冠心病心绞痛多由冠状动脉粥样硬化引起,或是在动脉粥样硬化基础上附加血管痉挛。九香气雾剂选 用麝香、冰片为主的9味中药组成,具有开窍、解痉、止痛功能,临床主要用于心绞痛、胸闷气短 、心悸等。该药直接喷射于舌下,药物循经传导,迅速达于心,直接作用于心肌,3min~5m in迅速达到扩张冠状动脉、缓解心肌缺血的作用,临床应用未见明显的副作用。有关该药对大鼠 心肌缺血-再灌注损伤心电图的影响,另有文章报道<1>。本文主要观察九香气雾剂对模型大鼠 生化指标的影响,为临床治疗冠心病心绞痛提供实验依据。1实验材料1·1药物九香气雾剂(以 下简称九香),由郑州市中医院制剂室提供,2g生药/ml,实验时用生理盐水配成所需浓度。 硝酸甘油气雾剂由山东洋泰制药有限公司提供。1·2试剂乌拉坦由上海化学试剂采购供应站提供 。肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(GOT)、丙二醛(MDA) 、超氧化物歧化酶(SOD)、
一氧化氮(NO)测定试剂盒,均由南京建成生物工程研究所提供 。内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)测定试剂盒,均由中国人民解放军总医院科技 开发中心放免研究所提供。1·3仪器动物人工呼吸机(浙江医科大学医学仪器实验厂),722 型分光光度计(上海实验仪器厂),智能型γ计数器(上海原子核研究所)。1·4动物Wist ar大鼠,体重220g~250g,雄性,由河南省中医药研究院实验动物中心提供。2方法2 ·1大鼠心肌缺血-再灌注模型制备<2>大鼠用乌拉坦腹腔注射麻醉(1g/kg),仰卧位固 定,气管插管,接人工呼吸机(呼吸频率60次/min,呼吸量1·5ml/100g)。在左 胸第四肋间处切开胸壁,并沿胸骨左缘2mm处切开第3、4肋骨,切开心包膜后轻轻挤压胸壁, 挤出心脏,用医用无损伤针(3/0)在冠状动脉左前降支下穿一丝线,将带线心脏放入胸腔,待 心电图稳定后,挤出心脏,将一塑料凹管与血管并列结扎于冠状动脉左前降支,使塑料管压迫引起 冠脉闭塞,造成心肌缺血,30min后剪断缝合线取出塑料管,恢复冠脉再灌注45min。2 ·2分组与给药将大鼠随机分为5组,每组10只,
生理盐水(50μl/kg),硝酸甘油(0 ·5mg/kg),九香(0·1、0·067、0·05g生药/kg),于结扎冠脉前2mi n和再灌注前2min各组动物口腔滴入给药1次。2·3指标检测实验结束各组大鼠腹主动脉取 血,按要求分离血清,CPK、LDH、GOT、MDA、SOD、NO均为化学比色法,ET、 CGRP均为放免法。2·4统计学处理计量资料以-x±s表示,组间比较采用t检验。3结果 3·1对心肌缺血-再灌注大鼠血清CPK、LDH及GOT含量的影响九香0·10g能明显降 低心肌缺血-再灌注损伤大鼠血清CPK和GOT含量,与生理盐水比较有统计学差异,对LDH 亦有降低的趋势,但无统计学意义;九香0·067g能明显降低模型大鼠血清CPK含量,与生 理盐水比较有统计学差异,对GOT和LDH亦有降低的趋势,但无统计学意义;九香0·05g 对CPK、LDH及GOT均有降低的趋势,但无统计学意义;硝酸甘油能明显降低CPK、LD H和GOT含量,与生理盐水比较有统计学差异(见表1)。表1九香对心肌缺血-再灌注损伤大鼠血清CPK、LDH、GOT含量的影响(-x±s,n=10)组别剂量(/kg)CPK(U/L)LDH(U/L)GOT(U/L)生理盐水50μl905.5±108.52 839.6±144.17 268.22±82.16硝酸甘油0.5mg 761.7±99.55**676.6±101.49*184.38±49.23*九香0.10g 776.1±74.92**746.5±121.77 194.06±53.36*0.067g 789.7±117.21*794.4±83.55 211.62±36.070.05g 876.1±100.86 780.0±130.76 227.96±58.11注:与生理盐水比较:*P<0·05,**P<0·013·2对心肌 缺血-再灌注大鼠血清SOD、MDA及NO含量的影响九香0·10g能明显升高心肌缺血-再 灌注损伤大鼠血清SOD和NO含量,降低血清MDA含量;九香0·067g能明显增加SOD 活性,降低MDA含量,与生理盐水比较均有统计学差异,NO亦有增加的趋势,但无统计学意义 ;九香0·05g对上述指标均有一定的影响,但无统计学差异;硝酸甘油能明显增加SOD活性 和NO含量,与生理盐水比较有统计学差异,亦有降低MDA含量的趋势,但无统计学意义(见表 2)。