ＲＥＧＵＬＡＴＩＯＮＯＦＡＮＴＩ－ＳＲＢＣＡＮＴＩＢＯＤＹＰＲＯＤＵＣＴＩＯＮＢＹＯＰＩ ＯＩＤＳＡＮＤＴＨＥＩＲＭＥＣＨＡＮＩＳＭＳＷａｎｇＨｕｉｑｉｎ（王慧琴），ＬｉｎＪｉ ａｙｏｕ（林嘉友）ａｎｄＬｉｕＪｉｎｇｓｈｅｎｇ（刘景生）（Ｄｅｐｔ．ｏｆＰｈａｒｍａ ｃｏｌｏｇｙ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＣＡＭＳ ＆ＰＵＭＣ．Ｂｅｉｊｉｎｇ１００００５）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙｆｏｃｕｓ ｅｄｏｎｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓｏｆｏｐｉｏｉｄｓｏｎｔｈｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｙａｇａｉｎｓｔｓｈｅｅｐｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｉｎｖｉｔｒｏ，Ｉｔｗａ ｓｆｏｕｎｄｔｈａｔｍｏｒｐｈｉｎｅ．ａ－ＣＡＯ，ＤＡＤＬＥ，ＭＥＮＫｗｅｒｅａｂｌｅ ｔｏｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｃａｐａｃｉｔｙｏｆｍｕｒｉｎｅｓｐｌｅｅｎｃｅｌｌｓｔｏｇｅ ｎｅｒａｔｅａｎｔｉｂｏｄｙａｎｄｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅＣ４ａｎｄｃｏｎｖｅｒｓｅｌｙ ．ｄｙｎｏｒｐｈｉｎｗａｓａｂｌｅｔｏｓｔｉｍｕｌａｔｅｔｈｅｃａｐａｃｉｔｙｏｆｍｕ ｒｉｎｅｓｐｌｅｅｎｃｅｌｌｓｔｏｇｅｎｅｒａｔｅａｎｔｉｂｏｄｙａｎｄｌｅｕｋｏｔｒ ｉｅｎｅＣ４．Ｍｏｒｐｈｉｎｅ，ａ－ＣＡＯ，ＭＥＮＫ，ＤＡＤＬＥ，ｄｙｎｏｒｐｈｉｎｄ ｅｃｒｅａｓｅｄｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｃＡＭＰｌｅｖｅｌ，ｉｎｃｒｅａｓｅｄ［Ｃａ （２＋）］ｉａｎｄｃａｌｍｏｄｕｌｉｎａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｗｅｒｅｃ ｏｍｐｌｅｔｅｌｙｂｌｏｃｋｅｄｂｙｎａｌｏｘｏｎｅ，ｔｈｅｓｐｅｃｉｆｉｃｏｐｉｏｉ ｄａｎｔａｇｏｎｉｓｔ．Ｏｕｒｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｏｐｉｏｉｄｓｒｅｇｕ ｌａｔｅｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆａｎｔｉｂｏｄｙｉｎｍｕｒｉｎｅｓｐｌｅｅｎｃｅ ｌｌｓ，ａｎｄａｌｔｅｒｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｃＡＭＰ，［Ｃａ（２＋）］ｉｃａｌｍ ｏｄｕｌｉｎａｃｔｉｖｉｔｙ．ａｎｄｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅＣ４ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｂｙ ｗａｙｏｆｂｉｎｄｉｎｇｔｏｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｐｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒ ｄｓ：ｏｐｉｏｉｄｓ，ａｎｔｉｂｏｄｙ，［Ｃａ￣（２＋）］ｉＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＯ ｐｉｏｉｄｓｈａｖｅｂｅｅｎｆｏｕｎｄｔｏｅｘｅｒｔｐｒｏｆｏｕｎｄｅｆｆｅｃｔｓｏｎ ｉｍｍｕｎｅｓｙｓｔｅｍ．Ｗｙｂｒａｎ，ｅｔａｌ．