香连丸联用ＴＭＰ抗菌作用的实验研究湖北中医学院附属医院（４３００６１）常明向，刘小平，姚 垂宇，马卓，余声文，黄阽云提要本实验采用琼脂稀释法对比研究了香连丸、ＴＭＰ及香连丸联用 ＴＭＰ对５种不同细菌的体外抗菌作用。结果表明：ＴＭＰ对香连丸的抗菌作用具有协同作用。关 键词香连丸，ＴＭＰ，联用，抗菌作用ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＡｎｔｉ ｂａｃｔｅｒｉａｌＥｆｆｅｃｔｏｆＸｉａｎｇｌｉａｎＰｉｌｌＣｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈＴ ＭＰ￥ＣｈａｎｇＭｉｎｇｘｉａｎｇ；ＬｉｕＸｉａｏｐｉｎｇ；ＹａｏＣｈｕｉｙｕ；ＭａＺ ｈｕｏ；ＹｕＳｈｅｎｗｅｎ；ＨｕａｎｇＤｉａｕｙｕｎ／（ＴｈｅＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏ ｓｐｉｔａｌ，ＨｕｂｅｉＣｏｌｌｅｇｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉ ｃｉｎｅ，Ｗｕｈａｎ４３００６１）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅａｇａｒ－ｄｉｌｕｔｉｏｎｍ ｅｔｈｏｄｗａｓａｄｏｐｔｅｄｔｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆ ｅｃｔｓｂｅｔｗｅｅｎＸｉａｎｇｌｉａｎｐｉｌｌ，ＴＭＰａｎｄＸｉａｎｇｌｉａｎｐｉｌ ｌｐｌｕｓＴＭＰ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＴＭＰｈａｄａｓｙｎｅｒｇｉ ｓｔｉｃａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｗｉｔｈＸｉａｎｇｌｉａｎｐｉｌｌｏｎＥ ｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ，Ｂａｃｉｌｌｕｓｐｙｏｃｙａｎｅｕｓ，Ｓｔａｐｈｙｌｏｃ ｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ，ＳｈｉｇｅｌｌａｆｌｅｘｎｅｒｉａｎｄＳ．ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａ ｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｘｉａｎｇｌｉａｎｐｉｌｌ；ＴＭＰ；ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ；ａｎ ｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔ香连丸是由黄连（吴萸炙）及木香组方而成，为治痢名方。 功能清化湿热，行气止痛。主用于湿热内滞大肠所致之下痢脓血、里急后重、腹痛泄泻。本方中黄 连占８０％，为主药，成品药中以黄连素含量高低为本丸质量优劣的重要指标［１］．近年来，体 外实验研究表明，广谱抗菌增效剂ＴＭＰ对黄连素活性具有显著影响［２］临床应用也表明ＴＭＰ 能提高黄连素治疗急性细菌性痢疾的疗效［３］，为了探讨ＴＭＮ对香连丸抗菌活性的影响，我们 采用琼脂稀释法［４］对比研究了香连丸、ＴＭＰ及香连丸联用ＴＭＰ对５种不同细菌的体外抗菌 作用。一、药品及配制１．香连丸：称取香连丸（恩施制药厂生产，批号９１０７１７．９１０２ ２２）两个批号各１２ｇ，碾碎，常规煎煮浓缩成５０ｍｌ。