中药复方中熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量测定张志荣，廖工铁，宋雨清，尹华熙（华西医科大学药 学院成都６１００４１）提要用薄层扫描法对中药复方中熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸测定条件进行了 考察，并参照部颁熊胆粉试行标准进行了含量测定。熊去氧胆酸及鹅去氧胆酸的平均回收率分别为 ９７．２％（ＲＳＤ＝１．２％）和９９．３％（ＲＳＤ＝２．１％）。关键词熊去氧胆酸，鹅去 氧胆酸，薄层扫描法ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＵｒｓｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃＡｃｉｄ ａｎｄＣｈｅｎｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃＡｃｉｄｉｎＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｏ ｍｐｏｕｎｄＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｂｙＴＬＣ－ｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｒｙ￥ＺｈａｎｇＺ ｈｉｒｏｎｇ，ＬｉａｏＧｏｎｇｔｉｅ，ＳｏｎｇＹｕｑｉｎｇａｎｄＹｉｎＨｕａｘｉ（Ｓｃ ｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＷｅｓｔＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＭｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００４１）Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｕｒｓｏｄｅｏ ｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄ（ＵＤＣＡ）ａｎｄｃｈｅｎｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄ（Ｃ ＤＣＡ）ｉｎＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎａｌｃｏｍ－ｐｏｕｎｄｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ｈａｖｅｂｅｅｎｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＴＬＣ－ｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅｄｅｔ ｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓ３７５ｎｍａｎｄｒｅｆｅ－ｒｅｎｃｅｗａ ｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓ７００ｎｍ．ＦｏｒＵＤＣＡｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｗａｓ３． ０￣１５．０μｇａｎｄｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ９７．２％（ＲＳＤ＝１．２％）．ａｎｄｆｏ ｒＣＤＣＡｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｗａｓ４．０￣２０．０μｇａｎｄｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ９９．３％（ＲＳＤ＝２．１％）．Ｋｅｙｗｏｒｄｓｕｒｓｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａ ｃｉｄ；ｃｈｅｎｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄ；ＴＬＣ－ｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｒｙ熊胆 具有镇痉、镇痛、清热、明目和平肝等功效，是一名贵中药。随着引流熊胆技术的发展，熊胆在中 药复方制剂中的应用日渐增加。因此测定中药复方中熊胆的量对制剂的质量控制有重大的意义。已 有一些关于熊胆中熊去氧胆酸（ＵＤＣＡ）和鹅去氧胆酸（ＣＤＣＡ）含量测定的报道￣［１￣７ ］。但关于中药复方制剂中ＵＤＣＡ和ＣＤＣＡ的含量测定则尚未见报道。本文参考熊胆中ＵＤＣ Ａ和ＣＤＣＡ的测定方法，应用薄层扫描法对复方熊胆水进行含量测定。１仪器、药品和试剂薄层 扫描仪（日本岛津ＣＳ－９３０），微量注射器（上海医用激光仪器厂），硅胶Ｇ预制薄层板（青 岛海洋化工厂）。熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸标准品均由中国药品生物制品检定所提供。其他试剂为 分析纯。复方熊胆水自制，主要由黄柏、侧柏叶、白芒、熊胆等８味药组成。２方法与结果２．１ 标准液的制备精称ＵＤＣＡ和ＣＤＣＡ适量混合，用无水乙醇溶解定容为２ｍｌ。浓度为ＵＤＣＡ ２．８３５μｇ／μｌ，ＣＤＣＡ３．