ｉｎ１９７９ｗａｓｔｈｅｆｉｒｓｔｔ ｏｒｅｐｏｒｔｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｏｐｉｏｉｄｒｅｃｅｐｔｏｒｓｏｎｌｙｍｐｈｏ ｃｙｔｅｓ．Ｉｔｗａｓｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔｏｐｉｏｉｄｐｅｐｔｉｄｅｓ，ａｓｎｅ ｕｒｏ－ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓｏｒｎｅｕｒｏ－ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ，ｗｅｒｅｉｎｖｏ ｌｖｅｄｉｎｔｈｅｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｉｍｍｕｎｅｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｒｅｃｅ ｎｔｌｙ，ｉｔｈａｓｂｅｅｎｓｈｏｗｎｔｈａｔｏｐｉｏｉｄｓａｆｆｅｃｔｖａｒｉｏｕｓ ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔｓｏｆｔｈｅｉｍｍｕｎｅｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｔｈｅｙｃｏｕｌｄｂｅ ｉｍｍｕｎｏｅｎｈａｎｃｉｎｇ，ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅｏｒｗｉｔｈｏｕｔａ ｎｙｅｆｆｅｃｔ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｃａｎｂｅａｌｍｏｓｔｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙａｎｔ ａｇｏｎｉｚｅｄｂｙｎａｌｏｘｏｎｅ．Ｔｈｅｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙｅｆｆｅｃ ｔｏｆｏｐｉｏｉｄｓａｐｐｅａｒｓｔｏｂｅｍｅｄｉａｔｅｄｔｈｒｏｕｇｈｓｐｅｃｉｆｉ ｃｏｐｉｏｉｄｒｅｃｅｐｔｏｒｓｏｎｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ，ｂｕｔｌｉｔｔｌｅａｔｔｅ ｎｔｉｏｎｈａｓｂｅｅｎｇｉｖｅｎｔｏｔｈｅｓｅｃｏｎｄｍｅｓｓｅｎｇｅｒｓｙｓｔｅｍ ｓ（ｃａｌｃｉｕｍ，ｃｙｃｌｉｃｎｕｃｌｅｏｔｉｄｓ，ｐｈｏｓｐｈｏｔｉｄｙｌｉｎｏｓ ｉｔｏｌ，ｅｔｃ．）ａｃｔｉｖａｔｅｄｉｎｔｈｅｔａｒｇｅｔｃｅｌｌｓ．Ｉｎｔｈｅｐｒ ｅｓｅｎｔｓｔｕｄｙ，ｗｅｈａｖｅｆｏｕｎｄｔｈａｔｍｏｒｐｈｉｎｅ，ａ－ＣＡＯ，ＤＡ ＤＬＥ，ＭＥＮＫａｎｄｄｙｎｏｒｐｈｉｎｍｏｄｕｌａｔｅｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｙ，ａｎｄｔｈｉｓｅｆｆｅｃｔｉｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｃｙｔｏｓｏｌｉｃｃ ＡＭＰ，［Ｃａ（２＋）］ｉａｎｄＬＴＣ４．ＭＡＴＥＲＩＡＬＳＡＮＤＭＥＴＨＯＤＳＭｉｃ ｅ．ＭａｌｅａｎｄｆｅｍａｌｅＢａｌｂ／ｃｍｉｃｅ（６－８ｗｅｅｋｓｏｌｄ）ｗｅｒｅｏ ｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｔｈｅＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＧｅｎｅｔｉｃＳｃｉｅｎｃｅｓ．Ｃｈ ｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ．Ｇｕｉｎｅａｐｉｇａｎｄｓｈｅｅｐｒｅｄ ｂｌｏｏｄｃｅｌｌｓ（ＳＲＢＣ）．ｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ａｌＡｎｉｍａｌＣｅｎｔｅｒ，ＣＡＭＳ＆ＰＵＭＣ．