广西壮族聚居地位于岭南亚热带地区,山峦迭嶂,丘陵延绵,气候湿热多雨,草木茂密,动植物腐败 产生瘴毒气,多雨多湿瘴疠横生〔1〕。《本草拾遗》指出:“岭南多毒物,亦多解物。”广西壮 族民间多采自本地生长的中草药材,配制药物,以解毒除瘴,防治瘴疫的发生。苦丁冬青降火茶是广西大新县壮族民间传统用药,主要是用大新县壮族民间本地资源苦丁冬青(Ilexkud-ingchaC.J Jsang)〔2〕及桑叶、罗汉果、薄荷、栀子等天然中草药材制成,具有清热解毒、辟秽祛瘴的 功效,当地壮族民众常用于防病治病。本文对苦丁冬青降火茶进行了抑菌抗炎作用的药效学研究。 1实验材料1·1药物:苦丁冬青降火茶供试液的制备:苦丁冬青降火茶原药材水煎3次,每次3 0min,过滤,合并水煎液,80℃水浴上浓缩至6·5g(生药)/ml,实验前用蒸馏水配 制至所需浓度。乙酰水杨酸肠溶片,河南省新星药业有限责任公司生产,批号:20040106 。1·2动物:昆明种小白鼠,SD大白鼠,SPF级,由广西壮族自治区实验动物中心提供,许 可证号:SCXK桂2003—0003。1·3菌种:大肠杆菌〔CMCC(B)44102〕 ,金黄色葡萄球菌〔CMCC(B)26003〕,甲型链球菌〔CMCC(B)32209〕, 乙型链球菌〔CMCC(B)32210〕,白色念珠菌〔CMCC(B)98001〕,肺炎杆 菌〔CMCC(B)46117〕,均为标准菌株,由中国药品生物制品检定所提供。2实验方法 与结果2·1抑菌作用〔3〕采用液体试管二倍稀释法〔3〕。将苦丁冬青降火茶制成50g(生 药)/L的供试液,置115℃高压灭菌20min备用。取无菌试管编号排列,每种菌株用12 支试管。用营养肉汤、血清肉汤培养基将高压灭菌后的苦丁冬青降火茶供试液作系列稀释,使其浓 度为50,25,12·5,6·25,3·12,1·56,0·78,0·39,0·19, 0·98g(生药)/L,分装试管,每管1ml,第11管不加药作为阳性对照管,以观察培养 基是否适合于细菌生长,第12管作为阴性对照管。除阴性对照管外,每管接种细菌浓度为105 CFU/ml的相应菌液0·1ml,置36±1℃(白色念球菌置26~28℃)培养24小时 后,将各管培养物分别接种于不含药物的相应琼脂培养基平板上,置36±1℃(白色念球菌置2 6~28℃)培养24小时,以生长菌落不超过5个者为苦丁冬青降火茶的最小抑菌浓度(MIC ),结果见表1。结果表明,苦丁冬青降火茶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链 球菌、白色念球菌、肺炎杆菌等都具有较强的抑菌作用。2·2抗炎作用2·2·1对二甲苯所致 小白鼠耳廓肿胀的影响〔4〕选取体重18~22g健康昆明种小白鼠40只,♀♂各半,随机均 分4组,每组10只。苦丁表1苦丁冬青降火茶的抑菌作用菌种名称菌号药物浓度(g/L)50 2512·56·253·121·560·780·390·190·98阳性对照阴性对照M IC(g/L)大肠杆菌44102----+++++++-6·25金黄色葡萄球菌2600 3-----++++++-3·12甲型链球菌32209-------++++-0·78 乙型链球菌32210------+++++-1·56肺炎杆菌46117-----+++ +++-3·12白色念珠菌98001---++++++++-12·5注意:“-”表示无 细菌生长“+”表示有细菌生长冬青降火茶高、低剂量组(40g(生药)/kg、20g(生药 )/kg),乙酰水杨酸组(0·2g/kg),空白对照组(给予同体积水)。每天ig1次, 连续7d。末次给药0·5h后,于小白鼠左耳廓均匀涂布二甲苯0·05ml/只。致炎1h后 ,处死小白鼠,剪下左右两耳,两耳重叠用直径8mm打孔器凿取耳片,用JN-A型精密扭力天 平称重,以耳片重量差值为肿胀值,进行统计学处理(t检验)。结果见表2。结果表明,苦丁冬 青降火茶高、低剂量组和乙酰水杨酸组均可明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓炎性肿胀,表明苦丁冬青 降火茶具有明显的抗炎作用。2·2·2对大白鼠蛋清性足跖肿胀的影响〔4〕选取健康SD大白 鼠40只,表2苦丁冬青降火茶对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响(X±SD,n=10)组别( g剂/k量g)耳廓(m肿g)胀值空白对照组—17·4±4·2乙酰水杨酸组0·28·3± 2·5***苦丁冬青降火茶组4010·8±3·6**苦丁冬青降火茶组2012·5±3· 8*与空白对照组比较*P<0·05,**P<0·01,***P<0·001.体重150 ~200g,♀♂各半,随机均分4组,每组10只。苦丁冬青降火茶高、低剂量组(40g(生 药)/kg、20g(生药)/kg),乙酰水杨酸组(0·2g/kg),空白对照组(给予同 体积水)。每天ig1次,连续7d。