螺旋藻多糖结构的初步分析曾和平，郭宝江（华南师范大学化学系，广州５１０６３１；华南师范大 学生物技术所，广州５１０６３１）关键词螺旋藻多糖；部分水解；分析螺旋藻多糖是从螺旋藻（ Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎ－ｓｉｓ）中分离纯化的水溶性多糖，它对植物细胞辐射遗传损 伤有防护作用［１］，对核酸内切酶活性和ＤＮＡ修复合成有增强作用［２］，对辐射诱发小鼠Ｐ ＣＥ微核率及白细胞数减少有明显的改善效果［３］，对机体免疫功能有提高作用［４］，对移植 性癌细胞有抑制作用［５］，由于螺旋藻水溶性多糖的显著的生理活性引起了人们对螺旋藻多糖结 构研究的兴趣，螺旋藻多糖的化学研究表明，它是由葡萄糖，木糖和鼠李糖组成［６］，其主链是 葡萄糖以１．３与１．６位连结，关于螺旋藻多糖的精细结构至今无人报道，为此，我们设计了本 实验。１实验部分１．１实验材料与方法高效液相色谱用ＬＣ－６Ａ色谱仪，色谱柱ＨＲＣ－ＮＨ ２（４．６×１５０ｎｍ），流动相为乙睛－水（７５：２５），流量为０．８ｍｌ／ｍｉｎ，示 差检测。ＨＮＭＲ谱使用Ａｍｘ－６００型核磁共振仪测定，Ｄ２Ｏ为溶剂，紫外光谱用日本岛津 ＵＶ－２４０型仪测定。１．２螺旋藻多糖部分水解取纯化的螺旋藻多糖４００ｍｇ，加入到１０ ｍｌ（０．２ｍｏｌ／Ｌ）的硫酸中，于８０℃电磁搅拌３ｈ，加入ＢａＣＯ３中和，离心除沉淀 ，上清液供ＨＰＬＣ使用。１．３螺旋藻多糖部分水解产物的分离螺旋藻多糖部分水解产物经ＨＰ ＬＣ检测后，确知含有部分水解产物，上ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱，用去离子水洗脱，２ｍ ｌ／管收集，用硫酸－蒽酮检测，收集单一峰部分，冷冻干燥得产物。Ａ组分重２５ｍｇ，Ｂ组分 重１５ｍｇ，Ｃ组分重９ｍｇ，Ｄ组分重１６ｍｇ，Ｄ组分微黄色，极易吸潮，其余三个组分较稳 定。２结果与讨论螺旋藻多糖的生理活性与其结构有着密切的关系，但是，多糖的结构研究是一分 困难的，国外大多采用核磁共振技术来解决多糖广东省自然科学基金重点项目，上海有机所生命有 机重点实验室资助项目的问题。使用核磁共振技术研究多糖结构比其它方法有其独到之处，首先， 它不破坏多糖样品，从而可以进行其它方面的测试工作，其次是多糖在溶液条件下进行测定，近似 于多糖在体液条件下的状态，这可以了解多糖在溶液条件下，构型构象对生理活性的影响。然而， 核磁共振技术在测定多糖结构方面，由于多糖分子量大，有一定的粘度，其分辨率低，因此使用核 磁共振技术研究多糖结构一般是将分子量大的降解为小的片断，具有合适分子量的片断使用核磁共 振技术可以获得较多的结构信息。通常多糖酸水解一般只能得到全水解产物。最近，我们将螺旋藻 多糖进行部分水解，考察了水解反应条件，选择性使用了有机酸（甲酸，乙酸和三氟乙酸），无机 酸（盐酸，硫酸）。酸的浓度１．０～０．１ｍｍｏｌ／Ｌ，水解温度在４０～８０℃，水解时间 为２～１１ｈ，水解产物用纸色谱和高效液相色谱检测。以０．２ｍｍｏｌ／Ｌ硫酸溶液，８０℃ 水解３ｈ水解液用ＨＰＬＣ检测，发现在８．０６ｍｉｎ，１１．６９ｍｉｎ，１７．２６ｍｉｎ 和２５．５２ｍｉｎ保留时间出现对称的单峰（见图１）。水解产物经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１０ ０柱分离，以去离子水洗脱，用硫酸－蒽酮检测，收集单一峰，获得了四个组分（分别为Ａ，Ｂ， Ｃ，Ｄ），我们用们ＮＭＲ研究了部分水解产物，发现除了组分Ｄ以外（见附图２），其它三个组 分在ＨＮＭＲ中显示了相同的化学位移值，相同的峰形，异头质子峰也相同。从异头质子峰可以推 测，它们有相同连结方式，它们可能是组成相同，连结方式相同，分子量不同的糖的碎片，这与我 们前报中报导的以葡萄糖为主链的结果相一致，Ｄ组分的结构正在进行深入的研究。致谢：ＨＮＭ Ｒ由中科院上海有机所吴厚铭教授等帮助完成，特此致谢！参考文献｜｜１郭宝江等．
螺旋藻多糖 对植物细胞辐射遗传损伤的防护效应。植物学报，１９９２，３４（１０）：８０９２庞启深等。 螺旋藻多糖对核酸内切酶活性和ＤＮＡ修复复合成的增强作用。遗传学报，１９８８，１５（５） ：３７４３阮继红等，螺旋藻多糖蛋白对辐射诱发小鼠ＰＥＣ微核率对白细胞数的影响．辐射研究 与辐射工艺学报，１９９０，８（４）：２１０４刘力生等。螺旋藻多糖对机体免疫功能的提高作 用及其机理研究。海洋研究，１９９１，６：４４５刘力生等，螺旋藻多糖对移植性癌细胞的抑制 作用及其机理研究。海洋研究，１９９１，５：３３６曾和平等。螺旋藻多糖中单糖组成的色谱研 究。化学研究与应用有机分析专辑，１９９４，３２２ＰｒｉｍａｒｙＳｔｒｃｔｕｒｅＡｎａｌ ｙｓｉｓｏｆＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＳｐｉｒｕｌｉｎａＰｌａｔｅｎｓｉｓ￥ ＺＥＮＧＨｅＰｉｎｇ；ＧＵＯＢａｏｊｉｎｇ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙ ，ＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６３１ ；ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｔｅｃｈ－ｎｏｌｏｇｙ，ｓｏｕｔｈＣｈｉｎａＮｏｒｍａｌ ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＧｕａｎｇＺｈｏｕ５１０６３１）Ａｐｕｒｉｆｉｅｄｗａｔｅｒ－ｓ ｏｌｕｂｌｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＳｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎｓｉｓｗ ａｓｐａｒｔｉａｌｌｙｈｙｄｒｏｌｙｚｅｄｂｙ０．