固体碘伏对甲、乙型肝炎病毒抗原灭活效果及影响因素观察蒋兆英，何长福，许文炯，雍延平南京市 卫生防疫站２１０００３提要试验结果表明，含有效碘８００ＰＰＭ固体碘伏溶液，在室温２２℃ 作用２ｍｉｎ，可将甲肝抗原全部灭活，
乙肝表面抗原２０００ＰＰＭ＋室温２４℃作用３０ｍｉ ｎ，灭活率为９３．７５％。升高温度，降低ｐＨ，提高消毒液浓度可增强乙肝病毒表面抗原的灭 活作用，而延长作用时间，增强灭活效果不明显。关键词固体碘伏，甲型肝炎病毒抗原，乙型肝炎 病毒表面抗原国内过去研制的多为液体碘伏，其有效碘含量低，稳定性差。近年南京大学采用干燥 技术制成固体碘伏，该消毒剂毒性低，对细菌繁殖体和芽胞具有良好的杀灭作用［１］．但对病毒 的灭活效果还未见报道。为此，我们用细胞培养甲肝病毒抗原（ＨＡＡｇ）和血清中乙肝病毒表面 抗原（ＨＢｓＡｇ）进行了灭活效果观察，并对影响ＨＢ－ｓＡｇ灭活效果的有关因素作了探讨， 现将结果报告如下。１材料与方法１．１材料固体碘伏（Ⅲ型）：由南京大学化学系提供，是一种 以表面活性剂为载体和增溶的不定型络合碘。其外观为深棕色粉末。载体为聚乙烯毗咯酮（ＰＶＰ ），含有效碘为２０％。甲型肝炎病毒抗原：南京军区医学研究所制备的细胞培养甲型肝炎病毒抗 原，滴度：１：６４。乙型肝炎病毒表面抗原阳性血清：南京市传染病医院检验科惠赠，滴度１： ６５５３６（Ｚ１６）。甲型肝炎病毒抗原试剂测定盒（ＥＩＡ）：南京军区医学研究所生产，批 号：９３０６１２。ＨＢｓＡｇ诊断血球及血球稀释液：上海实业科华生物技术有限公司生产，批 号：９３０３２０。中和剂：１％硫代硫酸钠。缓冲盐水：ｐＨ７．２ＰＢＳ１．２方法ＨＡＡｇ 灭活方法：采用悬浮试验定性法。试验时，在４００μｌ不同浓度碘伏溶液中分别加入ＨＡＡｇ原 液１００μｌ，室温２２℃条件下作用至规定时间，加入等量中和剂，中和１０ｍｉｎ后取样，用 ＥＩＡ法检测甲肝抗原灭活程度。试验同时设有ＨＡＡｇ阳性和阴性及消毒液本身对照。结果以目 测判断，颜色呈棕黄色为阳性（），说明ＨＡＡｇ未灭活，呈无色为阴性（），ＨＡＡｇ被灭活。 ＨＢｓＡｇ灭活方法：采用悬浮试验定量法。试验时，在４００μ不同碘伏溶液中分别加入ＨＢｓ Ａｇ阳性血清（滴度为１：４０９６）１００μｌ，室温２４℃条件下作用至规定时间，加入等量 中和剂，中和３０ｍｉｎ后取上清液，用反向被动血凝法（ＲＰＨＡ）检测ＨＢｓＡｇ滴度，计算 灭活率。试验同时设有ＨＢｓＡｇ阳性和阴性及消毒液本身对照。如果消毒液本身对照出现非特异 性凝集，计算灭活率时，试验组每份样品滴度应减去非特异性凝集滴度后方可代入公式进行计算。 ２结果２．１灭活效果试验结果表明，含有效碘８００ＰＰＭ（０．０８％）的固体碘伏溶液，在 室温２２℃作用２ｍｉｎＨＡＡｇ全被灭活（见表１）。对血清中ＨＢｓＡｇ的灭活，在２０００ ＰＰＭ（０．２％）浓度时，室温２４℃作用３０ｍｉｎ灭活率为９３．７５％，２ｈ为９６．８ ８％（见表２）南京大学化学系２．２影响因素的作用温度：用含１０００ＰＰＭ（０．１％）有 效碘的消毒液，分别放在０、１０℃冰箱内和２０、３０、４０、５０Ｃ水浴中对血清中ＨＢｓＡ ｇ滴度１：４０９６）作用３０ｍｉｎ。结果表明，ＨＢｓＡｇ灭活效果随温度升高而上升。０～ １０℃灭活率为５０％～７５％，２０～４０℃时无变化，均为８７．５０％，５０Ｃ时灭活效果 明显增强（９６．８８％）。ｐＨ：用１０％盐酸或１％无水碳酸钠将含１０００ＰＰＭ，
有效碘 消毒液的ｐＨ分别调至２、４、６、８。在室温２４℃条件下，以上述不同ｐＨ的消毒液对血清中 ＨＢｓＡｇ（１：４０９６）作用３０ｍｉｎ，结果表明，加酸可使灭活效果增强，（ｐＨ２．Ｏ 时为８７．５０％），加碱调至ｐＨ值８时，效果明显下降（５０％）。