Ｒｅａｇｅｎｔｓ：Ｍｏｒｐｈｉｎｅｓ ｕｌｆａｔｅ，ＭＥＮＫ，ＤＡＤＬＥ．Ｆｕｒａ２／ＡＭ（ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍ ｐａｎｙ），ａ－ＣＡＯ［１］（ＳｈａｎｇｈａｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ），Ｄｙｎｏ ｒｐｈｉｎ（１－１３）（Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ），ＮａｌｏｓｏｎｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄ ｅ（ＣＡＭＳ）．ＲＰＭＩ－１６４０ａｎｄＡｇａｒｏｓｅ，（Ｇｉｂｃｏｃｏｍｐａｎｙ）， ＰＯＰＯＰ（ＭｅｒｃｋｃｏｍＲｅｃｅｉｖｅｄｆｏｒｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎＳｅｐ．２４， １９９４．Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ．ｐａｎｙ）．ＬＣＭ（Ｓｈａｎｇｈａｉ ＲｏｎｇＳｈｅｎｇＢｉｏ－ｓｏｌｅｖｅｎｔＦａｃｔｏｒｙ）．ｃＡＭＰｋｉｔ．ＣａＭｋｉ ｔ．ＬＴＣ４ｋｉｔｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｏｕｒｌａｂｏｒａｔｏｒｙ．Ｓｔａｔ ｉｓｔｉｃｓ．Ａｌｌｄａｔａａｒｅｓｈｏｗｎｉｎｍｅａｎ±ＳＥ．ＰａｉｒｅｄＳｔｕｄｅ ｎｔｔｅｓｔｗａｓｕｓｅｄｆｏｒｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅ ｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎｔｈｅｓａｍｅｇｒｏｕｐ．Ｉｍｍｕｎｉｚ ａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｄｕｒｅ：ＳＲＢＣｓｗｅｒｅｗａｓｈｅｄｔｈｒｅｅｔｉｍｅｓｉｎＨ ａｎｋ′ｓｂｕｆｆｅｒａｎｄｃｏｕｎｔｅｄ．ＴｈｅｙｗｅｒｅｔｈｅｎｇｉｖｅｎｔｏＢａ ｌｂ／ｃｍｉｃｅｂｙｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎａｔａｂｏｕｔ５× １０９ｉｎ１ｍｌ．Ｃｅｌｌｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ．Ａｆｔｅｒ４ｄａｙｓｏｆｉｍｍｕｎｉ ｚａｔｉｏｎ，ｔｈｅｍｉｃｅｗｅｒｅｋｉｌｌｅｄｂｙｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｎｅｃｋ ，ａｎｄｓｐｌｅｅｎｗａｓａｓｅｐｔｉｃａｌｌｙｒｅｍｏｖｅｄ．Ｃｅｌｌｓｕｓｐｅｎｓ ｉｏｎｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｇｅｎｔｌｙｐｒｅｓｓｉｎｇｔｈｅｓｐｌｅｅｎａｇａｉ ｎｓｔａｓｔａｉｎｌｅｓｓｓｔｅｅｌｓｅｉｖｅｏｆｍｅｓｈｉｎａｐｅｔｒｉｄｉｓｈｃｏ ｎｔａｉｎｉｎｇ５．０ｍｌＨａｎｋ′ｓｂｕｆｆｅｒ．Ｔｈｅｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｗａｓｔ ｒａｎｓｆｅｒｒｅｄｔｏａ１０ｍｌｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎｔｕｂｅａｎｄａｌｌｏｗ ｅｄｔｏｓｔａｎｄｆｏｒ５ｍｉｎｆｏｒｄｅｂｒｉｓａｎｄｌａｒｇｅｃｅｌｌｃｌｕｍｐｓ ｔｏｓｅｔｔｌｅ．ｔｈｅｎｄｅｃａｎｔｅｄｔｏａｎｏｔｈｅｒ１０ｍｌｔｕｂｅａｎｄｃｅ ｎｔｒｉｆｕｇａｔｅｄａｔ１０００ｒｐｍｆｏｒ１０ｍｉｎ．Ｔｈｅｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ ｗａｓｄｉｓｃａｒｄｅｄ．