有机氯农药是一类广谱杀虫剂,属于神经毒物和实质脏器毒物,具有化学性质稳定,脂溶性大,残效 期长,易在脂肪体中蓄积,造成慢性中毒,严重危机人体健康<1>。目前除了在作物的生长和贮 存期仍在施用的一些有机氯农药会带来残留外,一些20世纪70年代已经禁止生产的农药因为性 质稳定、不易分解、能长期在水域、土壤和生物体内贮存,加上植物的富集作用,仍可能存在有机 氯农药残留。目前,药材和成药中有机氯农药的检测主要为六六六、滴滴涕及五氯硝基苯等几个品 种,本实验应用毛细管气相色谱-电子捕获检测器分析了6种中药中12种有机氯农药残留量。1仪器与试药日本岛津GC-2010气相色谱仪(包括63Ni电子捕获检测器,class-GC10色谱工作站),DB-1701弹性石英毛细管柱(30m×0 25 mm×0 25μm)。丙酮、二氯甲烷、正己烷均为分析纯,经过全玻璃蒸馏装置重蒸馏,经气相色谱法确认符合农药残留检测的要求;硫酸为优级纯;水为自制M illi-Q高纯水;无水硫酸钠、氯化钠均为分析纯。农药标准品:六六六(zenehexac hloride,BHC),包括α-BHC,β-BHC,-γBHC和-δBHC4种异构体 ;滴滴涕(chloro-ethylene,DDT),包括pp'-DDE,pp'-DDD,pp'-DDT,op'-DDT4种同系物;五氯硝基苯(pentachloronitro-ben,PCNB)均购自国家标 准研究中心,纯度>98%。中草药样品(甘草、菊花、黄芩、紫苑、薄荷、薏米)均为市售。2 实验方法2.1色谱条件进样口温度250℃,检测器温度280℃,柱升温程序为初始温度100℃,以10℃/min升至220℃保持1 m in,以8℃/m in升至250℃保持10 m in;载气为高纯氮(纯度>99.999%),进样量1μL,外标法定量。2.2标准曲线绘制 精密量取α-BHC,β-BHC,γ-BHC、-δBHC、pp′-DDE,pp-′DDD,pp-′DDT,op-′DDT、五氯硝基苯(均为50mg/L)2 mL,分别于50 mL量瓶中,加正己烷己烷溶解,定容,作为对照品储备液。再分别精密吸取上述对照品储备液各5 mL于同一50 mL量瓶中,加正己烷己烷稀释至刻度,得9种有机氯农药的混合标准贮备液。精密吸取上述混合溶液用正己烷己烷逐步稀释成1、5、10、50、100、200μg/L 6个浓度梯度的混合标准液。按上述色谱条件,各取1μL,进样,每份进样2次,以峰面积为纵坐 标,浓度为横坐标,计算其回归方程,见表1。结果表明:在1~200μg/L内呈良好线性。2.3样品溶液的制备<2,3>取样品于60℃干燥4h,粉碎,过4号筛,取2g,精密称定,于100 mL具塞锥形瓶中,加入水20 mL,浸泡过夜后,精密加入丙酮40 mL,称定重量,超声提取30 m in,放冷,再称定重量,加丙酮补足减失的重量。加氯化钠6 g,摇匀,精密加入二氯甲烷30mL,称定重量,超声提取15 m in,放冷,再称定重量,加二氯甲烷补足减失的重量,静置,使分层。分取上层有机相于装有适量无水硫酸钠的具塞锥形瓶中,放置4 h。精密量取35 mL于40℃水浴减压浓缩至近干,加少量正己烷如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净,用正己烷溶解并转移至10 mL具塞刻度离心管中,加正己烷精密稀释至5 mL,小心加入硫酸1 mL,振摇2 m in,离心(3 000 r/m in)10 m in,取上清液,即得。表1 9种有机氯农药的标准曲线Pesticide Regression equation r-αBHC Y=0.048 7X+0.124 6 0.999 1-βBHC Y=0.157 1X+0.024 5 0.998 9-γBHC Y=0.204 8X+0.147 3 0.999 5-δBHC Y=0.009 9X+0.057 9 0.999 2pp'-DDE Y=0.587 1X+0.057 9 0.999 5pp'-DDD Y=0.025 7X+0.047 6 0.999 4pp'-DDT Y=0.375 4X+0.124 7 0.999 0op'-DDT Y=0.008 5X+0.010 6 0.999 5五氯硝基苯Y=0.287 9X+0.104 4 0.999 12.4空白溶液的制备在不加样品的条件下,同2.3项下提取净化方法,制备空白溶液。3结果 3.1空白试验精密量取对照品溶液、样品溶液、空白溶液各1μL分别进样,按色谱条件下操作,结果见图1~3。从以下结果可以看出,空白无干扰。