喹诺酮类药物含量测定方法概述于文胜，姜雄平（中国人民解放军总后勤部药检所，北京１０００７ １）摘要对喹诺酮类药物１１种含量测定方法进行了综述，并对相关因素作了讨论。关键词喹诺酮 类药物；测定喹诺酮类药物的含量测定方法是基于其化学性质、偶极离子（ｄｉｐｏｌａｒｉｏｎ ）性、共轭性和易络合性。１非水滴定法喹诺酮类含有机胺结构，属于弱碱。Ｂａｒａｚａ等［１ ］首先用高氯酸非水滴定法测定诺氟沙星（ＮＦＬＸ），后亦成为我国药典方法。大部分喹诺酮类 药物均可用此法测含量，其特点是简便、准确，但测试样品用量大。少数的喹诺酮甲磺酸盐或对甲 苯磺酸盐，则可用ＮａＯＨ标准液滴定，但酸碱滴定法文献报道很少。多种分析方法［２］的研究 证实，高湿度条件下，ＮＦＬＸ易吸收水分生成水合物，达１０％后吸湿减慢，故应注意吸湿因素 对测定结果的影响。２分光光度法２．１酸碱成盐法偶极性喹诺酮类药物难溶干水，但可溶于稀酸 或碱中成盐，且短时间内不会引起共轭系统破坏。碱性盐溶液稳定性可能低于酸性盐溶液，这与喹 诺酮类的光敏性有关。
喹诺酮３－位碳上的羧基构成β－酮酸，在酸性介质中加热容易脱羧［３］ ，故定量分析中加热溶解应适度。在一定浓度范围内以分光光度法测试，应用很广。部分此类药物 光学特性见表１。２．２ 络合法喹诺酮类药物７－位哌嗪基上的仲胺基是比较强的电子给予体， 可与电子受体化合物或过渡金属离子反应形成络合物。若络合物溶液较为稳定，应有固定的紫外或 荧光吸收指数（λ，Ｅ）。用Ｆｅ３＋可分别与ＮＦＬＸ、培氟表１喹诺酮类药物的光学特性表２ ＨＰＬＣ法测定喹诺酮类药物沙星（ＰＦＬＸ）、环丙沙星（ＣＰＦＸ）和氧氟沙星（ＯＦＬＸ） 形成络合物［１４～１７］。络合能力与喹诺酮的空间结构及电子给予力有关。这种能力和溶液的 酸碱性同样影响络合物的稳定性，荷移络合物（ＣＴＣ）［１８］有三种形式，其中含氮有机物可 作为电子给予体与有机受体作用。四氯对苯醌［１９］、对苯醌［２０］分别与ＮＦＬＸ形成１： １
络合物，有机助溶剂对络合物稳定性有一定影响。３－甲基苯并噻唑啉酮－２腙氢氯化物［２１ ］在硫酸高铈铵溶液中，因空间障碍，与ＮＦＬＸ保温一段时间方可生成稳定的络合物。络合物稳 定时间较短，测定时间要适当选择。３ 高效液相色谱法ＨＰＬＣ法应用范围最广，对各种剂型的 测定、合成反应的监测、药物动力学研究等均取得满意结果。部分研究报道见表２。由表可见，Ｈ ＰＬＣ法可测定各种制剂及体液中的喹诺酮类药物。经处理，可分析微量组成。色谱柱固定相颗粒 度为５～１０μｍ。为防止缩短柱的寿命，流动相多为ｐＨ＞２．０的酸性介质，亦有流动相其中 采用的缓冲液ｐＨ为７．０［３６］，但稀释后仍为弱酸性。蛋白需离心滤除。流速多为１～２ｍ ｌ／ｍｉｎ。检测方式与喹诺酮类药物结构有关。线性范围与药物组成有关。参数Ｋ＇在等电点时 最大［３７］。４ 气相色谱法本类药物较少选用气相法分析，因其熔点高，极性大，气化时易分 解并被吸附。一般必需进行化学修饰，以提高其挥发性及气相色谱条件丁的稳定性，故较ＨＰＬＣ 法繁琐。西诺沙星（ＮＸＣ）与五氟苄基溴反应［３８］成酯后用ＣｈｒｏｍｏｓｏｒｂＷＡＷＤ ＭＣＳ柱分析，总回收率１００．８±３．４％，据参比溶液计算，衍生化率为９４％。５ Ｇｒ ａｎ电位滴定法喹诺酮类属弱酸弱碱，可以０．２ｍｏｌ／ＬＫＣｌ溶液作离子强度调节剂，用Ｎ ａＯＨ标准液滴定ＮＦＬＸ［３９］。