为了提高聚氯乙烯 (PVC)在室温下的坚韧度 ,在PVC软袋中一般都加入了增塑剂———邻苯二甲酸二异辛酯 (DEHP) <1～ 2 > 。在动物试验中DEHP的毒性已被证实<3> ,虽然它对于人体是否有毒性还没有定论 ,但DEHP的广泛使用和溶出问题已引起了人们的高度重视。对注射用PVC袋中注射液的DEHP的含量测定在国外文献<1～ 2 ,4～ 6 > 中有很多报道 ,但笔者在国内还未见任何报道。本实验以邻苯二甲酸二正辛酯 (DOP)为内标 ,采用大口径毛细管柱气相色谱法测定注射用PVC袋中注射液的DEHP含量。1 仪器与试药美国惠普公司HP5 890型气相色谱仪 ,DEHP(色谱固定相标准 ,纯度 >99 5 % ,上海试剂一厂 ) ,DOP(色固标准 ,纯度 >99 5 % ,上海同济大学 ) ,正己烷(分析纯 ) ;PVC袋装注射液、非PVC或注射液 ,玻璃瓶装注射液 (市售 )。2 实验方法与结果2 1 色谱条件色谱柱 :HP 5 ,0 5 3mm× 30m ,2 6 5 μm。保护柱 :空心未涂层石英毛细管柱 ,0 5 3mm× 1m。检测器 :FID。进样器温度 :2 80℃ ;柱温 :2 6 0℃ ;检测器温度 :30 0℃ ;载气 :氦气 :2 3mL·min- 1,空气 :2 15mL·min- 1,氢气 :10mL·min- 1;不分流进样 ,进样量 :1μL。2 2 内标溶液的配制精密称取DOP 5 13mg ,置 10mL量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得每 1mL甲醇中含DOP 0 5 1mg的内标储备液。精密量取此溶液 1mL置 2 5mL量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得每 1mL甲醇中含DOP 2 0 4 0 μg的内标溶液。2 3 对照品溶液的制备精密称取DEHP对照品适量 ,加正己烷制成15 2 μg·mL- 1的溶液 ,作为对照品溶液。2 4 样品处理量取 10 0mL注射液于 5 0 0mL分液漏斗中 ,精密加入 1mLDOP甲醇溶液 ,混匀 ,加入 10 0mL正己烷 ,室温时时振摇 15min ,分离出正己烷层于 2 5 0mL圆底烧瓶中 ,70℃水浴 ,旋转蒸发仪上挥至近干 ,取出烧瓶冷至室温 ,用正己烷少量多次将剩余物转移至 5mL尖底试管中 ,4 0℃水浴空气流挥干正己烷 ,取出冷至室温 ,精密加入 1mL正己烷 ,混匀即得。2 5 线性范围分别配制 6 0 8,10 13,15 2 0 ,2 5 34,5 0 6 7μg·mL- 1的DEHP正己烷溶液。精密量取 1mL上述溶液于 5 0 0mL分液漏斗中 ,用吹风机 (冷风 )吹干 ,加10 0mL蒸馏水混匀 ,按照“2 3”项下方法处理该溶液 ,取 1μL进样 ,以DEHP和DOP的峰面积比值对DEHP的进样量进行回归 ,得回归方程y =38 4 71x- 0 0 0 36 ,r =0 99998。表明其标准曲线在浓度范围 6 0 0～ 5 0 0 0 μg·mL- 1之间有较好线性关系。2 6 最低检测限的测定以信噪比S/N为 3计 ,DEHP的最低检测限为1 16 μg·mL- 1。2 7 精密度试验吸取对照品溶液 1μL ,按“2 1”条件 ,重复进样5次测定峰面积 ,计算DEHP和DOP的峰面积比值 ,结果RSD =1 75 % ,结果表明本仪器精密度良好。2 8 回收率测定采用空白加样回收试验法 ,精密量取 1mLDEHP正己烷溶液 (12 17,15 2 0 ,18 2 6 μg·mL- 1)于5 0 0mL分液漏斗中 ,用吹风机 (冷风 )吹干正己烷 ,加 10 0mL蒸馏水混匀 ,按照“2 3”项下处理该溶液 ,取 1μL进样 ,结果平均回收率为 99 4 9% ,RSD为0 91% (n =9)。2 9 样品的含量测定分别取PVC软袋装 5 %葡萄糖注射液、非PVC软袋装 5 %葡萄糖注射液、玻璃瓶装 5 %葡萄糖注射液 (生产日期一致 ,测定前均已储存 2个月 ,容量规格均为 2 5 0mL)各 10 0mL ,一式 3份 ,按照样品处理项下处理该溶液 ,取 1μL进样 ,结果见图 1和表 1。