防风(Radix saposhnikoviae)为伞形科防风属植物防风Saposhnikovia divaricata(Turcz.)Schisch的干燥根。其味辛甘,性温。具有发汗解表 、祛风除湿、止痛的功用。用于感冒头痛,风湿痹痛,风疹瘙痒等症。笔者利用CO2
超临界萃取 技术对防风药材进行了萃取,为了确定防风CO2超临界萃取物的有效性,以阿司匹林为阳性对照 药,对防风CO2超临界萃取物进行了镇痛、解热和抗炎的药效学实验研究。1实验材料1.1实 验动物KM小鼠、Wistar大鼠均来源于黑龙江中医药大学实验动物中心。1.2实验药品阳 性对照药:
阿司匹林(规格:0.3g,生产批号:20030701,由合肥久联制药有限公司 提供);实验药品:乙酸(生产批号:20040226,由天津市津东天正精细化学试剂厂提供 );2,4-二硝基苯酚(生产批号:59-C7-03,由上海试剂三厂提供)。1.3给药样 品的制备将防风原药材6000g低温烘干(不超过50℃),粉碎成粉末,过40~60目筛, 放入萃取池内,依据压力20Mpa、温度55℃、试样量100g(萃取仪容量为1L)、CO2流量10L/h条件萃取。取防风CO2超临界萃取物0.95g,加吐温-800.5ml,加水至100ml,搅拌成乳状液,即得给药样品。2实验方法2.1镇痛实验(扭体 法)<1>取昆明种小白鼠50只,体重18~22g,雄性,将其随机分为5组,每组10只。 即防风CO2萃取物高剂量组0.19g·kg-1·d-1;中剂量组0.095g·kg-1 ·d-1;低剂量组0.0425g·kg-1·d-1;阳性对照组给予阿司匹林0.16g· kg-1·d-1;空白对照组给予等量生理盐水。灌胃给药,每天1次,连续7d。在末次给药 后lh给予各组小鼠腹腔注射,每只浓度为0.6%的乙酸0.2ml,观察注射乙酸后15min内小鼠有无出现扭体反应及记录各鼠的扭体次数。2.2解热试验<1>2.2.12,4-二硝基苯酚溶液的配置:精密称取2,4-二硝基苯酚150mg置于80ml的生理盐水 中,滴加5mol/lNaOH溶液,不断搅拌,待药液澄明变为淡黄色,再加生理盐水至100 ml。2.2.2大鼠50只,雄性,体重180~220g,将其随机分为5组,每组10只。 用水银体温计(口表)测正常体温,每日2次,连续3d。实验日每小时测体温1次,连续3次, 选取体温变动不高于0.3℃者随机分为5组,即防风CO2萃取物高剂量组0.132g·kg -1·d-1;中剂量组0.066g·kg-1·d-1;低剂量组0.033g·kg-1· d-1;阳性对照组给予阿司匹林0.108g·kg-1·d-1;空白对照组给予等量生理盐 水。灌胃给药,每天1次,连续7d。末次给药后1h,每只鼠于背部皮下注射2,4-二硝基苯 酚1ml/100g(15mg/kg),每20min测体温1次,连续测定3h。2.3抗炎 试验(小鼠耳肿胀法)<2>取25~30g昆明种小鼠50只,雄性,随机分为5组,即防风C O2萃取物高剂量组0.19g·kg-1·d-1;中剂量组0.095g·kg-1·d-1 ;低剂量组0.0425g·kg-1·d-1;阳性对照组给予阿司匹林0.625g·kg- 1·d-1;对照组给予等量生理盐水,采用灌胃给药,每天1次,连续7d。末次给药后30m in,在乙醚麻醉下,将二甲苯涂在小鼠左耳前后两面,约涂0.04ml,右耳做对照,4h后 处死小鼠,沿耳廓基线剪下两耳,用9mm直径的打孔器分别在同一部位打下圆耳片,用电子天平 称重,每鼠的左耳片重量减去右耳片重量即为肿胀程度。计算各组肿胀度之均值与标准差,求出给 药组的肿胀抑制率。3实验结果3.1镇痛实验结果见表1。3.2解热实验结果见表2。3.3抗炎实验结果见表3。表1醋酸扭体实验(-x±SD)组别动物数(n)扭体次数(n)高剂量组1028.1±6.26**△中剂量组10 21.7±8.59**△低剂量组10 27.2±11.98*△阳性对照组10 29.4±8.13空白组10 36.3±6.46注:与空白组比较*P<0.05**P<0.01;与阳性对照组比较△P>0.05表2 2,4-二硝基苯酚所致大鼠发热实验(℃)组别动物数不同时间的体温(-x±SD)Omin 20min 50min 80min 120min 150min 180min高剂量组10 37.4±0.35 38.4±0.37△△38.9±0.39**△39.2±0.43*△39.2±0.54*△38.9±0.54*△38.7±0.51**△中剂量组10 37.5±0.32 38.5±0.38△△△39.1±0.63**△39.3±0.68*△△39.3±0.61*△39.0±0.60*△38.8±0.48*△低剂量组10 37.5±0.25 38.4±0.31△△△39.5±0.61*△△△39.6±0.53△△△39.3±0.47*△△38.9±0.48*△38.8±0.46*△阳性对照组10 