吸收，故检测波长确定为290 nm。 2.3色谱条件及系统适用性试验 色谱柱:Hypersil oDse，:柱(Agilent，250 mm x 4.6 mm，5林m):
流动相:0.05 mol/L磷酸缓冲液一乙睛一甲醇(65:25:10，V/ v/V); 流速:0.8 mL/min:
检测波长:290 nm;柱温:30℃;进样量:20卜L。 在此条件下，理论塔板数按加替沙星峰计算不低于12 000，供试品 与其他物质分离度不小于1.5(峰面积外标法)。色谱图见图l。 墨鬓 寸州口 因协r‘ 卜叫O二 t/min 儿 乙/min 2 4 6 2 46 AB A.空白凝胶溶液B.对照品溶液 图1高效液相色谱图 2.4标准曲线制备 称取66 mg空白凝胶基质6份，分置50 mL量瓶中，再分别精 密加人2，4，6，8，10，12mL加替沙星对照品溶液，用水稀释至刻 度，超声混匀，分别取一定量置5 mL离心管中，以4000;/min转 速离心10 min，取上清液20林L注人色谱仪，记录各溶液中对照品 的峰面积(Y)，将峰面积(Y)对相应的浓度(X)进行回归处理，得回 归方程:Y二217.902 4x+8.8151，;=0.9996(n=3)。结果显示， 表l精密度试验结果(n二5) 精密度 刀51〕 (%) .X. (%) 日内 0.16 0 .61 74 94 2748 住住 加替沙星是第4代氟喳诺酮类抗菌药物，具有抗菌谱广、不良 反应小等特点。卡波姆是水溶性高分子材料，释药快，无油腻性，易 于涂敷，对皮肤及戮膜无刺激性，是局部药物转运系统的优良基质， 有利于药物渗透而发挥治疗作用l’一”。将加替沙星与卡波姆制成亲 水性眼凝胶，可增大勃度，延长药物与眼部的接触时间，有利于药物 吸收。为满足临床需要，笔者研制了加替沙星眼凝胶，并采用高效液 相色谱法(HPLC法)测定眼凝胶中加替沙星的含量，报道如下。 1仪器与试药 Agilent 1 100型高效液相色谱仪(el315BnAn检测器，D1316A 柱温箱，G13llA四元泵，G1322A真空脱气机，Rheodyne7725i手动 进样器，Chemstation工作站):Uv一2201型紫外分光光度计(日本 岛津);TDLso一ZB型离心机(上海安亭科学仪器厂);KQ5zooDB型 数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司); AY120型电子天平 (Shimadzm)加替沙星眼凝胶(0.3%，自制，批号为050328，050329， 050330);加替沙星对照品(重庆莱美药业有限公司，批号为 040103，标示含量为99.6%);
甲醇(色谱纯，天津市西华特种试剂 厂);乙睛(色谱纯，天津四友)。其他试剂为分析纯。 2方法与结果 2.1溶液制备 精密称取于105℃干燥至恒重的加替沙星对照品10.oomg，置 200 mL量瓶中，加适量蒸馏水振摇使溶解，用蒸馏水稀释至刻度， 摇匀即得浓度为50林g/mL的对照品溶液。取凝胶样品1.679(约 相当于加替沙星smg)，精密称定。加蒸馏水使溶解，转人100 mL 量瓶中，加蒸馏水至刻度，精密量取5 mL，置50 mL量瓶中，定容， 即得供试品溶液。取一定量供试品溶液置5 mL离心管中，离心 5 min(400or/min)，取上清液20卜L进样。 2.2检测波长 将加替沙星对照品用水溶解制成浓度为10林g/mL的溶液，于 200一400 nm波长处扫描。结果加替沙星在290 nm波长处有最大 加替沙星浓度在2- 12林g/mL范围内与峰 面积呈良好线性关系。 信噪比值为3时，加替 沙星的最低检测限为 0 .04林g/mL。 2.5精密度试验 按2.4项下方法 制备浓度为2，6， 日间 加入量测得量 (林g/mL)(卜g/mL) 2 1.9730 6 6.0099 10 10.0192 2 1.9907 6 6.0180 10 9.9818 :. 1 .24 0.96 10此/mL的对照品溶液，分别将每一对照品溶液于ld内进样5 次，每次20卜L，连续sd，考察方法的精密度。结果见表1。 2.6稳定性试验 按2.4项下方法制备浓度为6林g/mL的对照品溶液，分别在 12h内每Zh测定1次，考察溶液的稳定性。结果表明，12h内对照 品溶液峰面积基本不变，溶液稳定(尺5刀=0.87%)。 2.7回收率试验 精密称取空白凝胶基质适量，按低、中、高3个量级分别加人 一定量的加替沙表2回收率试验结果 星对照品，按供加入引此/mL)刹得引此/mL)回收荆%)侧%)RSD(%) 试品溶液制备方32·95”986 法制备待测溶54·958299·2 99.7 112 液，依上述色谱-一竺一一一己些竺匕一召鳖二一~—. 