克淋通胶囊由四季红、黄柏组方,具有清热解毒、利水通淋的作用,对于湿热蕴结、小便黄赤、淋漓 涩痛之症,及尿路感染、肾盂肾炎有较强疗效。由于本品君药四季红为地方药品收载品种,成分尚 未明确,而黄柏为臣药,且主通淋利尿功能,所含成分盐酸小檗碱含量测定方法明确,易于定量。因此,笔者用反相高效液相色谱法(RP -H PLC 法雪测定克淋通胶囊中盐酸小檗碱的含量眼2演,作为其含量测定的监控指标,用以反映和控制本品内在质量。1 仪器与试药 LC -10A 高效液相色谱仪,SPD -10A M 二极管阵列检测器,CLASS -V P 色谱工作站 穴 日本岛津 雪 。甲醇,
磷酸二氢钾 穴 均为 A R级雪;乙腈(H PLC 级);重蒸馏水;盐酸小檗碱对照品穴 中国药品生物制品检定所);克淋通胶囊穴 贵州神奇制药有限公司,批号:990515,990223,991017)。2 方法与结果2.1 色谱条件 采用 OD S C18色谱柱穴 大连化学物理研究所,250m m ×4.6m m ,5μm );流动相:0.033m ol/L 磷酸二氢钾 -乙腈(60∶40);流速:1.0m L /m in;柱温:25℃;检测波长:345nm 。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于 2000。2.2 溶液的制备 对照品溶液:精密称取于 105℃干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品 10m g,置 25m L 量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀;再精密吸取 1m L,稀释至 10m L,作为对照品溶液穴 每 1m L 含盐酸小檗碱 42.4μg)。 供试品溶液:取胶囊内容物 0.1g,精密称定,置 25m L 量瓶中,加盐酸 -甲醇(1∶100)溶液 15m L,超声处理 20m in,放冷至室温,加甲醇至刻度,摇匀,用干燥滤纸过滤,取续滤液即得。 阴性对照品溶液:按处方比例依法配制除四季红外的阴性制剂,取 0.1g,精密称定,置 25m L 量瓶中,加盐酸 -甲醇(1∶100)溶液 15m L,超声处理 20m in,放冷至室温,加甲醇至刻度,摇匀,用干燥滤纸过滤,取续滤液作为阴性对照品溶液。2.3 线性关系考察 分别吸取盐酸小檗碱对照品溶液穴 浓度为 0.0424m g /m L)4,8,12,16,20μL 进样,记录色谱图穴 图 1雪 。以峰面积(A)对盐酸小檗碱进样量(C)回归计算,得一基本过原点的直线方程,回归方程为 C(μg)=2.58275×10-7A -0.0077928,r=0.9995。2.4 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液 10μL,分别进样 5次,测定。结果盐酸小檗碱峰面积积分值 RSD 为 0.50%。结果表明精密度良好。2.5 重现性试验 取样品穴 批号为 990515)内容物 5份,依法提取,进样,记录色谱图穴 图 1雪 。5份样品中盐酸小檗碱含量平均值为 5.02m g /g,RSD为 1.47%。说明重现性良好。 1 1 t/m in t/m in t/m in 2 4 6 8 10 2 4 6 8 10 2 4 6 8 10 A B C 1.
盐酸小檗碱 A.阴性对照品溶液 B.对照品溶液 C.供试品溶液 图 1 高效液相色谱图2.6 稳定性试验 取与重现性试验同一供试品溶液,在室温下于 2,8,16,24,48h 分别进样 10μL,并测定峰面积。结果 RSD 为 2.31%,表明样品溶液在 48h 内稳定性良好。2.7 加样回收率试验 取与重现性试验同一批号的样品 5份,各约 0.1g,精密称定,于每份中加入 1m L 的上述盐酸小檗碱对照品溶液(0.0424m g /m L雪 ,依法提取,进样,记录色谱,计算回收率。得平均回收率为 96.40%, RSD 为 1.71%,说明回收良好。结果见表 1。 表 1 盐酸小檗碱回收率试验结果(n =5) 取样量(g)样品含量穴μg /m L雪加入量穴μg /m L雪测得量穴μg /m L雪 回收率(%) X(%) RSD (%) 0.113522.79 16.9639.26 97.11 0.106221.32 16.9637.67 96.46 0.105021.08 16.9637.79 98.52 96.40 1.71 0.098619.80 16.9635.75 94.04 0.101120.30 16.9636.56 95.872.8 样品含量测定 表 2 样品中盐酸小檗碱含量测定结果(n =3) 按上述含量测定方法 批号 含量(m g /粒) RSD (%)操作,测定结果见表 2。 990515 2.02 0.213 讨论 990223 2.10 0.46 国内测定药材中盐酸 991017 2.04 0.30小檗碱含量的方法主要是薄层扫描法及 H PLC 法。本品成分复杂,用 H PLC 法能使盐酸小檗碱与其他组分得到满意的分离,从而能够准确定量。研究结果表明,本含量测定法具 有回收率好,精密度、重现性高,样品处理简便,分析快速的优点,可用于克淋通胶囊的质量控制 。高效液相色谱法测定克淋通胶囊中盐酸小檗碱的含量@刘思源$中国人民解放军44医院!贵州贵阳,550009
@王宝佳$中国人民解放军44医院!贵州贵阳,550009
@林芳$中国人民解放军44医院!贵州贵阳,550009
@陈红燕$中国人民解放军44医院!贵州贵阳,550009
@陈德友$中国人民解放军44医院!贵州贵阳,550009
@石春铃$中国人民解放军44医院!贵州贵阳,550009克淋通胶囊;;盐酸小檗碱;;高效 液相色谱法;;含量测定目的:探讨克淋通胶囊中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法:
高效液相色谱法(HPLC法)。采用ODSC18色谱柱(250mm×4.6mm ,5μm);流动相为0.033mol/L磷酸二氢钾-乙腈(60∶40);流速为1.0mL/min;柱温为25℃;检测波长为345nm 。结果:盐酸小檗碱在0.1696～0.8485μg范围内呈良好线性关系,r=0.9995 ;平均回收率为96.40%,RSD为1.71%。结论:所建立的方法可准确、快速地测定克 淋通胶囊中盐酸小檗碱的含量,可用于该制剂的质量控制。1贵州省卫生厅.贵州省中药材质量标准
.贵阳:贵州人民出版社,1988:45.
2陈发奎.常用中草药有效成分含量测定 .北京:人民卫生出版社,1997:639.碱;;高效液相色谱法;;含量测定目的:探讨克淋通胶囊中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法:高效液相色谱法(HPLC法)。采用ODS C18色谱柱(250mm×4.6mm ,5μm);流动相为0.033mol/L磷酸二氢钾-乙腈(60∶40);流速为1.0mL/min;柱温为25℃;检测波长为345nm 。结果:盐酸小檗碱在0.1696～0.8485μg范围内呈良好线性关系,r=0.9995 ;平均回收率为96.40%,RSD为1.71%。结论:所建立的方法可准确、快速地测定克 淋通胶囊中盐酸小檗碱的含量,可用于该制剂的质量控制。1贵州省卫生厅.贵州省中药材质量标准.贵阳:贵州人民出版社,1988:45.
2陈发奎.常用中草药有效成分含量测定 .北京:人民卫生出版社,1997:639.
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