多抗甲素A（a-polyresstin）是西安医科大学方亮教授发明,由西安医科大学、四川 抗菌素工业研究所、西安光华制药厂等单位协作研制的一种新型免疫增强剂。临床治疗再生障碍性 贫血、
白细胞减少症、变应性血管炎及消化性溃疡等5000多例,疗效显著。它还是一种抗癌常 规治疗辅助剂,能减轻放疗、化疗的毒副作用。为了进一步探索多抗甲素的免疫调节机理,我们用 培养鼠J774巨噬细胞株作了观察研究。材料与方法1药物来源及配制原药由西安医科大学基础 部病毒研究室提供。精密称取重量后加蒸馏水溶解,经0.45Pm醋酸纤维素滤器（Corni ngGlassWorks,Corning,NY,USA）过滤,稀释成各种实验需要浓度, 冰箱保存备用。2J774巨噬细胞实验用J774细胞株由AmerlcallTypeC;I lttlreCellectlol。（Rockvi！ie,MD.USA）提供。该细胞来源 于一种鼠网状细胞肉瘤细胞,在改良Du比eccobEagle’s培养基（GIBCO,Gr andInslal。d,NY,USA）加10％热灭活牛犊血清、青霉素（50U/ml）及 链霉素（250mg儿）中生长良好。3实验步骤〕774细胞在37C、5％CO。,湿润环境 下培养3～4d,加Hankb平衡盐溶液（HBSS）采集为细胞悬液,经台盼蓝排除（try panbltl。exclusion）检查,活细胞>90％,细胞浓度调整为2X10’/m l,用96IL微量培养板培养分析。每孔滴细胞悬液100pl。及不同稀释浓度药液10VL ,同一浓度滴3孔为1组,另二组不加药液作对照。每孔再加溶于HBSS内的酵母多糖（zym osan）IO卜！作激发剂,同时加2’7’-二氯氢化荧光素醋酸盐（＊＊＊＊-＊A）10 卜L荧光染色,混匀后置培养板于37C,5％CO。温箱内温育lh,经7610型自动微量荧 光分析仪（CambridgeTechl。ology11。c.Wat。rman,MA,U SA）在波长485士10Ill激发光和530士12.sl。l辐射光下测定荧光强度,以川 对荧光中位（RFI>）丧示之。4统计学处理RFtJty以I上S。‘左示,依Tukeg试 验作差异值单径分析（ANO-500mg几和1000mg仰L时细胞活性明显增VA）,显著 性差异可信度（HSD）P<0.05,强,与对照组比较,分别增强2.02倍和2.07统计 程序用StatgraPhics软件Version5倍,有显著性差异（P<0.05）。剂 量增多或（STSCInc,Rockbille,MD,USA）,制图用减少其增强作用均减 低,剂量过高（3000mg/SigmaPlod软件（JandelScientificC oneL）出现抑制效果。M8d6fs,CA,USA）.结果见附表及附图。可以看出,在药 物浓度附表多抗甲素A对巨噬细胞J774活性的增强作用药物剂量（mg几）01010050 0100020003000Mean土SE327.7土28.9294,0士19.7363 .口土20.5661.口士44.4”676.7土24.7”425.0土46,5gi.0 土14.3（2.02）b（.06）‘ak燃烧强度以RFU表示o土S工）巾括号内数字指与 对照组比较增强倍数。示与对照组比较有显著性差异（Pt0.05）胞、单核细胞）吞噬入侵异 物,处保护机体预800——防感染第一线,并能浸润到感染灶和肿瘤部700F、Al位,参与 清除感染和引起肿瘤破坏的炎症反6。0八」应。在获得性免疫中,巨噬细胞捕捉抗原性异d_人 八g物,加工处理,增强其免疫原性,并将其送达斟一<八1.-.、-,——一.—一二二—。 ··、—、—·—··k。。_I/b相应的T和B淋巴细胞,在引发和调节体液IK40’r八 ,__。。。_—一,———,。—一…、。、。。一xI。尸\1和细胞免疫反应上起重要作用 。因此,能增强二300卜、、们一\J“t-\I巨噬细胞活性的药物必能对机体整个免疫系m 叮\」统起辅助增强作用。‘””Zb」巨噬细胞活性包括其趋化、吞噬、氧化分’‘L=;-- -----------------------＊＊＊＊＊x＊000ffithethet hethethethetaltal解异物的全过程。伴随该氧爆发（。xidativeU1 010050O100020003000’”’”””“““““”“’””““”””—”” “——““’-药物剂量（Pg/ml）btlrst）过程产生光辐射,可借荧光作定量分析, 其荧光强度反映了巨噬细胞的免疫活性。