消毒液浓度：在室温２４ ℃条件下，含不同有效碘的消毒液对血清中ＨＢｓＡｇ（１：４０９６）作用３０ｍｉｎ。结果表 明，灭活效果随消毒液浓度增加而增强（５００ＰＰＭ灭活率为５０％，１０００ＰＰＭ８７．５ Ｏ％，２０００ ＰＰＭ９３．７５％，４０００ＰＰＭ９６．８８％）。作用时间：在室温２４ ℃条件下，含１０００ＰＰＭ有效碘的消毒液对血清中ＨＢｓＡｇ（１：４０９６）分别作用不同 时间，观察灭活效果变化。结果表明，延长作用时间，提高灭活效果不明显（作用２ｈ灭活率８７ ．５０％，４～８ｈ为９３．７５％，１２ｈ９６．８８％）。３讨论试验结果表明，固体碘伏溶 液对甲型肝炎病毒抗原的灭活效果（８００ＰＰＭ２ｍｉｎ）要优于乙型肝炎病毒表面抗原（２０ ００ＰＰＭ３０ｍｉｎ灭活率为９３．７５％）。作者认为与乙型肝炎病毒对外界有很强抵抗力及 其使用ＨＢｓＡｇ阳性血清所含大量血清蛋白有机物有关。影响因素试验结果可以看出，
固体碘伏 溶液在一定范围内增加消毒液浓度，提高温度，降低ｐＨ值，延长作用时间均可不同程度增强灭活 效果。这些影响规律同碘类消毒剂有关文献报道是一致的［２］。由此也提示我们，化学消毒剂要 达到一定的杀菌效果，不仅取决本身的杀菌能力，而且还受使用方法和外界因素的影响。所以在实 际使用中必须视消毒对象与具体环境，选择最佳消毒方案，方可获得较为满意的消毒效果。４参考 文献｜｜１黄杰，熊剑娟，陈小红，等。国产固体碘伏的毒性研究。中国消毒学杂志，１９９１， ８（４）：２２６２薛广波。实用消毒学。北京：人民军医出版社，１９８６，４０５固体碘伏对 甲、乙型肝炎病毒抗原灭活效果及影响因素观察@蒋兆英，何长福，许文炯，雍延平$南京市卫生 防疫站，南京大学化学系固体碘伏，甲型肝炎病毒抗原，乙型肝炎病毒表面抗原试验结果表明，含 有效碘８００ＰＰＭ固体碘伏溶液，在室温２２℃作用２ｍｉｎ，可将甲肝抗原全部灭活，乙肝表 面抗原２０００ＰＰＭ＋室温２４℃作用３０ｍｉｎ，灭活率为９３．７５％。升高温度，降低ｐ Ｈ，提高消毒液浓度可增强乙肝病毒表面抗原的灭活作用，而延长作用时间，增强灭活效果不明显 。１黄杰，熊剑娟，陈小红，等。国产固体碘伏的毒性研究。中国消毒学杂志，１９９１，８（４ ）：２２６２薛广波。实用消毒学。北京：人民军医出版社，１９８６，４０５是一致的［２］。 由此也提示我们，化学消毒剂要达到一定的杀菌效果，不仅取决本身的杀菌能力，而且还受使用方 法和外界因素的影响。所以在实际使用中必须视消毒对象与具体环境，选择最佳消毒方案，方可获 得较为满意的消毒效果。４参考文献｜｜１黄杰，熊剑娟，陈小红，等。国产固体碘伏的毒性研究 。中国消毒学杂志，１９９１，８（４）：２２６２薛广波。实用消毒学。北京：人民军医出版社 ，１９８６，４０５固体碘伏对甲、乙型肝炎病毒抗原灭活效果及影响因素观察@蒋兆英，何长福 ，许文炯，雍延平$南京市卫生防疫站，南京大学化学系固体碘伏，甲型肝炎病毒抗原，乙型肝炎 病毒表面抗原试验结果表明，含有效碘８００ＰＰＭ固体碘伏溶液，在室温２２℃作用２ｍｉｎ， 可将甲肝抗原全部灭活，乙肝表面抗原２０００ＰＰＭ＋室温２４℃作用３０ｍｉｎ，灭活率为９ ３．７５％。升高温度，降低ｐＨ，提高消毒液浓度可增强乙肝病毒表面抗原的灭活作用，而延长作用时间，增强灭活效果不明显。１黄杰，熊剑娟，陈小红，等。国产固体碘伏的毒性研究。中国消毒学杂志，１９９１，８（４）：２２６２薛广波。实用消毒学。北京：人民军医出版社，１９８６，４０５
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