葡萄籽提取物的化学成分及药理活性研究概况

葡萄是常见的水果和酿酒原料 ,中医认为其果、根和藤均可入药。葡萄籽提取物 (grapeseedextract,EGS)中含有大量多酚类、脂质类和矿物类等有益于人体的化学成分 ,对多种疾病有预防和治疗作用。现对葡萄籽提取物的化学成分及药理作用作一介绍。1　葡萄籽提取物中的化学成分1 .1　多酚类物质葡萄籽中含有多酚类物质 (GSP) ,主要有儿茶素类和原花青素类。儿茶素类化合物包括儿茶素、表儿茶素及其没食子酸酯 ,是葡萄籽中主要的单聚体 ,也是原花青素寡聚体和多聚体的构成单位。葡萄籽提取物原花青素 (GSPE)是由不同数目的黄烷醇聚合而成 ,目前研究最广的主要是由 (+ )-儿茶素 ((+ ) -catechin)、(- ) -表儿茶素 ((- )-epicatechin)为单体聚合而成的这类化合物。二至四聚体称为寡聚体 (OPC) ,五聚体以上称为高聚体(PPC)。其生物活性随聚合度增大、增强。从葡萄籽中提取的生物类黄酮OPC与大多数黄酮相比 ,结构特殊 ,水溶性好 ,有效性高 ,生物利用度在 90 %以上 ,极易被人体吸收。1 .2　脂质类及其他化学成分葡萄籽中约含有 1 0 %～ 1 5 %的葡萄籽油 ,其主要成分为亚油酸、亚麻酸等多种不饱和脂肪酸和甾醇等以及多羟基类 (PHS)如白藜芦醇等。葡萄籽油中含矿物元素钾、钠、钙和铁量较高 ,并含多种维生素。酚酸类主要包括原儿茶酸、香豆酸、没食子酸、咖啡酸和丁香酸等。1 .3　提取制备方法GSPE多采用甲醇、乙醇、丙酮等极性较大的溶剂冷浸 ,提取物用乙酸乙酯等进一步提取 ,用柱层析法分离。美国专利中以沸水提取 ,乙酸乙酯进一步提取粗提物 ,三氯甲烷沉淀产物。樊丽华<1> 采用国产树脂和聚酰氨粉双重层析分离提纯 ,省略许多复杂过程 ,效果理想。葡萄籽油多采用传统压榨法和提取法 ,用超临界提取法产率高达 1 3.5 %<2 > 。2　生理活性2 .1　抗氧化作用GSPE能够有效地清除过量自由基 ,对氧化损伤有保护作用。体外实验采用化学发光法和细胞色素C还原法测定GSPE、维生素C、维生素E、β -胡萝卜素、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶和甘露醇清除超氧阴离子自由基和羟自由基的能力。结果表明 ,GSPE在 1 0 0mg/L浓度时对超氧阴离子自由基和羟自由基的抑制能力为 78%和 81 %,维生素C是1 2 %和 1 9%,维生素E是 5 0 %和 75 %,SOD和过氧化氢酶联合作用抑制超氧阴离子自由基约为 83%,甘露醇抑制羟自由基约为 87%,说明GSPE具有比上述两种维生素强的抗氧化能力<3> 。GSPE能够还原维生素E自由基而使维生素E再生 ,从而减少细胞内维生素E的损耗。GSPE与维生素E结合使用能明显延迟羟自由基诱导的卵磷脂脂质过氧化作用形成的共轭二烯 ,表明GSPE对维生素E的抗氧化作用具有明显的协同增强作用。对大鼠喂食GSPE高胆固醇 -缺维生素E饲料 ,其主动脉、心、肝、肠、肌肉和肾中过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和SOD活性能明显恢复到喂食正常饲料大鼠的水平 ,表明GSPE可增强机体组织抗氧化酶系统的能力 ,从而增强抗原化能力<4 > 。PHS亦能使家兔血清SOD、谷胱甘肽过氧化物酶含量升高 ,提高机体抗氧化酶的活性 ,减少过氧化脂质的生成<5> 。2 .2　抗糖化作用采用体外蛋白糖化反应系统 ,对照组将葡萄糖与牛血清白蛋白分别在 37℃ ,5 0℃条件下共同保温 ,实验组加入不同剂量的EGS或氨基胍 (抗糖化作用和抗氧化作用 )。利用荧光分光光度计测定蛋白糖化终末产物的生成量。EGS在 1 .0～ 2 .0g/L剂量范围内均可有效地抑制蛋白糖化终末产物的生成 ,当药物浓度达 2 .0g/L时 ,其抑制作用相当于同剂量的氨基胍。实验结果表明 ,EGS不仅具有抗氧化作用 ,而且具有明确的抗糖化作用<6 > 。2 .3　酶抑制作用胶原酶、弹性蛋白酶、透明质酸酶和 β -葡糖醛酸苷酶等可分别对胶原、弹性蛋白和透明质酸等构成血管内壁的重要组成物质造成破坏 ,GSPE通过捕获活性氧及调控上述酶的活性对它们产生强大的抑制作用 ,以防止其对血管物质的破坏<7> 。3　药理作用3.1　抑制动脉硬化、降低血压作用GSPE能够提高血管弹性、抑制血管紧张酶的活性而降低血压 ,增强血管抵抗力 ,降低毛细血管渗透性 ,预防血栓形成和心脑血管疾病的发生。马亚兵等<8> 对雄性新西兰兔分别喂食标准、标准 + 1 %胆固醇、标准 + 1 %胆固醇 + 1 %的颗粒饲料 ,检测血清总胆固醇 (TC)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDLC)、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDLC)、丙二醛(MDA)和血浆氧化型低密度脂蛋白 (oxLDL)。 