另按《中国药典》香连丸配方称取黄 连８ｇ、木香２ｇ及吴茱萸１ｇ．常规煎煮浓缩成５０ｍｌ。此３种药液按文献方法［５］进行含 量测定，含总生物碱以硫酸黄连素计分别为１４．９５、１５．００、１４．６８（ｍｇ／ｍｌ） 。此３种药液分别取１０ｍｌ浓缩成浸膏状，加入无菌普通肉汤培养基１０ｍｌ．微热使溶，摇匀 即得。２．ＴＭＰ：称取ＴＭＰ１００ｍｇ于试管中，加入无菌普通肉汤培养基１０ｍｌ，微热使 溶，摇匀即得。３．香连丸ＴＭＰ复方：取上述３种香连丸煎剂各１０ｍｌ浓缩成稠状，再加入Ｔ ＭＰ１００ｍｇ及无菌肉汤培养基１０ｍｌ，微热使溶，摇匀即得。二、菌种大肠杆菌、金黄色葡 萄球菌、
绿脓杆菌、福氏痢疾杆菌、志贺氏痢疾杆菌（以上菌种由湖北省药品检验专科学校微生物 教研室提供）。三、实验方法与结果１．无菌试管７排，每排１５管。除每排的第１４管外，其余 各管中均加入无菌普通肉汤培养基５ｍｌ，然后于每排试管的第一管分别加入上述７种供试品药液 ５ｍｌ，混匀，吸出５ｍｌ于第二管中，同法依次稀释至第１３管，混匀后取出５ｍｌ于第１４管 。每排第１４管作无菌阴性对照管，第１５管作无药阳性对照管。然后于各管中加５ｍｌ热无菌肉 蛋白胨琼脂，摇匀，趁热依次倾入同一型号的无菌培养皿中，放置使琼脂冷凝。２．除１４号培养 皿外，１～１５号培养皿分别划分为５个近等的区域，并分别编号，然后在每个区域中分别加入５ 种经１６ｈ培养的各含菌培养液０．０１ｍｌ，３７℃培养１８～２４ｈ，以细菌的生长的有无作 为判断指标，观察细菌培养结果。抗菌效果见附表。附表香连丸、ＴＭＰ及香连丸＋ＴＭＰ的抗菌 效果四、讨论１．实验表明，香连丸Ⅰ和香连丸Ⅱ对实验５种细菌抗菌作用基本一致，两者含总生 物碱以硫酸黄连素计也很相近（分别为１５．００、１４．９５ｍｇ／ｍｌ）。此外，两者配伍Ｔ ＭＰ后抗菌作用也显示一致性，说明香连丸制剂总生物碱与抗菌效果间存在一定的量效关系，提示 以黄连素等生物碱含量作为香连丸质量优劣的指标是有一定科学性的：同时也提示在实验条件固定 的情况下，可以用体外抑菌方法对香连丸制剂进行粗略的定量及药效控制。２．抗菌作用结果表明 ，香连煎剂对大肠杆菌、金葡菌、绿脓杆菌作用与香连丸制剂相近，对福氏痢疾杆菌、志贺氏痢疾 杆菌作用较香连丸制剂强，然而，含量测定表明，香连煎剂与香连丸制剂以硫酸小檗碱计总生物碱 含量相近，这两者之间量效关系的差异表明，香连煎剂与香连丸相比，除小檗碱等生物碱外．可能 还存在其它对福氏及志贺氏痢疾杆菌抗菌活性较强，对大肠杆菌、金葡菌、绿脓杆菌抗菌活性较弱 的物质，此种物质的含量因制剂制备方法不同而异。香连煎剂因直接煎煮制备而含量较高，香连丸 制剂因先制成丸剂，再碾碎煎煮制备，中间环节影响因素多，此种物质损失较大。这一情形表明， 不同制备方法对香连丸组方制剂抗菌活性有一定的影响，尤其是对福氏、志贺氏痢疾杆菌活性影响 较大。３．实验表明，对大肠杆菌、香连丸制剂Ⅰ和Ⅱ及香连煎剂在１：４稀释度时均无抗菌作用 ，而ＴＭＰ在１：６４时仍有抗菌作用，说明ＴＭＰ较之两类香连制剂具有强得多的抗大肠杆菌作 用。此外，两类香连制剂联用ＴＭＰ后抗菌活性均分别较单用时强，然而均比单用ＴＭＰ时弱．说 明，虽然ＴＭＰ客观上增加了两类香连制剂的抗大肠杆菌的作用。但另一方面，香连制剂却拮抗Ｔ ＭＰ抗大肠杆菌作用。对绿脓杆菌，两类香连制剂和ＴＭＰ在１：４稀释度时均无抗菌作用，而与 ＴＭＰ联用后却均出现较强的抗菌活性。对金葡菌、福氏痢疾杆菌，两类香连制剂与ＴＭＰ联用后 抗菌活性增大１６～６４倍。对志贺氏痢疾杆菌，香连丸制剂在１：４稀释度时无抗菌活性，而联 用ＴＭＰ后，抗菌活性显著增强，在１：２５６时仍显示抗菌活性：香连煎剂联用ＴＭＰ后抗菌活 性增大６４倍。