ｔｈｅｃｅｌｌｓｉｎｔｈｅｓｅｄｉｍｅｎｔｒｅｃｏｎｓｔｉｔ ｕｔｅｄｉｎ１ｍｌｂｕｆｆｅｒ，ｃｏｕｎｔｅｄａｎｄｔｈｅｎａｄｊｕｓｔｅｄｔｏ１．６ ×１０７／ｍｌ．Ｔｈｅｖｉａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｃｅｌｌｓｗｅｒｅ＞９５％ａｓｔｅｓ ｔｅｄｂｙｔｒｙｐｓａｎｂｌｕｅｅｘｃｌｕｓｉｏｎ．Ｐｌａｑｕｅ－ｆｏｒｍｉｎｇｃｅｌ ｌ（ＰＦＣ）ａｓｓａｙ．Ｔｈｅｓｅｃｏｎｄａｒｙｉｎｖｉｔｒｏａｎｔｉｂｏｄｙｒｅｓｐ ｏｎｓｅｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄｆｏｌｌｏｗｉｎｇｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓｏｆＭｉｓｈｅｌｌ ａｎｄＤｕｔｔｏｎ（２，３）．Ｓｐｌｅｅｎｃｅｌｌｓｗｅｒｅｃｏｕｎｔｅｄ，ｃｅｎｔｒ ｉｆｕｇｅｄａｎｄｒｅｓｕｓｐｅｎｄｅｄｉｎ１．６×１０７／ｍｌｏｆＲＰＭＩ１６４０ｍ ｅｄｉａｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ１００ｕ／ｍｌｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ，１００μｇ／ｍｌｓｔｒ ｅｐｔｏｍｙｃｉｎ，２００ｍｍｏｌ／Ｉ，Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅａｎｄ１５％ｆｅｔａｌｂ ｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍ．Ｔｈｅｙｗｅｒｅｔｈｅｎｄｉｓｐｅｎｓｅｄｉｎｔｏｆｌａｔ－ｂｏ ｔｔｏｎ２４ｗｅｌｌ．ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｐｌａｔｅｓ．ＳＲＢＣ，ａｆｔｅｒｗａ ｓｈｉｎｇｔｈｒｅｅｔｉｍｅｓｉｎＲＰＭＩｗｅｒｅａｄｄｅｄａｔ３×１０６ｐｅｒｗｅｌ ｌ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｍｏｒｐｈｉｎｅ，ａ－ＣＡＯ，Ｍ ＥＮＫ，ＤＡＤＬＥａｎｄｄｙｎｏｒｐｈｉｎｗｅｒｅａｄｄｅｄｔｏｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｓ ａｔａｆｉｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ１０（－１２）－１０（－６）ｍｏｌ／Ｌ． Ａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ，ｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄｓａｌｉｎｅｗａｓａｄｄｅｄｔｏｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌｗｅｌｌ．Ｔｈｅｎｓｐｌｅｅｎｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｎｃｕｂａｔｅｄａｔ３ ７℃ｆｏｒ４８ｈｏｕｒｓｉｎ５％ＣＯ２ａｔｍｏｓｐｈｅｒｅ．Ａｆｔｅｒ４８ｈｏｕｒｓｏｆｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ，ｔｈｅｓｐｌｅｅｎｃｅｌｌｓｗｅｒｅｈａｒｖｅｓｔｅｄ，ｗａｓｈｅｄｉｎＨａｎｋ′ｓｂｕｆｆｅｒ，ａｎｄｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｄｉｒｅｃｔＰＦＣｗａｓｑｕａｎｔｉｔａｔｅｄｕｓｉｎｇｈｅｍｏｌｙｔｉｃｐｌａｑｕｅａｓＳａｙ．Ａｓｓａｙ
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