天然抗氧化剂碧萝芷研究进展

碧萝芷(巧cllogenol,PYC)是由瑞士Horph昭e研究有限公 司专利生产的抗氧化产品,从法国西南部沿海特有的松树树 皮中提取,由低聚原花青素、黄衫素、儿茶素、表儿茶素、毒叶 素、葡糖醋和果酸如咖啡酸、阿魏酸、没食子酸、香豆酸、香草 酸等〔’〕40多种小分子水溶性生物活性成分组成,是目前文 献和实验室记录中最强的天然抗氧化剂,清除自由基的能力 是维生素c的50倍,维生素E的20倍川。国内的研究较少。 现将相关的药理学研究资料和碧萝芷在国内的研究进展作 一综述。 1药理作用 1.1对循环系统的作用 1.1.1抗血小板聚集作用内。er等闭的实验证明,口服 100 mgl乃r(二Zh后对吸烟引起的血小板聚集有抑制作用,具 有明显的剂量依赖性,姗mg PYc远比100,150rng效果明 显,高剂量(Zoomg)下的效果可以维持6d以上,且PYC不会 影响血流速度,心率和血压。 1.1.2降血压和抗血栓作用H~i垃等<‘1给不吸烟的轻度 高血压患者服用PYC或安慰剂8周,2以〕mg·d-l,随机选样的 双盲对比实验发现:PYC能使血栓水平显著下降(p<0 .05); 但1〕、℃使患者收缩压下降的效果与安慰剂相比不具统计学 意义。 1.1.3提高血清抗氧化作用.】allisch等闭在6个均有活性 氧化物质(RoS)产生的生物化学体系中进行人血清的体外实 验,发现PYC使血清抗氧化性提高。其中有3个系统加入了 乳清,结果提示乳清不阻碍PYC抗氧化作用的表达。 1.1.4对下肢静脉的影响Arcajlgeli图以PYc或安慰剂对 下肢静脉高压和下肢静脉曲张患者随机选样进行2个月的 双盲对比实验,loomg,tid。实验证明,PYC能明显减轻患者 皮下水肿、下肢乏力、酸痛等症状,以消肿效果最佳,约印% 患者完全痊愈,几乎所有受试者都不再乏力。 1.1.5保护内皮细胞作用vi匆li等困用共培养体系研究 过滤器中特殊培养的活性氮化物质(RNS),发现RNS能使内 皮细胞中的a-生育醇显著减少,但经PYC预培养后,内皮细 胞自身产生的a-生育酚在正常范围内能提高约巧%,另一方 面,PYC通过降低RNs诱导的氧化压力保护内皮细胞。 1.2抗紫外辐射(UVR)作用 saliou等互报道21位红斑病患者1 .10rng·kg一’·d一’口服 PYc4周,1.肠mg·吨一‘·d一’再口服4周。证实PYc能显著提 高皮肤对UVB的抵抗力,从而保护皮肤,减轻红斑病。 L3抗炎作用 Bayeta等侧将J774细胞在37℃,5%c仇的环境中培养2 h,以荧光法检测主要发炎因子过氧化物的产生,发现PYC能 浓度依赖性地抑制过氧化物的释放而起抗炎作用。若将 J7科细胞在PYC中培养18h后再分析细胞溶解液,PYC可调 节CSll氧化还原代谢活性,提高过氧化氢酶和soD的活性。 1.4免疫调节作用 。les坛er等匡在正常小鼠、乙醇饲养小鼠和白血病毒LP- BMS感染小鼠中服用PYC,实验提示PYC降低了细胞中几6 的上升,加强了自然杀伤细胞的细胞毒性。证明其对免疫功 能障碍所起的功效。陈世伟等仁’。一川的实验也证实P、℃具有 增强免疫的功能。 LS抗癌变作用 香烟中的特异性亚硝胺NNK是严重的环境诱癌物质。 Hu灿等<’2」取6个月和20个月大的13“雄鼠的肝和肺作体 外实验,发现P飞℃能明显地抑制肝、肺微粒体中NNK的代 谢,从而起抗癌变的作用。 L6抗衰老作用 形态病理学认为RoS参与了邓传递神经毒素的过程从 而导致神经元细胞凋亡,表现为阿尔茨海默病(肋)。Peng 等〔‘3〕用鼠PclZ细胞研究PYc抗衰老作用的实验发现,暴露 于AI坛_”中的 PC12细胞凋亡前ROS的水平会有上升,而 PYC能抑制RoS产生,减弱半胧胺酸蛋白酶活性,也减少 DNA断裂和多聚(ADR核糖)聚合酶(PARP)裂解,保护细胞 不为邓诱导凋亡。veurink等〔’4,综合应用PY〔:的联合抗氧 化剂疗法(CAI,法)在Ap〕E缺陷小鼠身上试验,发现TuNEL 染色值显著下降,海马中的内涵体呈现为组织病理学显著减 少,PYC可防治神经退行性疾病和延长寿命。而张丁等〔‘,J利 用PYC制成一种复合抗氧化剂对小鼠及果蝇试验,显示了 P丫C清除体内自由基和延缓衰老的动物学效应。 1.7治疗勃起功能障碍(El))的作用 () hntsh,等{’“证明盯c可抑制镰状细胞血症,而镰状细 胞血症是引起继发性ED的主要病因一此外,1)lllllCkovd等{‘7 对E”患者实施3个月的双盲对比实验,IIEF-5指标显示PYC 能明显改善ED症状(尸<0.05),且血液抗氧化活性显著上升 (P<0.01),胆固醇总量和低密度脂蛋白胆固醇均降至正常。 