末次给药1h后,分别在各鼠右后足跖sc.100%新鲜 蛋清0·1ml/只,于致炎前及致炎后1h,2h,3h,4h分别以软窄带尺测量右后足踝关 节处周长,以致炎前后右后足踝关节处周长的差值为肿胀度,进行统计学处理(t检验)。结果见 表3。结果表明,苦丁冬青降火茶高、低剂量组及乙酰水杨酸组对大鼠蛋清性足跖肿胀具有明显的 抑制作用。2·2·3对大白鼠棉球肉芽肿的影响〔4〕选取健康SD大白鼠40只,体重150 ~200g,♀♂各半,随机均分4组,每组10只。苦丁冬青降火茶高、低剂量组(40g(生 药)/kg、20g(生药)/kg),乙酰水杨酸组(0·2g/kg),空白对照组(给予同 体积水)。各组大白鼠ip3%戊巴比妥钠(30cm/mg)麻醉后,在大白鼠腹部两侧用碘酒 消毒,75%酒精脱碘,然后各切约1cm长切口,将两个10mg高压灭菌棉球分别埋入大白鼠 两侧腹股沟附近皮下,随即缝合皮肤。手术后第2天开始灌胃给药,每日1次,连续7天。末次给 药后1h,处死大鼠,剥离出棉球肉芽组织,置70℃烘箱内干燥1h后称重,将称得的重量减去 棉球原重量即得肉芽肿重量。进行统计学处理(t检验)。结果见表4。表3苦丁冬青降火茶对大 鼠蛋清性足跖肿胀的影响(X±SD,n=10)组别剂量(g/kg)致炎后不同时间(h)足 肿胀度(mm)1h2h3h4h空白对照组—6·41±0·855·75±0·725·36 ±0·694·98±0·59乙酰水杨酸组0·24·42±0·67***3·32±0·7 9***2·95±0·51***2·56±0·52***苦丁冬青降火茶组405·23± 0·68**4·67±0·75**4·28±0·69**4·06±0·68**苦丁冬青 降火茶组205·56±0·78*4·95±0·61*4·62±0·56*4·21±0· 69*与空白对照组比较*P<0·05,**P<0·01,***P<0·001.表4苦丁 冬青降火茶对大白鼠棉球肉芽肿的影响(X±SD,n=10)组别(g剂/k量g)棉重球量肉 (芽mg)肿空白对照组—80·7±12·2乙酰水杨酸组0·264·6±7·2**苦丁冬 青降火茶组4066·7±8·3**苦丁冬青降火茶组2068·4±10·8*与空白对照组比较*P<0·05,**P<0·01.结果表明,苦丁冬青降火茶高、低剂量组和乙酰水杨酸组对大白鼠棉球肉芽肿有明显的抑制作用,显著抑制大白鼠棉球肉芽组织增生。3讨论苦丁冬青(IlexkudingchaC.JJsang)在广西大新县壮族民间又称为大叶茶,性味苦、甘、凉,具有清热解毒的功效〔5,6 〕。以苦丁冬青及桑叶、罗汉果、薄荷、栀子等制成的苦丁冬青降火茶,本实验结果表明,其对金 黄色葡萄球菌、大肠杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌、白色念球菌、肺炎杆菌等均具有较强的抑菌 作用;对二甲苯致小白鼠耳廓炎性肿胀及大白鼠蛋清性足跖肿胀等急性炎症模型具有明显的抑制作 用,对大鼠炎性棉球肉芽组织增生的慢性炎症模型也具有明显的抑制作用。显示苦丁冬青降火茶对 于急、慢性炎症具有明显的抗炎作用。综上所述,苦丁冬青降火茶具有明显的抑菌抗炎作用,在药 用方面具有较好的研究与开发价值。广西壮族民间用药苦丁冬青降火茶的抑菌抗炎作用研究@陈晓军$广西壮族自治区中医药研究所!广西南宁530022
@陈学芬$广西壮族自治区中医药研究所!广西南宁530022
@禤瑞生$广西壮族自治区中医学院!广西南宁530001苦丁冬青降火茶;;抑菌作用;;抗炎 作用目的:对苦丁冬青降火茶进行抑菌抗炎作用的药效学实验研究。方法:采用试管二倍稀释法观 察苦丁冬青降火茶的抑菌作用;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀,蛋清致大鼠足跖肿胀,大鼠棉球肉芽 肿法对苦丁冬青降火茶进行抗炎作用的研究。结果:苦丁冬青降火茶对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌 、甲型链球菌、乙型链球菌、白色念珠菌、肺炎杆菌等均具有较强的抑菌作用;对二甲苯致小鼠耳 廓炎性肿胀有明显的抑制作用,明显抑制大鼠蛋清性足跖肿胀,对大鼠炎性棉球肉芽组织增生有明 显的抑制作用。结论:苦丁冬青降火茶具有明显的抑菌抗炎作用。1 黄汉儒(壮族).中国壮医学.广西民族出版社,2000.2.
2 广西壮族自治区中医药研究所.广西药用植物名录.广西人民出版社,1986.281.
3 戴自英.临床抗菌药物学.北京:北京人民出版社,1985.7.
4 李仪奎.中药药理实验方法学.上海:上海科技出版社,1990,299300304.
5 黄燮才等.广西民族药简编.广西壮族自治区卫生局药品检验所印,1980.56
6 奇玲,罗达尚.中国少数民族传统医药大系.内蒙古科学技术出版社,2000.526量减去 棉球原重量即得肉芽肿重量。进行统计学处理(t检验)。结果见表4。表3苦丁冬青降火茶对大 鼠蛋清性足跖肿胀的影响(X±SD,n=10)组别剂量(g/kg)致炎后不同时间(h)足肿胀度(mm)1
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