随着人们对多糖认识的深入,以多糖为原料开发的生化制品、医药制品、保健食品等不断地出现在人 们的生活中。近年来,已证实具有抗疲劳作用的多糖有:枸杞子多糖、猴头菇多糖、螺旋藻多糖、 中华鳖多糖、仙人掌多糖、黄精多糖、五味子多糖等口。>,而关于海洋多糖的抗疲劳活性研究除 何德庆<8’做了部分相关研究外,尚未见国内有其他相关报道。本文选用在食品工业和医药工业 上应用广、来源丰、成本低,且生物活性多的5种海洋多糖:琼胶、卡拉胶、
羊栖菜多糖、褐藻糖 胶和壳聚糖(其中壳聚糖是海洋动物多糖,其余4种为海洋植物多糖)为实验材料,初步探讨了它们的抗疲劳作用效果,为海洋生物多糖活性研究做尝试性的探索。1实验材料1.1 海洋多糖 琼胶(市售);卡拉胶(市售);羊栖菜多糖(实验室制备);
褐藻糖胶(实验室制备)和壳聚糖(青岛百成海洋生物资源开发有限公司提供)。1.2主要试剂和仪器 36%甲醇;95%乙醇、钨酸钠、氟化钠、硫酸铜、对羟基联苯、乳酸钙、三氯二酸、蒽酮。均为AR级。《中国海洋药物》杂志2003年第2期(总第9l期) pH一3型数显酸度计;ZFQ85A型旋转蒸发器;40cmx 40cm×50cm玻璃游泳槽、722型光栅分光光度计。1.3 实验动物 昆明种小白鼠,6～8周龄,体重20±2g,雌雄各半,青岛市药检所提供。2 实验方法2.1 实验材料的制备 羊栖菜Satga5s越m如i如rmg(Ha rv.)Setch.由浙江温洞头县养殖厂提供。羊栖菜多糖按文献<9>方法制备;褐藻糖胶按 文献<10>方法制备,山东烟台海藻工业公司提供的淡干海带为原料提取;多糖粘度用配制成1 %热溶胶,NJ-50型旋转式粘度计测定;壳聚糖脱乙酰度按文献<11>方法测定。2.2动物实验方法2.2.1受试动物分组昆明种小白鼠,体重20±2g,随机分成6个组别(对照组,琼胶组,卡拉胶组.羊栖菜多糖组. 褐藻糖胶组、壳聚糖组),雌雄各半。分组后观察3d,剔除不合格个体后,进行实验。2.2.2受试动物给药剂量、方式及时间根据几种多糖的特性和受试动物的耐受性,同时为了便于实验结果的比较,采用统一的给药剂量10 0rag·(kg·d)一’和灌胃的给药方式:4种植物多糖配成0.5%混悬液,每日灌1次,每只每次0.4mL。对照组灌胃等剂量的去离子水。给药时间:小白鼠观察3d后,第4天开始灌胃给药至给药第14天结束。2.2.3耐力实验方法 给药至第14天,小自鼠灌胃o.5h后,进行耐力实验。本实验采用小白鼠负重游泳耐力实验。给已称重且标记好的小鼠负重(尾根部绑铅丝)6 9/6,放入25±1。C的水中,在水深30～40cm的体积为40cm×40cm×50cm 的玻璃水槽中游泳。每次同时放人2只小白鼠,不断轻轻搅动水面,使之不停运动,用秒表记录小 白鼠从入水至疲劳力竭时的游泳时间。小鼠头部全部没入水面以下8s不再上浮时,判定其游泳运动已至力竭<1引。2.2.4血乳酸的测定给药至第14天,小白鼠灌胃O。5h后,给小鼠负重4%,在水深40cm、水温30±l℃、体 积40cm×40cm×50cm的水槽中游泳30rain。每隔5min放入1只小鼠。游泳 槽中每次最多同时有5只小鼠。泳前安静时,及泳后休息20rain、50min各取尾血1次,用乙醛一对羟基联苯比色法测定血乳酸含量<1引。3结果与讨论3.1多糖对小鼠游泳耐力的影响 耐力实验是抗疲劳研究必测指标,能够从宏观角度反映机体运动耐力的强弱。一般采用小鼠负重游泳 实验来研究抗疲劳物质对提高机体运动耐力的作用。各多糖组小鼠负重游泳记录的时间经过统计学处理并经￡检验后,结果见表1。由表1可看出各多糖组与空白组相比,除壳聚糖组外均无显著差异(P
浓度上升 ,pH值下降,是导致疲劳的重要因素。乳酸在体内的积累取决于乳酸的产生与消除速度,而减少 乳酸的产生或加快乳酸的消除,都可延缓疲劳发生或加速疲劳的消除。肌肉中产生的乳酸会很快渗 透进入血液_1副,使血乳酸浓度迅速升高。血乳酸水平可以反映有氧代谢能力、疲劳的产生和消 除速度。表2为各实验动物组在游泳前后及泳后休息20min、50min时血乳酸的变化值经统计学方法处理并经t检验比较后的结果。表2多糖对实验小自鼠负重4%游泳前后 血乳酸含量的影响Ij±s,:mg·100rrlL。)注:PO.05),而壳聚糖组小鼠的血乳酸与空白对照组 相比,有显著性差异(尸O.05)。表3为各组小鼠游泳后休息20min至休息50min时血乳酸的恢复速率,通过比较可显示出各 种多糖对实验小鼠疲劳运动后血乳酸消除作用的差异。血乳酸恢复速率(mg·100ml。。·ITII‘11’)一逮蜃!!raiin塑查塾醒堡二鲨蜃!!raiin塑查塾墼笪30mir0表3对血乳酸恢复速率的影响(;±s,mg·100mI。。·。ITII‘Yl。)注:**PO.05)。肌肉中乳酸的大量堆积是运动性疲劳发生的主要因素之一 <1“。血乳酸恢复速率大,则堆积的乳酸消除快,即运动机体疲劳恢复的速率快,由此可以说明壳聚糖具有抗疲劳的活性。4小结 通过耐力运动实验和血乳酸变化这～生化指标的实验表明,琼胶、卡拉胶、羊栖菜多糖、褐藻糖胶、 壳聚糖5种多糖中,壳聚糖能显著延长小白鼠负重游泳时间,能有效减轻运动机体中乳酸的堆积并 能迅速消除堆积的乳酸,增强有氧代谢耐力,提高小白鼠机体运动。能力,从而延缓小鼠机体疲劳 的发生并加速疲劳的恢复。实验表明壳聚糖具有极显著的抗疲劳活性(P @李八方$中国海洋大学!山东 青岛 266003
@胡建英$中国海洋大学!山东 青岛 266003
@陈桂东$中国海洋大学!山东 青岛 266003海洋多糖;; 抗疲劳;;壳聚糖方法:通过动物实验,研究了5种海洋多糖(琼胶、卡 拉胶、羊栖菜多糖、褐藻糖胶、壳聚糖)对小鼠游泳时间及运动后血乳酸值变化的影响。结果:壳 聚糖可显著延长小鼠游泳时间,并可减缓运动小鼠体内血乳酸的堆积,加快运动后小鼠体内血乳酸的消除速率。提示:壳聚糖具有抗疲劳作用。<1>罗琼,阎俊,李谨玮,等.枸杞多糖粗品与纯品抗疲劳作用的比较.营养学报,1999,21(3) :310．
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