同时,高密度脂蛋白胆固醇和TA倪水平均不变化,可见PYC 可安全治疗ED患者. 1.8体内过程 \;l卿h等L’”i研究r口服PYC后人尿中自由共扼阿魏酸 可被检测的水平:PYC被吸收后相当大比例的阿魏酸以葡糖 汁酸或硫酸盐的形式排泄出来,个体差异为2%一20%,100 咪叶c的药动学性质与200 mg相似。所有受试者尿中阿魏 酸水平都很明显,证明PYC中有酚的成分被人体吸收、代谢 和排除 1.9不良反应 根据《食品安全性评价程序》的评价L‘9〕:小鼠急性毒性 实验证明PYC属无毒级;小鼠骨髓微核实验,AnleS实验及小 鼠精子畸形实验均为阴性;高剂量30d喂养实验及传统致畸 实验匀未观察到有毒理学意义的异常变化。证明PYC是安 全的- 2作用机制 2.1抗氧化理论 超氧负离子自由基致病学说认为超氧负离子自由基可 使脂质过氧化、损伤细胞膜、使DNA断裂、基因突变,引起细 胞结构与功能破坏,产生组织损害和器官退行性病变,引起 炎症、癌疥、老年病和衰老的发生。PYC正好具有超强的自 山基捕获能力,能起抗氧化和抗衰老等作用。在膜脂质过氧 化产物丙二醛(MDA)修饰蛋白引起自由基损伤的研究中, Kim等田通过对比实验证明了PYC能抑制MDA作为侧链修 饰蛋自质,揭示r其优于维生素c,Q一生育醇和红酒的抗氧化 力的根本原因。Pa(ker等‘“,则考虑了混合物PYc的高效能 是由各具高牛物活性的单一成分相互协同作用的结果,并以 EsR信号证明r PY(二保护心血管、改善微循环的作用是由于 它能使抗坏血酸自由基再生、保护生物体内生维生素E和半 胧胺酸免受氧化。通过蛋自质链接PYC改善结构的实验提 示r曰c能影响基因的表达。cho等t22n则证明了PYc通过 作用于对氧化还原反应敏感的转录调节因子来抑制前炎症 性细胞因子ILI的表达,因而PYC可凭其自由基捕获能力用 作消炎药和抑制免疫剂。Bors等复231认为PYc中的酚酸的祸 合反应使其具有的抗氧化能力。B二等山还以脉冲射解作 用与动力光谱学联合法研究rl〕、飞二与带有经基自由基、叠氮 基自由纂和过氧化物阳离子等的没食子酸醋类的反应,从动 力学角度解释r PYc中花青素成分的抗氧化机制。 2.2调节NO理论 NO在人体中扮演着不同的生理角色,对免疫系统抵御 滤过性病原体、细菌和其他寄生虫起作用。PYC促进NO的 ·404·r为“范2先价刀J,2久巧叼改八大Jb之.40加d.石 产生,从而使未接种的BA双2翻.7巨噬细胞中!NI飞a浓度随 时间上升J,ark等「25j从这个角度证明厂PYc中能抑制版噬 细胞中病毒复制,调节机体的免疫功能,且发现卞要是山 PYc中的三聚原花青素q等起作用。但过量NO会导致多 种疾病,如关节炎、糖尿病、中风、败血症休克、自体免疫动 脉粥样硬化(AS)和慢性炎症疾病等。Vi卿h等加和I场俪。 等〔2,马通过PYc对RA从2翻.7鼠巨噬细胞中NO代谢的影响 实验,认为PYC显著遏制NO的产生是其影响R()S清除N(、, 抑制iNOS和抑制iNOS-lnl亏入八基因转录这儿种’「物活性联合 作用的结果,起主要作用的是PYC中的单聚和几聚原花青 素〔23j,并提示这也是其他多酚类物质治病的根本原因,山此 认为,PYC不同有效成分对NO浓度的双向调竹作用使P丫( 能广泛应用于免疫疾病、循环疾病和神经衰弱等疾病「 2.3治疗炎症皮肤病的机制 细胞间茹附分子ICAM一1的表达在白细胞和角化细胞的 相互影响作用中必不可少,角化细胞中ICAM一1表达的增名 在多种炎症皮肤病中均被观察到,如牛皮癣、异位遗传性过 敏症的皮肤炎和狼疮红皮病。Blt。等L27用实验证明fP、’《- 通过抑制可诱导的ICAM一1的表达来降低I州守诱,卜的人体 角化细胞的粘连。此外,基于原炎症细胞因子和与氧化作川 有关的转录因子NF沼在UVR诱导的红斑病中起主要作川, Saliou等7」认为PYC抑制与NF-沼有关的基因表达而影响f 角质化细胞HaCaT的凋亡.但并不影响含NF一出因子的l)NA 的活性。 3展望 碧萝芷独特的低聚原花青素与果酸及生物类黄酮组合 是其超强作用的奥妙所在。国内对竹C的研究总体说来还 是比较少,陈世伟等「’。一”研究了PYc对免疫系统、肿瘤牛长 和非特异性免疫作用的影响;厉曙光等渗研究r价c对黑 腹果蝇寿命的影响;张铁梅等毛期做了外c体外抑制蛋白糖 化终末产物生成作用的研究;《中国科技信息》在2(阴年也 多次报道了PYC各方面的功效。最有价值的考虑是针对极 高的经济价值和广阔的市场前景,宋金表等靓2从我田本土松 树资源出发,初步研究了马尾松、湿地松、火炬松、落叶松和 黑荆树等的树皮,以及马尾松和湿地松等树木的针时一提取、 分离、精制碧萝芷的工艺和产品质量,结果以黑荆树树皮作 原料提取碧萝芷高效抗氧化剂的产品得率最高,质量最好,