附图多抗甲羹对J774细胞活性的增强作用J774细 胞株“’来源于BALB几小白鼠图中圆点代表相对荧光单位（了土J7）,网织细胞肉瘤,具备 多种正常巨噬细胞功能,。示与对照组比较有著性差异,P<0.05__+_o_O__cH_ ____。_讨论优点是增殖性强,容易培养,很少变异。多抗甲素A是a-溶血性链球菌经深层 我们研究证明多抗甲素能显著增强巨噬培养提炼精制而成的一种糖-肽类物质,主要细胞活性,这 可能是它对自体免疫病及肿瘤成分为甘露糖（87、7％～90.3％）及丝氨酸、发挥防治效应 的作用机理。其增强作用为浓苏氨酸等16种氨基酸,分子量约8000。度依赖性。500ms 几及1000ms几时作用最巨噬细胞是主要兔疫活性细胞之一‘、’,强,高于或低于该浓度增 强效果减低。在自然免疫方面,与其它吞噬细胞（中性白洲3川＊。。g八。时,反而出现抑制。 这提示在临床用药时应优选有效剂量。多抗甲素A对鼠J774巨噬细胞免疫活性的增强作用@贾 泰元$西安市中心医院皮肤科!西安710003@BenjaminH.S.Lau$Depa rtmennt!ofMicrobiology.SchoolofMedicine.Lom aLindaUniversityLomaLinda!CA92354U.S.A多抗甲素A ;;
巨噬细胞;;J774细胞系;;酵母多糖对多抗甲素A对J774巨噬细胞活性的调节作用 作了观察研究。细胞与多抗甲素A共同孵育,加酵母多糖作激发剂,在自动微量荧光分析仪下进行分析。结果显示多抗甲素能增强该细胞的免疫活性。500mg/L和1000mg/L为最佳浓度,增强效果分别达2.02倍和2.07倍。高于或低于该浓度,增强效果减弱,3000mg/L时,出现抑制效应。1Jerry R Rittenhouse,Paul D Lui,Benjamin HS Lau.Chinese Medicinal Herbs Reverse Macrophage Suppression Induced by Urological Tumors.J Urol,1991;146:486
2 Daniel P Stites,John D Stobo,J Vivian Wells.Basic and clinical immunology:Sixth Edition,Los Altos,California;Appleton and Lange,1987:96～105
3 Jeff Tosk,Benjamin HS Lau,Paul Lui,et al.Chemiluminescence in a macrophage cell Line modulated by biological response modifiers.J Leukocyte Biol.1989;46:103Chan Shun International Research Fund for AIDS and Cancer资助课题径嗫辜姿啬茉銮扛孟赴拿庖呋钚浴?00mg/L和1000mg/L为最 佳浓度,增强效果分别达2.02倍和2.07倍。高于或低于该浓度,增强效果减弱,3000mg/L时,出现抑制效应。1Jerry R Rittenhouse,Paul D Lui,Benjamin HS Lau.Chinese Medicinal Herbs Reverse Macrophage Suppression Induced by Urological Tumors.J Urol,1991;146:486
2 Daniel P Stites,John D Stobo,J Vivian Wells.Basic and clinical immunology:Sixth Edition,Los Altos,California;Appleton and Lange,1987:96～105
3 Jeff Tosk,Benjamin HS Lau,Paul Lui,et al.Chemiluminescence in a macrophage cell Line modulated by biological response modifiers.J Leukocyte Biol.1989;46:103Chan Shun International Research Fund for AIDS and Cancer资助课题
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