条件进行测定，每个浓度平行测定5次。结果见表2。 2.8样品含量测定 按2.1项下方法分别测定3批加替沙星眼凝胶样品，平行测 定5次，结果批号为050328，050329，050330的样品中加替沙星含 量分别为标示量的98.9%，100.2%，101.4%，RSD分别为1.11%， x .02%，0.97%(n=5)。 3讨论 3.，本研究中加替沙星眼凝胶的处方和制备方法已获得国家发 明专利，3)。 3.2试验表明:若流动相中缓冲盐比例过高，则灵敏度降低，拖尾 现象严重;增加乙腊的比例，拖尾现象可明显改善，灵敏度也增加， 但保留时间迅速缩短。在流动相中加人一定比例的甲醇，在拖尾现 象和灵敏度维护不变的情况下，可使保留时间适宜。温度对拖尾现 象及灵敏度影响不大。 3.3加替沙星眼凝胶中含有高分子物质卡波姆，很容易堵塞色谱 柱，并导致流动相中甲醇的挥发，影响测定‘4’。试图利用文献方 法‘，一6’及其他方法除去卡波姆，但效果均不太理想，回收率偏低。试 验过程中发现，若将样品离心后静置48h，回收率则良好，但操作 时间长。为使操作简便，笔者仿照生物样品处理方法，直接采用离 心法，取得了较好效果。 3.4采用HPLc法测定加替沙星眼凝胶的含量，方法可靠、快速、 简便，适用于该制剂的快速分析。高效液相色谱法测定加替沙星眼凝胶的含量@李巧$广东省深圳市第四人民医院!广东 深圳 518033
@李东$暨南大学第二临床医学院!深圳市人民医院,广东 深圳 518020
@聂中越$暨南大学第二临床医学院!深圳市人民医院,广东 深圳 518020
@徐玉红$广东省深圳市第四人民医院!广东 深圳 518033目的:建立测定加替沙星眼凝胶中加替沙星含量的高效液相色谱法。方法:采用Hypersil ODS C18柱(250mm×4．6mm,5μm)为色谱柱,流动相为0．05 mol/L磷酸缓冲液-乙腈-甲醇(65:25:10,V/V/V),检测波长为290 nm。峰面积外标法。结果:加替沙星浓度线性范围为2-12μg/mL,r=0．999 6;平均回收率为99．7％,RSD=1．12％。结论:该法简便、快捷、灵敏,可作为该制剂 含量测定的有效方法。
高效液相色谱法;;加替沙星;;眼凝胶;;
含量测定<1>李东,张雁,陈晓凯,等．加替沙星凝胶滴耳剂的质量控制和稳定性研究
．中国药业,2004,13(8):26．
<2>陈丽娜,李 东,聂中越,等．加替沙星外用凝胶剂的质量标准研究 ．中国药业,2004,13(9):51．
<3>李 东．加替沙星眼凝胶及其制备方法:中国,ZL 2004 10026893．3 ．2005-08-24．
<4>郭炎荣,路玫,张国宏．高效液相色谱法测定左氧氟沙星眼用凝胶 中左氧氟沙星的含量．中国药业,2004,13(12):38．
<5>卢文芸,邹豪,蒋雪涛．氟康唑黏附凝胶的研制．中国药房,2003, 14(10):597．
<6>洪清,袁曦,陈庆伟,等．地冰凝胶的制备与质量控制．中国药 房,2005,16(1):32．苯硬捎美?心法，取得了较好效果。 3.4采用HPLc法测定加替沙星眼凝胶的含量，方法可靠、快速、 简便，适用于该制剂的快速分析。高效液相色谱法测定加替沙星眼凝胶的含量@李巧$广东省深圳市第四人民医院!广东 深圳 518033
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@聂中越$暨南大学第二临床医学院!深圳市人民医院,广东 深圳 518020
@徐玉红$广东省深圳市第四人民医院!广东 深圳 518033目的:建立测定加替沙星眼凝胶中加替沙星含量的高效液相色谱法。方法:采用Hypersil ODS C18柱(250mm×4．6mm,5μm)为色谱柱,流动相为0．05 mol/L磷酸缓冲液-乙腈-甲醇(65:25:10,V/V/V),检测波长为290 nm。峰面积外标法。结果:加替沙星浓度线性范围为2-12μg/mL,r=0．999 6;平均回收率为99．7％,RSD=1．12％。结论:该法简便、快捷、灵敏,可作为该制剂 含量测定的有效方法。高效液相色谱法;;加替沙星;;眼凝胶;;含量测定<1>李东,张雁,陈晓凯,等．加替沙星凝胶滴耳剂的质量控制和稳定性研究．中国药业,2004,13(8):26．
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<3>李 东．加替沙星眼凝胶及其制备方法:中国,ZL 2004 10026893．3 ．2005-08-24．
<4>郭炎荣,路玫,张国宏．高效液相色谱法
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