分步加入滴定剂，测定其ｐＨ值，以Ｇｒａｎ函数对滴定体 积作图，以直线外推法求滴定终点。由于供试药不溶于水，要注意用酸碱及时处理电极，防止电极 钝化。６ 沉淀回滴法在酸性条件下，ＮＦＬＸ与四苯硼钠以１：１定量生成沉淀［４０］。可采 用中国药典１９９０年版方法，以溴酚蓝为指示剂，用烃铵盐标准液回滴剩余的四苯硼钠，回收率 为９９．９８％。方法快速、准确。７ 吸附溶出伏安测定法ＯＦＬＸ用０．１ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶 解后［４１］，用水定量稀释，采用静态汞滴电极，以Ｂｒｉｔｔｏｎ－ＲＯｂｉｎｓｏｎ缓冲液 （ｐＨ６０）作支持电解质。特点是线性范围宽，峰电位稳定，准确度高。８ 离子对比色法ＮＦ ＬＸ与溴麝香草酚蓝定量结合生成有色离子对化合物，在４２０ｎｍ有最大吸收［４２］。可用氯 仿提取进行比色测定。９ 差示脉冲极谱与单扫描示波极谱ＮＦＬＸ在０．１ｍｏｌ／ＬＫＣｌ溶 液中，在滴汞电极上产生还原反应［４３，４４］，出现还原峰。整个图谱可在一滴汞上短时间扫 描完成，滴汞间隔与差示脉冲振幅可影响测定结果。反应原理是在阴极一分子ＮＦＬＸ与氢离子， 电子（２Ｈ＋＋２ｅ）反应，使羰基还原为羟基。１０ 差示电位扫描（ＤＳＰ）法ＤＳＰ以酸碱 滴定中溶液电极电位的变化为基础，适用于弱酸弱碱性药物的含量测定。通过绘制Ｒ、ＤＳＰ及标 准曲线，用梯形法计算ＤＳＰ图面积，可得浓度－面积直线方程测ＮＦＬＸ含量［４５］。要注意 酸度计的稳定性。１１ 微生物测定法采用微生物测定法，可利用混合正交设计，找出最佳培养基 配方和缓冲液［４６］。此法常用于新药（如ＩＭＢ－８６００１）的抗菌活性与抗菌谱研究。小 结非水滴定法和沉淀回滴定法为传统的容量分析法，测试操作简便，但随着研究的深入，用者渐少 。分光光度法简便快速，仍是目前最常用的方法之一。电位滴定法、伏安法、脉冲极谱和示波极谱 法、电位扫描法均是从物理化学角度进行研究，尚难推广。微生物法针对抗微生物药物，无论是创 制全新化合物，还是引进国外药物，均是研究中必需的一个检定环节。离子对比色法则测定误差较 大。ＨＰＬＣ法科学性最强，将逐渐取代多数其它测定法（无共轭系统的化合物除外），成为最常 用的含量测定方法。随着喹诺酮类新药开发的不断深入，将会有更多分析测定方法被研究和应用。 参考文献｜｜１ＢａｒａｚａＡＭＣ，ＫｏｒｏｌｋｏｖａｓＡ，ＲｅｖＦａｒｍＢｉｏ－ｑｕｉ ｍＵｎｉｖＳａｏＰａｕｌｏ，１９８５；２１（２）：１４１２侯美琴等。中国药学杂志，１９ ８９；２４（９）：５３６３李芸等。中国药科大学学很，１９９３；２４（１）：３３４杨锐等 ．中国抗生素杂志，１９９１；１６（６）：４３４５钟惠平等。中国医院药学杂志，１９９０； １０（１）：２８６刘怡芬，张良志。中国药学杂志，１９９２；２７（１０）：５９１７杨光等 。中国医院药学杂志，１９９２；１２（８）：３６１８申庆亮。中国医院药学杂志，１９９０； １０（３）：１２３９梁艺英等。华西药学杂志，１９９１；６（３）：１７５１０靳建中。药物 分析杂志，１９９０；１０（６）：３６２１１买尔旦。药物分析杂志，１９９１；１１（１）： ５３１２魏长林，宋曼波。药物分析杂志，１９８９；９（６）：３６２１３钟惠平等。
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