酪氨酸蛋白激酶( tyrosine protein kinase,PTKs)是一组酶系,能催化三磷酸腺苷(ATP)中的γ 磷酸基转移到许多重要蛋白质的酪氨酸残基上,使酚羟基磷酸化。PTKs是在正常和异常增殖过程 中起重要作用的癌蛋白和原癌蛋白家族中的成员。多种生长因子受体,包括表皮生长因子(EGF )、血小板源生长因子(PDGF)和胰岛素样生长因子(IGF)的受体以及不少逆转录病毒致癌基因的编码蛋白都具有PTKs活性。受体酪氨酸酶 Ras 有丝分裂素激活蛋白激酶( mitogen activated protein kinase,MAPK)是将外界刺激信号传递到细胞核内的重要途径。它不仅参与激素和生长因子等胞外信息的传递,还和细胞增殖及恶变有关。随着 PTKs研究的深入,人们对探索PTKs抑制剂产生了广泛的兴趣。PTKs途径的激活属于与细胞的生长、增殖和分化有关的信号途径<1>。目前,PTKs 抑制剂主要用于抗肿瘤<2>。在合成 PTKs抑制剂的研究中,针对各种受体和非受体的PTKs药物被认为是很有前途的研究对象,尤其是 EGF 受体蛋白酪氨酸激酶被认为是最有前景的一类抗肿瘤药<3>。研究还发现PTKs的活性与非肿瘤细胞的生理活动有关,许多PTKs 抑制剂能影响正常细胞的功能。研究证实, 较早发现的天然化合物如染料木黄酮(genistein,GST)在防治癌症、降低血脂、妇产 科的激素替代治疗、激素依赖性肿瘤的防治方面有着广阔的应用前景<4>,但对于抗生育方面的 研究较少。本综述介绍PTKs抑制剂在抗生育方面的作用。一、胚胎植入与细胞因子的调节近年的研究表明,与胚胎植入相关的细胞因子有4种:白血病抑制因子(LIF), EGF、集落刺激因子 1(CSF 1)和白细胞介素(IL)等 <5>。在人的子宫内膜中已发现 IL 1Rt I(IL 1 相关受体 I)mRNA的表达,并在黄体期达到最高峰。将IL 1Rα注入小鼠腹腔可以阻断着床, 但缺乏IL 1RtI的转基因小鼠未发现有明显变化。但 IL 1系统在着床中的确切作用尚需深入研究,以确定能否将IL 1Rα或结构改造过的IL 1Rα作为抗着床的手段<6>。缺乏CSF 1 的内交突变系小鼠交配后不发生着床,表明 CSF 1 参与着床调节。通过调节 CSF 1和肿瘤坏死因子 α(TNF α)的平衡来维持着床的正常进行。短期封闭 CSF 1 的作用可以防止着床。母体来源的LIF是小鼠胚胎发育的必须因子,它能促进早期胚胎发育、启动 胚泡植入以及调节蜕膜化的过程<5>。EGF家族可以自分泌或旁分泌的形式调节子宫腔上皮或 基质细胞的增殖分化。这些细胞因子通过自分泌和旁分泌方式,调节子宫内膜的免疫时相和强度< 7>。转化生长因子(TGF)存在于蜕膜细胞、子宫腺体细胞、绒毛及绒毛外细胞滋养细胞中,它能抑制细胞滋养细胞的增殖并促使其分化为无浸润性的体细胞。现认为蜕膜及滋养细胞来源的TGF β对滋养层细胞有抗增殖及抗浸润作用。显然,TGF β也能作为抗着床途径的侯选靶分子之一<6>。诸多细胞因子通过相互诱发,受体表达的相互调控 以及生物学效应的相互影响,构成了子宫内膜免疫微环境中特殊的细胞因子网络。细胞因子对妊娠 具有重要的生物学意义,有学者考虑将细胞因子应用于临床,作为治疗不育、流产、早产的方法或 避孕的手段,并做了大量的基础性的研究工作<7>。现有研究表明,这些细胞因子在围植入期的 表达具有高度的时空特异性:(1)表达高峰和植入窗相吻合,且定位专一;(2)有些仅局限在 胚泡植入位点邻近的子宫内膜上皮细胞或基质细胞。同时,细胞因子的受体表达也有明显的时空特 异性;(3)表达受卵巢雌二醇(E2)或孕酮(P)调节。二、酪氨酸激酶抑制剂的抗着床效应 理论上,抗着床有三种途径:(1)干扰胚泡与子宫内膜的相互识别及相互作用;(2)干扰激素水平,影响子宫内膜发育不能接受胚泡着床;(3)通过免疫学途径造成对胚胎的排斥。1干扰胚泡与子宫内膜的相互识别及相互作用:研究发现,gp130分子是影响胚泡植入的多种细胞 因子共用的受体和信号传导子,目前已知的gp130相关的细胞内信号传导有酪氨酸磷酸化激酶(januskinase, JAK S)和 MAPK 激酶途径。还有学者认为 gp130 相关分子(gp130 associated mole cule,GAM)的表达也可抑制 JAK激酶与 gp130 分子的结合及其磷酸化<8>,但对 gp130 介导的细胞增殖、分化等功能的影响尚不清楚。不同的细胞中存在特异的酪氨酸激酶及各自特异的底物,这可能是共有 gp130 的诸细胞因子在不同细胞中生物作用差异的主要原因之一<9>。已知LIF的生物效应是通过结合靶细胞膜上的LIF受体β亚基,并使之与 IL 6 信号转导子(gp130)形成异源性二聚体,启动细胞内一系列信号分子的活性完成信息从细胞膜至细胞核的传递,使细胞产生一系列生理或病理的变化,故 LIF受体β亚基和 gp130的分子结构与细胞内信号分子的活性以及 LIF 诱导靶细胞的生物反应关系密切。