８８０μｇ／μｌ。２．２ 薄层层析条件 硅胶Ｇ预制板 ，甲醇立式展开，取出晾干后，于１０５℃活化０．５ｈ，置干燥器内保存备用。展开剂 异辛烷 －异丙醚－冰醋酸－正丁醇－水（１０：５：５：３：１），卧式展开２ｈ，显色剂３０％（Ｖ／ Ｖ）硫酸乙醇溶液喷板，１０５～１１０℃烘１５ｍｉｎ。２．３ 扫描条件 ＵＤＣＡ和ＣＤＣ Ａ均于３７５ｎｍ有最大吸收，在７００ｎｍ吸收最小。故选择３７５ｎｍ为样品测定波长，７０ ０ｎｍ为参比波长，采用反射法锯齿扫描。２．４ 扫描重现性和方法精密度考察 取经展开显色 后的薄层板重复扫描６次，６次扫描斑点面积积分值经统计分析，结果表明ＣＤＣＡ的ＲＳＤ为０ ．２％，ＵＤＣＡ的ＲＳＤ为０．９８％。取薄层板６块，点相同量的样品，经展开显色后，分别 进行扫描测定，ＵＤＣＡ的ＲＳＤ为２．９％；ＣＤＣＡ的ＲＳＤ为２．６％。２．５线性关系考 察分别吸取标准液１，２，３，４，５μｌ点于同一薄层板上，展开，显色，扫描。以点样量（μ ｇ）对色谱峰面积进行回归。结果表明ＵＤＣＡ在３～１５μｇ范围内线性关系良好，Ａ＝３４４ ８４．８＋１３２３３２９Ｃ，ｒ＝０．９９７１；ＣＤＣＡ在４～２０μｇ范围内线性关系良好 ，Ａ＝４５５９８＋８２０４４３Ｃ，ｒ＝０．９９８７。２．６稳定性考察于显色后３０ｍｉｎ 开始，每隔３０ｍｉｎ扫描１次，６次扫描结果ＣＤＣＡ的ＲＳＤ为０．４１％，ＵＤＣＡ的ＲＳ Ｄ为１．８％。２．７ 回收率考察 取供试液６份，分别精密加入标准溶液，混合均匀后点样， 计算回收率，结果见表１。８ 样品测定 样品适量酸化后，滤过，残渣加３０％ＮａＯＨ水解４ ｈ，盐酸调ｐＨ２～３，乙酸乙酯提取４次，合并提取液，蒸干，无水乙醇溶解定容后测定，结果 如表２。３ 讨论中药复方制剂中组分较多，引起ＴＬＣ斑点拖尾，不圆整，以致分不开，本研究 采用直接提取法、反提法、酸化法、酸化反提法和明胶沉淀法进行前处理，力图去除一定量的杂质 ，使含量测定不受其干扰。实验结果，明胶沉淀法和酸化反提法去除杂质效果较好，但前者对ＵＤ ＣＡ和ＣＤＣＡ的提取回收率较低，故本文选择酸化反提法处理中药复方样品。参考文献｜｜［１ ］张启明等．药物分析杂志 １９９０；１０（２）：１０２［２］张穗等．中成药研究 １９８ ８；（３）：３１［３］王芳生等．药学学报 １９８９；２４（５）：３９７［４］谢培山等． 药物分析杂志 １９８１；１（３）：１３７［５］李海生等．药物分析杂志 １９８９；９（５ ）：２８４［６］王杏珍等．药物分析杂志 １９９１；１１（２）：１０４［７］王永金等．沈 阳药学院学报 １９８９；６（３）：１５７中药复方中熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量测定@张 志荣，廖工铁，宋雨清，尹华熙$华西医科大学药学院熊去氧胆酸，鹅去氧胆酸，薄层扫描法用薄 层扫描法对中药复方中熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸测定条件进行了考察，并参照部颁熊胆粉试行标准 进行了含量测定。熊去氧胆酸及鹅去氧胆酸的平均回收率分别为９７．２％（ＲＳＤ＝１．２％） 和９９．３％（ＲＳＤ＝２．１％）。［１］张启明等．药物分析杂志 １９９０；１０（２）： １０２［２］张穗等．中成药研究 １９８８；（３）：３１［３］王芳生等．药学学报 １９８ ９；２４（５）：３９７［４］谢培山等．药物分析杂志 １９８１；１（３）：１３７［５］李 海生等．药物分析杂志 １９８９；９（５）：２８４［６］王杏珍等．药物分析杂志 １９９１ ；１１（２）：１０４［７］王永金等．沈阳药学院学报 １９８９；６（３）：１５７和明胶沉 淀法进行前处理，力图去除一定量的杂质，使含量测定不受其干扰。实验结果，明胶沉淀法和酸化 反提法去除杂质效果较好，但前者对ＵＤＣＡ和ＣＤＣＡ的提取回收率较低，故本文选择酸化反提 法处理中药复方样品。参考文献｜｜［１］张启明等．药物分析杂志 １９９０；１０（２）：１ ０２［２］张穗等．中成药研究 １９８８；（３）：３１［３］王芳生等．药学学报 １９８９ ；２４（５）：３９７［４］谢培山等．药物分析杂志 １９８１；１（３）：１３７［５］李海 生等．药物分析杂志 １９８９；９（５）：２８４［６］王杏珍等．药物分析杂志 １９９１； １１（２）：１０４［７］王永金等．沈阳药学院学报 １９８９；６（３）：１５７中药复方中 熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量测定@张志荣，廖工铁，宋雨清，尹华熙$华西医科大学药学院熊 去氧胆酸，鹅去氧胆酸，薄层扫描法用薄层扫描法对中药复方中熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸测定条件 进行了考察，并参照部颁熊胆粉试行标准进行了含量测定。熊去氧胆酸及鹅去氧胆酸的平均回收率 分别为９７．２％（ＲＳＤ＝１．２％）和９９．３％（ＲＳＤ＝２．１％）。［１］张启明等． 药物分析杂志 １９９０；１０（２）：１０２［２］张穗等．中成药研究 １９８８；（３）： ３１［３］王芳生等．药学学报 １９８９；２４（５）：３９７［４］谢培山等．药物分析杂志 １９８１；１（３）：１３７［５］李海生等．药物分析杂志 １９８９；９（５）：２８４［６］王杏珍等．药物分析杂志 １９９１；１１（２）：１０４［７］王永金等．沈阳药学院学报 １９８９；６（３）：１５７
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