠注行耐力测定。小鼠负重１５％体重后，于深６ｋｍ，水 温２２℃的水中游泳，以小鼠沉入水底不再浮为指标，测定游泳时间。２结果２．１益气活血液对 老年小鼠红细胞ＳＯＤ、血清ＬＰＯ、尾胰ＨＯ－Ｐｒｏ含量的影响益气活血液能提高老年小鼠红 细胞内ＳＯＤ活力，同时降低血清中ＬＰＯ含量，大小剂量组与生理盐水组比较均有极明显差异。 大剂量组益气活血液（６４ｇ／ｋｇ）能增加老年小鼠尾腱ＨＯ－Ｐｒｏ含量，与生理盐水组比较 Ｐ＜０．０５，见表１。２．２益气活血液对小鼠游泳时间的影响益气活血液能明显延长小鼠负重 游泳时间，增强小鼠的耐力，与生理盐水组比Ｐ＜０．０５，见表２。３讨论人体衰老是一系列生 理病理过程综合作用的结果，其机制极为复杂，西医有多种衰老机制学说。自由基学说认为［５］ 自由基及其产物的积累毒害作用可能是衰老的主要原因。益气活血液可明显减少老龄小鼠血清ＬＰ Ｏ水平，提高红细胞内ＳＯＤ活性。ＳＯＤ是体内重要的抗氧化酶，可以清除自由基对机体的毒害 作用。故本实验提示益气活血液可能增强ＳＯＤ活性来减少体内ＬＰＯ的生成，从而减少疾病发生 和延缓衰老。胶原蛋白是构成结缔组织细胞间质胶原纤维的主要成份，老年人和老年动物胶原蛋白 溶解度随增龄而逐渐降低，胶原蛋白中游离肽或结合肽的羟脯氨酸含量降低［６］，羟脯氨酸和动 物衰老存在着相关性，通过测定羟脯氨酸含量可以检测动物的衰老状况［７］。本实验表明益气活 血液（６４ｇ／ｋｇ）可增加小鼠尾腱羟脯氨酸含量，从而揭示有一定的延缓衰老作用。祖国医学 对人体衰老亦有种种学说。清王清任［１］明确提出：“元气既虚，必不能达于血管，血管无气， 必停留而瘀。”并指出活血药要与补气药同用，其效果更佳。气虚血瘀是一种气虚为本，血瘀为标 的本虚标实证。人到老年，必然元气不足，五脏之气衰退，这是衰老的根源所在。近代国内外对益 气活血液抗衰老作用及其机制方面进行了不少研究［８］，可见气虚和血瘀在机体衰老过程中的重 要作用逐渐受到重视。我们用中西医结合的方法对益气活血液进行了抗衰老的初步实验观察，结果 表明益气活血液能改变某些衰老指标的含量，揭示有一定的抗衰老作用，为中医药抗衰老作用和机 制的进一步研究提供了一定的实验依据。４参考文献｜｜１王清任．医林改错．上海卫生出版社． １９５６；下卷１１２潘建新，等．ＳＯＤ快速测定方法．苏州医学院报１９９２；１２（３）： ２３８３方允中．自由基与酶．北京：科学出版社１９８８；６６１．４李玉瑞．细胞外间质的生 物化学及研究方法．北京：人民卫生出版社１９８８；２２５．ｓＦｒｅｅｍｍａｎＢＡ，ｅｔａ ｌ．ＬａｂＩｎｖｅｓｔ１９８２；４７：４１２６罗光。抗衰老研究进展。生理科学１９８８； ８（２）；６５．７田清涞，等．羟脯氨酸和动物褒老相关性的研究老年学杂志１９９１；１１（ ３）：１６９８王硕仁，等．气血注射液对冠心病患者血小板功能的影响中西医结合杂志１９８７ ；７（１）：１２“益气活血液”抗衰老作用的实验研究@江国荣，蒋金元，孙宏文，欧阳莉敏， 任光荣$苏州市中医药研究所抗衰老；ＳＯＤ；ＬＰＰ；ＨＯ－Ｐｒｏ；益气活血液１王清任．医 林改错．上海卫生出版社．１９５６；下卷１１２潘建新，等．ＳＯＤ快速测定方法．苏州医学院 报１９９２；１２（３）：２３８３方允中．自由基与酶．北京：科学出版社１９８８；６６１． ４李玉瑞．细胞外间质的生物化学及研究方法．北京：人民卫生出版社１９８８；２２５．ｓＦｒ ｅｅｍｍａｎＢＡ，ｅｔａｌ．ＬａｂＩｎｖｅｓｔ１９８２；４７：４１２６罗光。抗衰老研究 进展。生理科学１９８８；８（２）；６５．７田清涞，等．羟脯氨酸和动物褒老相关性的研究老 年学杂志１９９１；１１（３）：１６９８王硕仁，等．气血注射液对冠心病患者血小板功能的影 响中西医结合杂志１９８７；７（１）：１２２６罗光。抗衰老研究进展。生理科学１９８８；８ （２）；６５．７田清涞，等．羟脯氨酸和动物褒老相关性的研究老年学杂志１９９１；１１（３ ）：１６９８王硕仁，等．气血注射液对冠心病患者血小板功能的影响中西医结合杂志１９８７； ７（１）：１２“益气活血液”抗衰老作用的实验研究@江国荣，蒋金元，孙宏文，欧阳莉敏，任 光荣$苏州市中医药研究所抗衰老；ＳＯＤ；ＬＰＰ；ＨＯ－Ｐｒｏ；益气活血液１王清任．医林 改错．上海卫生出版社．１９５６；下卷１１２潘建新，等．ＳＯＤ快速测定方法．苏州医学院报 １９９２；１２（３）：２３８３方允中．自由基与酶．北京：科学出版社１９８８；６６１．４ 李玉瑞．细胞外间质的生物化学及研究方法．北京：人民卫生出版社１９８８；２２５．ｓＦｒｅ ｅｍｍａｎＢＡ，ｅｔａｌ．ＬａｂＩｎｖｅｓｔ１９８２；４７：４１２６罗光。抗衰老研究进展。生理科学１９８８；８（２）；６５．７田清涞，等．羟脯氨酸和动物褒老相关性的研究老年学杂志１９９１；１１（３）：１６９８王硕仁，等．气血注射液对冠心病患者血小板功能的影响中西医结合杂志１９８７；７（１）：１２
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