前期研究已经证实缺血预处理 (ischemicpreconditioning ,IP)及加味丹参饮预处理能显著减少家兔缺血再灌注损伤心肌的缺血面积和梗死面积<1> ,能明显改善家兔左心室功能的变化<2 > ,本文拟在此基础上继续以心肌缺血再灌注损伤家兔为受试对象从家兔心电图变化来探讨该方的延迟 保护作用。1 材料与方法1.1 药物 加味丹参饮由丹参、檀香、赤芍、川芎、当归、红花、生地黄等中药组成。药材购自湖南中医学院杏林大药房。经鉴定后,各药按比例配合 ,水煎 2次 ,药液经 10 0 0r/min离心 10min去除杂质 ,以生理盐水调整药液浓度为每ml药液含生药 2g。临用时根据给药剂量和给药容积调整给药浓度。1.2 主要仪器 动物呼吸机 :DH - 14 0型 ,浙江医科大学医学仪器实验厂生产 ;四导生理记录仪 :包括RM6 2 80多导生理信号处理系统 ,成都仪器厂生产。1.3 动物及缺血再灌注模型建立<3 > 健康家兔 ,体重 2 .5kg～ 3.0kg ,雌雄兼用 (由湖南中医学院实验动物中心提供 ,合格证号 :医动字第 2 0 - 0 0 3号 )。家兔以 2 5 %的乌拉坦 (3～4ml/kg)经耳缘静脉注射麻醉后 ,背位固定。联接四道生理记录仪 ,记录标准Ⅱ导联心电图。在剑突右下方开一小口 ,分离十二指肠 ,以备给药。气管切开 ,连接动物呼吸机 (潮气量 2 1ml,频率 5 0次 /min)。沿胸骨左缘 3- 4肋间打开胸腔 ,暴露心脏 ,剪开心包膜做简易心包吊床 ,用止血钳轻轻提起左心耳 ,于心耳下左冠状动脉前降支上 1/ 3处穿线 ,在线两端各穿一结扎环 ,拉紧结扎环以阻断冠脉血流。以心电图出现弓背样抬高为结扎成功。1.4 分组及试验方法 健康家兔 32只 ,随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注组 (I/R)、药物预处理组 (DP)和缺血预处理组 (IP) ,每组 8只 ,雌雄不拘。 (1)Sham :第 1日开胸 ,冠脉穿线不结扎 ,十二指肠给予生理盐水 ,剂量为 5ml/kg ,1h后关胸 ;2 4h后再次打开胸腔 ,冠脉穿线不结扎。 (2 )I/R :第1日处理同Sham ;2 4h后再次打开胸腔 ,结扎冠脉 6 0min后恢复冠脉血流 12 0min。 (3)DP :第 1日除十二指肠给予相同体积的加味丹参饮煎液 (按 5 .86 g/kg给予兔生药 ,相当于70kg成年人临床等效剂量 )外 ,其余处理同Sham ;2 4h后再次打开胸腔 ,处理同I/R。 (4)IP :第 1日开胸后结扎冠脉5min ,再灌注 10min ,共反复 4次后关胸 ;2 4h后再次打开胸腔 ,处理同I/R组。各试验全程组动物耳缘静脉滴注 0 .9%生理盐水 ,以维持水、电解质平衡。1.5 反应指标检测方法 麻醉、固定后 ,联接心电图电极 ,分别于各时间点记录标准Ⅱ导联心电图 ,观察动物心率、ST段变化及出现室性早搏、室性心动过速和室颤等心律失常的动物数。1.6 统计学处理 计量资料用均数±标准差 ( X±S)表示 ,在SPSS10 .0统计软件上以方差分析和t检验进行统计分析。2 结果与分析2 .1 心率 试验前 ,各组心率基本一致 ;不同 (预 )处理 2 4h后 ,心率减慢 ,其中DPC组和IPC组减慢幅度较大 ;缺血再灌注过程中 ,各组心率继续减慢 ,以DPC组减慢幅度略大 ,但各组间差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。 (见附表 )附表 各时相心率变化 ( X±S)2 .2 Ⅱ导联心电图及ST段变化 每只家兔各时相Ⅱ导联心电图ST段幅度取 10个心动周期的均值进行统计处理。结果显示 ,Sham试验全程均为正常Ⅱ导联心电图 ,未出现明显异常波形。I/R第 1次开胸至 2 4h后再次开胸结扎冠脉前 ,Ⅱ导联心电图基本正常 ;冠脉结扎 6 0min和再灌注12 0min后 ,ST段明显抬高或T波倒置 ,与冠脉结扎前比较 ,抬高幅度有显著性意义 (P <0 .0 5 )。DP家兔在第 1次开胸并给予加味丹参饮至第 2次开胸并结扎前 ,Ⅱ导联心电图基本正常。冠脉结扎 6 0min及再灌注 12 0min后 ,ST段较冠脉结扎前明显抬高或T波倒置 (P <0 .0 5 ) ;与同期Sham比较 ,抬高幅度明显减少 (P <0 .0 5 )。IP家兔在 4次缺血预处理时Ⅱ导联心电图ST段有一定抬高或出现T波倒置或伴有心律失常 ,预处理 2 4h后心电图基本恢复正常。缺血 6 0min出现导致T波或ST段抬高 ,与缺血前比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ,与同期I/R比较 ,差异无显著性意义(P >0 .0 5 )。 (见图 1)2 .3 心律失常发生率 Sham家兔未发生心律失常现象 ;I/R心脏几乎多出现室性早搏、室性心动过速和心室纤颤等节律紊乱 ,发生率占 87.5 % (7/ 8) ;DP和IP发生率明显低于I/R组 ,分别为 5 0 .0 % (4/ 8)和 37.5 % (3/ 8)两组比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。 (见图 2 )提示加味丹参饮预处理及缺血预处理对缺血再灌注损伤所致的心律失常有较好的调节作用。3 讨 论缺血对心肌的损害在心肌缺血 2 0min后即进入不可逆损伤阶段。文献报道 (4) ,经过预处理的心肌超微结构的变化发生延迟 ,在持续缺血 4 0min后才出现不可逆损伤 ;而且预适应心肌缺血时能量代谢减弱 ,糖酵解降低 ,从而保存了ATP水平 ,减少了有毒代谢产物的堆积 (如乳酸 ) ,起到延缓细胞死亡 ,缩小心肌梗死范围的作用 ,前期研究结果基本与此一致 ,并且加味丹参饮预处理也存在同样的延迟保护作用<1> 。本实验结果显示 ,假手术组家兔实验全程均为正常Ⅱ导联心电图 ,未出现明显异常波形。缺血在灌注组家兔第 1次开胸至 2 4h后再次开胸结扎冠脉前 ,Ⅱ导联心电图基本正常 ;冠脉结扎 6 0min和再灌注 12 0min后 ,ST段明显抬高或T波倒置 ,与冠脉结扎前比较 ,抬高幅度有显著性意义(P <0 .0 5 )。加味丹参饮预处理组家兔在第 1次开胸并给予加味丹参饮至第 2次开胸并结扎前 ,Ⅱ导联心电图基本正常 ;冠脉结扎 6 0min及再灌注 12 0min后 ,ST段较冠脉结扎前明显抬高或T波倒置 (P <0 .0 5 ) ;与同期Sham比较 ,抬高幅度明显减少 (P <0 .0 5 )。缺血预处理组家兔在 4次缺血预处理时Ⅱ导联心电图ST段有一定抬高或出现T波倒置 ,预处理 2 4h后心电图基本恢复正常 ;缺血 6 0min出现导致T波或ST段抬高 ,与缺血前比较 ,差异有显著性意义(P <0 .0 5 )。以上结果进一步证实加味丹参饮预处理对家兔心肌缺血在灌注损伤有显著的延迟保护作用。另据报道<5> ,缺血再灌注性心律失常的发生与缺血时间的长短密切相关 ,心律失常发生的高峰出现在一个狭窄的“时间窗”内 ,那么预适应可能通过延缓细胞死亡 ,推迟这个时间窗。本实验结果显示 ,假手术组家兔在实验全程均未发生心律失常现象 ,而缺血在灌注损伤家兔心脏几乎多出现室性早搏、室性心动过速和心室纤颤等节律紊乱 ,发生率达 87.5 % ,加味丹参饮预处理和缺血预处理后心律失常发生率明显降低 ,分别为 5 0 .0 %和 37.5 % ,表明加味丹参饮预处理及缺血预处理对缺血再灌注损伤所致的心律失常有较好的调节作用加味丹参 饮预处理对缺血再灌注损伤家兔心电图改变的影响@黄政德$湖南中医学院!湖南长沙410007
@葛金文$湖南中医学院!湖南长沙410007
@张玉生$湖南中医学院!湖南长沙410007加味丹参饮;;缺血再灌注;;延迟保护;;预处 理;;心电图目的:探讨加味丹参饮预处理对缺血再灌注损伤家兔心电图的影响。方法:将健康家 兔32只,随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注组(I/R)、药物预处理组(DP)和缺血预处理组(IP),每组8只,分别预处理2 4h后行心肌缺血6 0min、再灌注12 0min ,观察家兔心率、Ⅱ导联心电图ST段等的变化。结果:I/R家兔标准Ⅱ导联心电图心率明显减慢、ST段明显抬高或T波倒置,并且绝大部分家兔出现心律失常(87.5 % ) ;而药物预处理和缺血预处理对ST段抬高或T波倒置以及心律失常有明显的改善作用(P <0 .0 5 ) ,对心率变化作用不明显(P >0 .0 5 )。结论:加味丹参饮预处理对家兔缺血再灌注损伤心肌有明显的延迟保护作用<1>黄政德,葛金 文,张玉生.加味丹参饮预处理对家兔心肌缺血再灌注损伤的延迟保护作用
.湖南中医杂志,2003,19(6):52
<2>黄政德,张玉生,葛金文.加味丹参饮预处理对缺血再灌注损伤家兔心功能的影响.湖南中医学院学报,2003,23(6):4
<3>WallTM ,SheehyR ,HartmanJC .Roleofbradykinininmyocardialpreconditioning.JPharandExTher,1994,270(2):269
<4>MurryCE ,RichardVJ,ReimerKA ,eta1.Ischemicprecon ditioningalowenergymetabolismanddelaysultras tructuraldamageduringasustainedischemicepisodes.CirRes,1990,66,913
<5>ShikiK ,Hea
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