在“2 1”色谱条件下 ,进行DEHP的含量考察 ,结果PVC软袋装 5 %葡萄糖注射液和非PVC软袋装5 %葡萄糖注射液中 ,均可检测到DEHP ,PVC软袋装5 %葡萄糖注射液中DEHP的含量大于非PVC软袋装 5 %葡萄糖注射液中DEHP的含量。玻璃瓶装5 %葡萄糖注射液中未检测到DEHP。3 讨 论3 1 增塑剂DEHP是广泛存在的污染<7> ,所以本实验中所用到的玻璃仪器在实验前 ,均需用四氢呋喃 甲醇 (1∶1)洗涤 ,然后用正己烷淌洗后<4 > ,备用。3 2 本实验中采用与样品体积 1∶1的正己烷 1次将DEHP萃取出来 ,试验证明绝对回收率可达到96 % ,该预处理方法可行。3 3 在测定注射液样品之前 ,为了使样品中DEHP 图 1 不同容器装注射液中DEHP的色谱图A -DEHP和DOP对照品溶液 ;B -PVC软袋装 5%葡萄糖注射液 ;C -非PVC软袋装 5%葡萄糖注射液 ;D -玻璃瓶装 5%葡萄糖注射液 ;a -DEHP ;b -DOPFig 1 ChromatogramofDEHPininfusionindifferentcontainersA -ThesolutionofDEHPandDOP ;B - 5%GlucoseinfusioninPVCbags ;C - 5%Glucoseinfusionintheotherbags(notPVC) ;D - 5%Glucoseintravenoussolutioninglasscontainers;a -DEHP ;b -DOP表 1 3种不同容器装 5 %葡萄糖注射液中DEHP的含量测定结果Tab 1 TheDEHPcontentsin 5 %glucoseinfusioninthreediffer entcontainers容器种类样品编号 DEHP的含量/μg·mL- 1 容器种类样品编号 DEHP的含量/μg·mL- 1PVC软袋 112 30非PVC软袋 18 6 82 12 2 0 2 8 6 8312 2 538 6 4玻璃瓶 1 2 3 含量均匀 ,并符合医疗习惯 ,在测定前 2 4h内 ,将注射液振摇 4次 ,每次 5min。3 4 内标溶液用甲醇配制 ,是因为样品溶液为水溶液 ,而DOP不溶于水 ,只溶于部分有机溶剂。故选用甲醇为溶剂 ,因甲醇既可与水混溶 ,也可溶解DOP ,实验证明可行。大口径毛细管柱气相色谱法测定注射用聚氯乙烯袋中注射液的邻苯二甲酸二异辛酯含量@邓亮$四川大学华西药学院!四川成都610041
@叶利明$四川大学华西药学院!四川成都610041
@陈聪$四川大学华西药学院!四川成都610041大口径毛细管柱气相色谱法;;聚氯乙烯;; 邻苯二甲酸二异辛酯目的 建立注射用聚氯乙烯(PVC)袋中注射液的邻苯二甲酸二异辛酯(D EHP)含量测定的方法。方法 以邻苯二甲酸二正辛酯(DOP)为内标,采用大口径毛细管柱气相色谱法测定DEHP的含量。结果 DEHP和DOP的保留时间分别为6. 4和10 . 0min ,其标准曲线在浓度6 . 0 0～5 0 . 0 0 μg·mL-1之间有较好线性关系,平均回收率为99 4. 9% ,RSD为0 . 91%。最低检测限为1 .16 μg·mL-1。结论 该方法专属性强,适用对注射用PVC袋中注射液的DEHP的含量测定。<1> HansGW ,QunfaH ,DoloresS ,etalSimultaneousanalysisofthedi(2 ethylhexyl)phthalatemetabolites2 ethylhexanoicacid,2 ethyl3 hydroxyhexanoicacidand2 ethyl3 oxohexanoicacidinurinebygaschromatography massspectrometry
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