1 2周处死动物后取主动脉作病理形态学观察。结果证明GSPE能明显降低血清TC、LDLC、TG、TG/HDLC ,升高HDLC ,并能显著降低血清MDA、血浆oxLDL。病理分析显示GSPE组兔主动脉壁厚和泡沫细胞数量较高脂模型明显减轻、减少 ,表明GSPE具有预防动脉粥样硬化的作用 ,该作用的发挥与其调节血脂、抗LDL氧化修饰有关 ,并能改善胰岛素抵抗。葡萄籽油中亚油酸等具有调节血液胆固醇治疗和预防动脉硬化等作用。周则卫等<9> 对大鼠高血脂症模型给予山葡萄籽油 ,证明TC、TG 2项指标均下降 1 5 %以上 ,且给药时间越长效果越明显。3.2　抗肿瘤作用GSPE有诱导乳腺癌MCF -T细胞脱落凋亡作用 ,其表现有肿瘤细胞由聚集成团变为单个散在 ,细胞染色质DNA断裂等<10 > 。对Diolein和TPA活化的蛋白激酶C活性有抑制作用 ,可能是通过对信号传递过程的中间代谢产物的影响而抑制了其活性 ;GSPE能显著抑制促癌物巴豆油对鸟氨酸脱羧酶活性的诱导 ,预防癌前病变<11> 。以人的家族性多发性大肠腺癌 (FAP)模型APCMin小鼠探讨抗癌作用 ,在饲料中添加 1 %含儿茶素和原花青素的EGS ,给予 6周后 ,计数肠管的肿瘤数。对照组为 78± 2 9个 ,实验组为 4 4± 1 9个 ,差异有显著性<12 > 。EGS与阿霉素联合作用于人乳癌细胞阳性受体MCF - 7和MDA-MB4 6 8,显示了联合用药的可能性<13> 。3.3　抗辐射作用钟进义等<14 > 将荷S180 肉瘤小鼠分别给予6 0 Coγ射线局部照射 ,口服EGS和局部照射加口服EGS的不同方法处理 ,接种肿瘤细胞后第 1 2天检测动物的瘤重 ,白细胞计数、脾淋巴细胞转化率等指标。结果表明 ,对照组平均瘤重高于其他各组 ,照射加高剂量EGS组的肿瘤抑制率高于单纯照射组和单纯口服组 ,单纯照射组的白细胞计数低于其他各组。同未照射组比较 ,受辐照各组的MDA水平升高 ,与机体产生内源性自由基引发脂质过氧化反应加强 ,氧化产物在体内蓄积有关。应用EGS可使MDA水平降低 ,且应用剂量越大 ,降低幅度越大。3.4　抗病毒、抗菌作用GSPE在体外可使包膜病毒失活和抑制其增殖。GSPE可通过与细菌结合 ,抑制P -型大肠杆菌的粘附 ,防止细菌感染。3.5　其他作用由于运动引起骨骼肌自由基和其他形式的活性氧增加是导致骨骼肌损伤和疲劳的重要原因 ,应用GSP进行抗疲劳实验 ,结果表明 ,GSP能显著延长小鼠负重游泳时间 ,降低疲劳鼠血乳酸含量和增加肝细胞糖元含量 ,从而具有明显的抗疲劳作用<15> 。GSPE还具有抗溃疡、改善盲肠代谢和保护结肠的作用。明显改善眼疲劳患者的症状 ,提高视力。可抑制组织胺、5 -羟色胺、前列腺素和白三烯等炎症因子的合成和释放 ,抑制嗜碱细胞和肥大细胞释放过敏颗粒 ,从而有效地改善皮肤过敏症状和过敏性哮喘症状。其强抗氧化特性使它对多种由过量氧自由基导致 的疾病有预防、治疗或辅助治疗的作用。葡萄籽提取物的化学成分及药理活性研究概况@边玲$山东正大福瑞达制药有限公司!山东济南250014
@范培红$山东大学药学院天然药物化学教研室!山东济南250012<1>　樊丽华.葡萄籽中 原花青素提取方法的进一步研究.新疆大学学报(自然科学版).2004,021(1):102.
<2>　唐韶坤,李淑芬,叶春皓,等.超临界二氧化碳萃取葡萄籽油的研究.高校化学工程学报.2004,18(1):23.
<3>　赵超英,姚小曼.葡萄籽提取物原花青素的营养保健功能.中国食品卫生杂志.2000,12(6):38.
<4>　郑光耀.葡萄籽原花青素提取物的生理活性、药理作用及其应用.林产化工通讯.2000,34(1):28.
<5>　于红霞,徐贵发.葡萄籽多羟基类提取物对高脂家兔抗氧化作用的影响.山东医科大学学报.2001,39(6):547.
<6>　韩彩和,韩怡文,宫环,等.银杏叶及葡萄籽提取物体外抑制蛋白糖化终末产物生成作用的研究.中国药学杂志.2004,39(7):507.
<7>　国植,徐莉.原花青素:具有广阔发展前景的植物药.国外医药·植物药分册.1996,11(5):196.
<8>　马亚兵,高海青,由培安,等.葡萄籽原花青素抗兔动脉粥样硬化形成的实验.山东大学学报(医学版).2003,41(6):646.
<9>　周则卫,李亚鹏,向前,等.山葡萄籽油(EPC)调节血脂作用的研究.医学研究通讯.2001,30(12):35.
<10>　韩炯,李莹,刘薪立,等.葡萄籽提取物原花青素诱导乳腺癌MCF -7细胞脱落凋亡.中草药.2003,34(8):722.

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