图19种对照品的气相色谱图1α-BHC 2β-BHC 3-γBHC 4-δBHC 5 pp-′DDE 6 pp-′DDD 7pp-′DDT 8 op-′DDT 9五氯硝基苯(下同)图2样品的气相色谱图图3空白样品气相色谱图3.2精密度实验3.2.1仪器精密度实验精密吸取50 ng/mL标准品溶液1μL,重复进样5次,按色谱条件下操作得α-BHC,β-BHC,γ- BHC、-δBHC、pp'-DDE,pp'-DDD,pp'-DDT,op'-DDT、五 氯硝基苯的RSD(%)分别为1.96,1.78,1.05,1.38,1.25,1.11 ,1.48,1.04,1.84。3.2.2方法精密度实验准确称取同一样品5份,按2.3 项条操作,按“2.1”条色谱条件下测定,各农药的RSD(%),分别为2.61,3.06 ,1.87,2.04,1.97,3.21,3.14,3.59,2.47。3.3回收率实 验称取同一样品9份,分高(100μg/L)、中(10μg/L)、低(1μg/L)3种浓 度添加混合标准品溶液,每水平重复3次,混匀,按上述条件提取、净化、测定并计算回收率,结果见表2。表29种有机氯农药的回收率实验结果PepticidesAdded(μg/L)Found(μg/L)Recovery(%)RSD(%)1 0.812 81.2 2.79α-BHC 10 8.068 80.7 3.05100 87.324 87.3 2.541 0.904 90.4 2.41β-BHC 10 9.105 91.1 2.06100 90.872 90.9 3.141 0.888 88.8 2.07-γBHC 10 8.942 89.4 2.51100 80.007 80.0 2.981 0.823 82.3 1.97-δBHC 10 8.133 81.3 3.34100 80.124 80.1 2.721 0.828 82.8 2.78pp'-DDE 10 8.042 80.4 2.89100 83.207 83.2 2.381 0.804 80.4 2.77pp'-DDD 10 8.154 81.5 3.34100 82.156 82.2 3.071 0.816 81.6 3.16pp'-DDT 10 8.219 82.2 2.79100 81.714 81.7 3.061 0.807 80.7 2.44op'-DDT 10 8.329 83.3 3.28100 86.342 86.3 2.371 0.796 79.6 2.51五氯硝基苯10 8.197 82.0 2.09100 8.465 84.7 2.543.4样品的测定准确称量样品(粉碎、混匀),按“2.3项”条下操作测定,每份样品 2次重复,每次进样1μL,用50ng/mL混合标准溶液做随行标准,用外标法定量。结果见 表3。表3样品中有机氯类农药残留量测定(μg/kg)Pepticides甘草菊花黄芩紫 苑薄荷薏米α-BHC——————β-BHC——————γ-BHC——————δ-BHC——————TotalBHC——————pp'-DDE————20.06 20.19pp'-DDD—————10.32pp'-DDT—50.34—30.38 26.34 25.91op'-DDT—10.02——10.21 40.13Total DDT—60.36—30.38 56.61 96.55五氯硝基苯———15.97——4讨论4.1本法所选用的DB-1701弹性石英毛 细管柱,可使9种农药达到基线分离。实验采用2005版药典方法,简化了操作,提高了效率, 减少了损失。用正己烷代替药典中所用的石油醚(60~90℃),可以减少样品测定过程中的杂 质干扰,值得推广应用。4.2进行农药残留分析时,应首先分析随行空白样品,检查溶剂及操作 过程中可能引入的杂质对测定是否有影响。通过扣除基线功能,可有效校正基线,提高测定灵敏度 。所使用氮气的纯度,脱氧管和分子筛应定期检查维护,进样衬管及石英棉应惰性处理(二甲基氯 硅烷DMCS)。4.3对农药进行分析时,一般采用色谱保留时间进行定性,但是中药化学成分 复杂,假阳性情况经常发生,可采用(1)两根不同极性的色谱柱进行比较测试,可有效的防止假 阳性结果的产生;(2)采用GC-MS,通过对碎片离子的分析,可排除假阳性反应。4.4样 品测定的实验结果表明:6种中药中有4种不同程度的受到有机氯农药污染,这就严重影响了使用 的安全性。因此,如何在加工过程中去除有机氯农药及加速环境中有机氯农药的降解是一个值得研 究的课题。气相色谱法测定部分中药中有机氯类农药残留量@沈燕$中国方圆标志委员会浙江中心!浙江杭州310013
@许文祥$正大青春宝药业有限公司!浙江杭州310023目的:对6种中药中9种有机氯农药的 毛细管气相色谱测定方法的研究。方法:采用药典方法提取、硫酸磺化后,采用不分流进样方式, 用DB-1701弹性石英毛细管柱经柱程序升温技术分离,用电子捕获检测器检测,外标法计算含量。结果:高、中、低3种浓
More abstracts about the 气相色谱法测定部分中药中有机氯类农药残留量