以上结果表明，香连丸制剂及香连煎剂联用ＴＭＰ后，对实验的５种细菌抗菌活性 大为增强，说明在本文实验条件下，ＴＭＰ对两类香连制剂抗菌活性具有协同作用。此外，两类香 连制剂联用ＴＭＰ后对大肠杆菌、绿脓杆菌的抗菌作用，表明两者联用客观上增大了香连制剂的抗 菌谱。４．香连丸为治痢名方，临床疗效肯定，然而本实验抗菌作用结果显示两类香连丸制剂对福 氏、志贺氏痢疾杆菌抗菌活性均较弱，这可能与临床使用剂量较大，而本实验所用剂量较小有关， 然而从ＴＭＰ对３种制剂的抗菌协同作用，尤其是对福氏、志贺氏痢疾杆菌的协同作用可以推断， 香连丸联用ＴＭＰ治疗菌痢疗效将更佳，对此有待临床进一步验证。参考文献｜｜［１］卫生部药 典委员会。中华人民共和国药典（一部）．第１版。北京：人民卫生出版社、化学工业出版社，１ ９９０：４７４［２］鲁会侠。中成药１９８９；１１（４）：４２［３］虞爱华。中华传染病杂 志１９８６；４（３）：１７４［４］张绪敏。抗生素微生物效价测定法。第１版。北京：人民卫 生出版社。１９６３：１４［５］刘小平。中药通报１９８７；１２（７）：３３香连丸联用ＴＭ Ｐ抗菌作用的实验研究@常明向，刘小平，姚垂宇，马卓，余声文，黄阽云$湖北中医学院附属医 院香连丸，ＴＭＰ，联用，抗菌作用本实验采用琼脂稀释法对比研究了香连丸、ＴＭＰ及香连丸联 用ＴＭＰ对５种不同细菌的体外抗菌作用。结果表明：ＴＭＰ对香连丸的抗菌作用具有协同作用。 ［１］卫生部药典委员会。中华人民共和国药典（一部）．第１版。北京：人民卫生出版社、化学 工业出版社，１９９０：４７４［２］鲁会侠。中成药１９８９；１１（４）：４２［３］虞爱华 。中华传染病杂志１９８６；４（３）：１７４［４］张绪敏。抗生素微生物效价测定法。第１版 。北京：人民卫生出版社。１９６３：１４［５］刘小平。中药通报１９８７；１２（７）：３３ 连煎剂与香连丸相比，除小檗碱等生物碱外．可能还存在其它对福氏及志贺氏痢疾杆菌抗菌活性较 强，对大肠杆菌、金葡菌、绿脓杆菌抗菌活性较弱的物质，此种物质的含量因制剂制备方法不同而 异。香连煎剂因直接煎煮制备而含量较高，香连丸制剂因先制成丸剂，再碾碎煎煮制备，中间环节 影响因素多，此种物质损失较大。这一情形表明，不同制备方法对香连丸组方制剂抗菌活性有一定 的影响，尤其是对福氏、志贺氏痢疾杆菌活性影响较大。３．实验表明，对大肠杆菌、香连丸制剂 Ⅰ和Ⅱ及香连煎剂在１：４稀释度时均无抗菌作用，而ＴＭＰ在１：６４时仍有抗菌作用，说明Ｔ ＭＰ较之两类香连制剂具有强得多的抗大肠杆菌作用。此外，两类香连制剂联用ＴＭＰ后抗菌活性 均分别较单用时强，然而均比单用ＴＭＰ时弱．说明，虽然ＴＭＰ客观上增加了两类香连制剂的抗 大肠杆菌的作用。但另一方面，香连制剂却拮抗ＴＭＰ抗大肠杆菌作用。对绿脓杆菌，两类香连制 剂和ＴＭＰ在１：４稀释度时均无抗菌作用，而与ＴＭＰ联用后却均出现较强的抗菌活性。对金葡 菌、福氏痢疾杆菌，两类香连制剂与ＴＭＰ联用后抗菌活性增大１６～６４倍。对志贺氏痢疾杆菌 ，香连丸制剂在１：４稀释度时无抗菌活性，而联用ＴＭＰ后，抗菌活性显著增强，在１：２５６ 时仍显示抗菌活性：香连煎剂联用ＴＭＰ后抗菌活性增大６４倍。以上结果表明，香连丸制剂及香连煎剂联用ＴＭＰ后，对实验的５种细菌抗菌活性大为增强，说明在本文实验条件下，ＴＭＰ对两类香连制剂抗菌活性具有协同作用。此外，两类香连制剂联用ＴＭＰ后对大肠杆菌、绿脓杆菌的抗菌作用，表明两者联用客观上增大了香连制剂的抗菌谱。４．香连丸为治痢名方，临床疗效肯定，
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