２ｍｍｏｌ／ＬＨ２ＳＯ４ｆｏｒ３ｈａ ｔ８０℃．ＴｈｅｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙＨＰＬＣａｎｄｉｓ ｏｌａｔｅｄｂｙＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００．ＴｈｅＨＮＭＲｓｐｅｃｔｒａｌｄａｔａｉｎ ｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅＡ，Ｂ，Ｃｗｅｒｅａｎａｌｏｇｏｕｓ ．ＫｅｙｗｏｒｄＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＳｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎｓｉ ｓ；ＰａｒｔｉａｌｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓＡｒａｌｙｓｉｓ．螺旋藻多糖结构的初步分析@曾和 平，郭宝江$华南师范大学化学系，华南师范大学生物技术所螺旋藻多糖；部分水解；分析１郭宝 江等．螺旋藻多糖对植物细胞辐射遗传损伤的防护效应。植物学报，１９９２，３４（１０）：８ ０９２庞启深等。螺旋藻多糖对核酸内切酶活性和ＤＮＡ修复复合成的增强作用。遗传学报，１９ ８８，１５（５）：３７４３阮继红等，螺旋藻多糖蛋白对辐射诱发小鼠ＰＥＣ微核率对白细胞数 的影响．辐射研究与辐射工艺学报，１９９０，８（４）：２１０４刘力生等。螺旋藻多糖对机体 免疫功能的提高作用及其机理研究。海洋研究，１９９１，６：４４５刘力生等，螺旋藻多糖对移 植性癌细胞的抑制作用及其机理研究。海洋研究，１９９１，５：３３６曾和平等。螺旋藻多糖中 单糖组成的色谱研究。化学研究与应用有机分析专辑，１９９４，３２２广东省自然科学基金ｏｌ ｏｇｙ，ｓｏｕｔｈＣｈｉｎａＮｏｒｍａｌｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＧｕａｎｇＺｈｏｕ５１０ ６３１）Ａｐｕｒｉｆｉｅｄｗａｔｅｒ－ｓｏｌｕｂｌｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏ ｍＳｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎｓｉｓｗａｓｐａｒｔｉａｌｌｙｈｙｄｒｏｌｙｚｅｄｂｙ ０．２ｍｍｏｌ／ＬＨ２ＳＯ４ｆｏｒ３ｈａｔ８０℃．Ｔｈｅｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓｗｅｒ ｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙＨＰＬＣａｎｄｉｓｏｌａｔｅｄｂｙＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００．Ｔ ｈｅＨＮＭＲｓｐｅｃｔｒａｌｄａｔａｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｈｙｄｒｏｌｙｓａ ｔｅＡ，Ｂ，Ｃｗｅｒｅａｎａｌｏｇｏｕｓ．ＫｅｙｗｏｒｄＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆ ｒｏｍＳｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎｓｉｓ；ＰａｒｔｉａｌｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓＡｒａｌ ｙｓｉｓ．螺旋藻多糖结构的初步分析@曾和平，郭宝江$华南师范大学化学系，华南师范大学生 物技术所螺旋藻多糖；部分水解；分析１郭宝江等．螺旋藻多糖对植物细胞辐射遗传损伤的防护效 应。植物学报，１９９２，３４（１０）：８０９２庞启深等。螺旋藻多糖对核酸内切酶活性和Ｄ ＮＡ修复复合成的增强作用。遗传学报，１９８８，１５（５）：３７４３阮继红等，螺旋藻多糖 蛋白对辐射诱发小鼠ＰＥＣ微核率对白细胞数的影响．辐射研究与辐射工艺学报，１９９０，８（ ４）：２１０４刘力生等。螺旋藻多糖对机体免疫功能的提高作用及其机理研究。海洋研究，１９９１，６：４４５刘力生等，螺旋藻多糖对移植性癌细胞的抑制作用及其机理研究。海洋研究，１９９１，５：３３６曾和平等。螺旋藻多糖中单糖组成的色谱研究。化学研究与应用有机分析专辑，１９９４，３２２广东省自然科学基金
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