37.6±0.32 38.0±0.32 38.7±0.34 38.8±0.44 38.9±0.53 38.8±0.45 38.7±0.57空白组10 37.5±0.33 38.6±0.32 40.2±0.60 40.0±0.60 39.8±0.52 39.5±0.52 39.3±0.44注:与空白组比较*P<0.05**P<0.01;与阳性对照组比较△P> 0.05△△P<0.05△△△P<0.01表3抗二甲苯鼠耳肿胀程度(mg)组别动物数肿胀度(-x±SD)高剂量组101.36±0.75*△中剂量组10 1.49±0.66*△低剂量组10 1.63±0.73△阳性对照组10 1.07±0.80空白组10 2.08±0.41注:与空白组比较*P<0.05;与阳性对照组比较△P>0.054讨论4 .1本实验以阿司匹林为阳性对照药,对防风CO2超临界萃取物进行了镇痛、解热和抗炎的药效 学实验研究。结果表明:(1)样品各剂量组均有镇痛作用,差异具有显著性意义(低剂量组P< 0.05、高中剂量组P<0.01)。与阳性对照组比较镇痛效果略优但无显著性差异(P>0 .05)。(2)样品各剂量组对2、4-二硝基苯酚所致大鼠体温升高在给药后50~180m in均有明显解热作用(P<0.05、P<0.01)。与阳性对照组比较,样品各剂量组解热 作用略弱,但样品高中剂量组在50min后、低剂量组在150min后解热作用与阳性对照组 比较无显著性差异(P>0.05)。(3)样品高中剂量组有对抗二甲苯鼠耳肿胀作用,显著差 异(P<0.05),与阳性对照组比较无显著性差异(P>0.05)。从以上结果可以看出样 品具有镇痛、解热、
抗炎作用。在镇痛、抗炎方面与阿可匹林功效相当,在解热方面起效慢于阿司 匹林,且具有量效关系。4.2关于防风的镇痛、解热、抗炎作用的物质基础,文献<3>中报导 的是水提物或醇提物中的升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇;而本实验中的受试药物为CO2超临 界萃取物,主要成分为以人参醇、β-红没药烯为代表的挥发油类,也同样具有镇痛、解热、抗炎 作用。这一结果表明防风的镇痛、解热、抗炎作用是多种化学成分协同作用的总和。4.3本实验 方法为经典的、常用的药效学实验方法,重现性强、结果可靠,为研制以防风为原料的新药提供了科学的依据。防风CO_2超临界萃取物的药效学研究@杨波$黑龙江中医药大学!黑龙江哈尔滨150040
@曹玲$黑龙江中医药大学!黑龙江哈尔滨150040
@王喜军$黑龙江中医药大学!黑龙江哈尔滨150040目的:确定防风CO2超临界萃取物的有 效性。方法:以阿司匹林为阳性对照药,应用扭体法观察注射乙酸后15min内小鼠有无出现扭 体反应及记录各鼠的扭体次数;应用2,4-二硝基苯酚致热法观察大鼠3h内的体温变化;应用 小鼠耳肿胀法观察小鼠耳肿程度。结果:防风CO2超临界萃取物各剂量组均有镇痛作用,差异显 著;对2、4-二硝基苯酚所致大鼠体温升高在给药后50~180min均有明显解热作用;高 中剂量组有对抗二甲苯鼠耳肿胀作用。结论:防风CO2超临界萃取物具有镇痛、解热、抗炎作用 。在镇痛、抗炎方面与阿司匹林功效相当,在解热方面起效慢于阿司匹林,且具有量效关系。防风 ;;超临界萃取;;
药效学<1>薛宝云,李文,李丽,等.防风色原酮甙类成分的药理活性研究
.中国中药杂志2000,(5):297-299.
<2>陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,1993.
<3>李红.防风的化学成分和药理研究概况.北京中医,1998,(5):47-48. 量组在50min后、低剂量组在150min后解热作用与阳性对照组比较无显著性差异(P> 0.05)。(3)样品高中剂量组有对抗二甲苯鼠耳肿胀作用,显著差异(P<0.05),与 阳性对照组比较无显著性差异(P>0.05)。从以上结果可以看出样品具有镇痛、解热、抗炎 作用。在镇痛、抗炎方面与阿可匹林功效相当,在解热方面起效慢于阿司匹林,且具有量效关系。 4.2关于防风的镇痛、解热、抗炎作用的物质基础,文献<3>中报导的是水提物或醇提物中的 升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇;而本实验中的受试药物为CO2超临界萃取物,主要成分为以 人参醇、β-红没药烯为代表的挥发油类,也同样具有镇痛、解热、抗炎作用。这一结果表明防风 的镇痛、解热、抗炎作用是多种化学成分协同作用的总和。4.3本实验方法为经典的、常用的药 效学实验方法,重现性强、结果可靠,为研制以防风为原料的新药提供了科学的依据。防风CO_2超临界萃取物的药效学研究@杨波$黑龙江中医药大学!黑龙江哈尔滨150040
@曹玲$
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