表2九香对心肌缺血-再灌注损伤大鼠血清SOD、MDA、NO含量的影响(-x±s, n=10)组别剂量(/kg)SOD(nu/ml)MDA(nmol/ml)NO(μmol/L)生理盐水50μl30.02±8.43 6.25±1.65 6.22±1.52硝酸甘油0.5mg 43.32±12.22*5.38±1.72 8.07±1.61*九香0.10g 42.33±14.79*4.22±1.87*8.14±1.38*0.067g 47.68±19.49*4.41±1.34*7.30±1.580.05g 31.99±8.11 5.61±1.62 7.28±0.94注:与生理盐水比较:*P<0·05表3九香对心肌缺血-再灌注损伤大鼠血 清ET、CGRP含量的影响(-x±s,n=10)组别剂量(/kg)ET(ng/ml)CGRP(ng/ml)生理盐水50·0μl295.71±63.67 47.12±13.55硝酸甘油0.5mg 190.45±71.95**65.29±16.56*九香0.10g 206.07±43.35**72.87±25.62*0.067g 231.19±60.86*59.48±9.20*0.05g 219.91±65.66*60.34±11.54*注:与生理盐水比较:*P<0·05,* *P<0·013·3对心肌缺血-再灌注大鼠血清ET、CGRP含量的影响九香3个剂量和硝 酸甘油均能明显降低心肌缺血-再灌注损伤大鼠血清ET含量,增加血清CGRP含量,与生理盐 水比较均有统计学差异(见表3)。4讨论心肌缺血再灌注时,体内氧自由基聚集,引发膜脂质过 氧化,损伤心肌形态和含巯基的蛋白质和酶,引起钙超载,进而抑制心功能,心肌细胞损伤,细胞 膜通透性增加,细胞内酶大量释放入血液,血清酶(CPK、LDH、GOT)的高低可反映缺血 心肌的损伤程度<3、4>。NO是内皮细胞衍生的内皮舒张因子,可以改善心肌缺血,抗血栓形 成,维持血管血流量及血压的稳定,防止血管重构及粥样硬化的形成。近年来,越来越多的研究表 明,NO在缺血性心血管病的发生、发展和预后等方面均起着非常重要的作用<5>。ET是一种 很强的缩血管生物活性多肽,其合成与释放的程度与血管内皮细胞损伤有关,ET升高可使冠状动 脉痉挛诱发心绞痛。CGRP是目前已知最强的内源性血管活性物质,具有强烈的扩张冠状动脉的 作用,并有增强心肌收缩和增强心输出量的作用。它可激活一氧化氮合酶(NOS)的活性,NO 合成增多<3>。利用结扎冠状动脉左前降支的方法造成大鼠心肌缺血-再灌注损伤,模型大鼠心 肌细胞损伤,细胞膜脂质过氧化,通透性增加,心肌酶大量释放入血液,血管内皮舒张因子NO、 CGRP分泌减少,ET分泌增加。九香气雾剂能明显降低心肌缺血-再灌注损伤大鼠血清CPK 、GOT活性和MDA、ET含量,明显升高血清SOD活性和NO、CGRP含量,说明九香气 雾剂对大鼠心肌缺血-再灌注损伤有明显的保护作用,抑制心肌酶的漏出,减少自由基对心肌的损 伤,保护心肌细胞膜,降低心肌细胞膜通透性和改善血管内皮的功能。九香气雾剂对心肌缺血-再灌注损伤大鼠血液生化指标的影响@于震$中国中医科学院西苑医院!北京100091
@周红艳$河南省中医药研究院!河南郑州450004
@王军$河南省中医药研究院!河南郑州450004
@王玉升$河南省中医药研究院!河南郑州450004
@刘建勋$中国中医科学院西苑医院!北京100091目的:观察九香气雾剂对心肌缺血-再灌注 损伤大鼠血液生化指标的影响。方法:利用结扎冠状动脉左前降支的方法造成大鼠心肌缺血-再灌 注损伤,腹主动脉取血检测相关生化指标。结果:九香气雾剂能明显降低心肌缺血-再灌注损伤大 鼠血清肌酸磷酸激酶、谷草转氨酶活性、丙二醛和内皮素含量,并且能显著升高血清超氧化物歧化 酶活性、一氧化氮和降钙素基因相关肽含量,与生理盐水组比较均有统计学差异。结论:九香气雾 剂具有改善大鼠心肌缺血-再灌注损伤生化指标的作用。九香气雾剂;;心肌缺血-再灌注损伤; ;
大鼠;;生化<1>于震,周红艳,王军,等.九香气雾剂对急性心肌缺血-再灌注损伤大鼠心电图的影响
.中医药学刊,2002,20(5):614,616.
<2>郑富稳,周玉娟,赵学增,等.冠心静胶囊的药效学实验研究.中成药,1999,21(2):80-81.
<3>张赛英,陈大舜,王兴宽.心痛灵对心肌缺血大鼠血清酶、内皮素及降钙素基因相关肽的影响.湖南中医学院学报,2000,20(2):12-13.
<4>Sawanobori T,Hiraoka M.Aconitine-induced delayed after polarizationin frog atrium and guinea pig papillary muscles in presence oflowconcentration of Ca2+.Jap physiol,1987,137:39.
<5>Yao SK,Akhtar S,Charru A,et al.
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