现发现 IL 6、睫状神经生长因子(CNTF)、抑瘤素(OCM)和 LIF都可激活靶细胞内 JAK 2。就 LIF受体而言,LIF诱导的LIF受体β亚基与 gp130 异源性二聚体而激活JAK酶。它是一种非受体型的酪氨酸激酶,可以被许多细胞因子激活,它可能是这些不同的细胞因子受体信号传导途径中的一个共同因素,这种与受体相连的JAK 2 激酶可能因受体结构的不同而催化不同的底物。此外,gp130在LIF、IL 6、IL 11 及 CNTF等刺激后也发生自身的酪氨酸磷酸化。由于gp130的这种共用特性,干扰gp130导 致抗着床的途径有两种:(1)选择性地阻止细胞因子高亲和受体的形成,阻断细胞因子的作用, 但细胞因子在胚胎植入中具体的特异性功能,及局部调节作用尚需进一步研究;(2)直接抑制酪氨酸激酶的活性。PTKs抑制剂的作用主要途径有二,一是直接作用于PTKs,竞争性抑制ATP与PTKs结合或抑制PTKs的活性;另一是作用于 PTKs的合成过程,降低有活性的 PTKs的表达,酪氨酸蛋白残基的磷酸化广泛存在于细胞的各种生理过程中。现已知PTKs抑制 剂不但抑制肿瘤生长,还能调节细胞的多种生理功能。PTKs作为多肽生长因子受体和原癌基因的产物,调节细胞的生长和分化。已发现在子宫内膜组织中有c jun、c fos基因表达,且在胚泡着床前表达明显高于正常内膜。PTKs抑制剂还通过抗细胞增殖来对抗生长因子的作用。这些生长因子包括 PDGF、IGF、血管内皮生长因子(VEGF)、EGF、TGFα,β、酸性或碱性生长因子(aFGF 和bFGF)、TNF 等。因而有可能利用酪氨酸激酶抑制剂干扰着床时蜕膜组织细胞因子信号传导而抗着床,可作为一种 新的避孕方法<6>。近年来对酪氨酸酶抑制剂的研究表明,认为它们具有抗细胞粘附作用。现已 知各种粘附分子在胚泡植入过程中执行重要的生理功能<10>,有助于子宫内膜由非粘附到粘附状态的转变,为胚泡粘附植入作准备。而PTKs抑制剂可拮抗由IL 1 及 TNF α刺激内皮细胞引起细胞内粘附分子 1(ICAM 1)、血管内皮细胞粘附分子 1(VCAM 1)及其 mRNA 的表达,抑制I型胶原蛋白刺激巨噬细胞和单核细胞引起的 CD17 表达和细胞扩散的增加和由 IL 6 介导的淀粉蛋白(SAA)的生成,表现出免疫抑制和抗粘附活性。层粘连蛋白(lamimin, LN)和纤粘连蛋白(fibronectin,FN)对胚泡的粘附和内细胞团的生长也有促进作用,着床窗期在滋养外胚层高表达的FN以及其他的细胞外基质(extracellularmateix,ECM)成分作为粘附分子<11>,与裸露子宫侧基膜中的整合素结合,引起胞内 粘着斑激酶酪氨酸磷酸化<12>,进而形成粘着斑,促进了胚泡着床的第一步反应即滋养层的粘附与扩展<13>。用LN 结合蛋白抗体亦阻断胚泡植入<14>。故 PTK抑制剂可通过其抗粘附活性达到抗着床的目的。2 干扰激素水平,影响子宫内膜对胚泡着床容受:现已知,外源性催产素(OT)、前列腺素(PG) 、肾素、泌乳素(PRL)等激素类物质对胚胎着床有影响,在一定程度上有维持子宫内膜蜕膜化的功能。肾素为一种类激素物质,已知局部肾素血管紧张素系统(RAS)能调节子宫内膜蜕膜化反应、子宫血管通透性、血流量及子宫血管新生。实验观察 P对人早孕子宫蜕膜细胞活性肾素的合成与分泌<15>,P作用于子宫孕酮受体后,调节肾素合成与分泌,然后影响血管紧张素II(AT II)的表达,导致内膜血管功能变化,使子宫内膜血管适应着床和维持妊娠。体外实验观察蜕膜化维持的调节机制发现,人早孕子宫蜕膜细胞可分泌 PRL, PRL 可作用于蜕膜CD56+NK细胞的信号传导途径<16>。高浓度的环腺苷酸(cAMP)显著增加 PRL的分泌,提示 cAMP信号系统可能在蜕膜化反应中发挥作用。认为PTK抑制剂是通过cAMP途径调节P和PRL对蜕膜的作用。现已发现,PTKs 抑制剂可抑制由胰岛素诱导的血管紧张素I(AT I)受体基因表达的上调效应,这种抑制作用是通过抑制 AT I 受体的后转录机制完成,进而抑制平滑肌的增殖影响血管收缩。同时,PTKs抑制剂具有抗生长因 子的活性,可通过抑制血栓酶的活性抑制破损血管部位细胞信号传导,增加血管内皮的扩张功能, 抑制血小板释放而抑制胶原蛋白灌注血管引起的收缩效应,影响血管内皮细胞的增殖和内皮素的释放而抑制血管收缩,从而破坏着床时子宫内膜血管的重建<17>。3通过免疫学途径对胚胎的排斥:人们已认识到免疫抑制并不
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