荷叶 (Folium Nelum binis)是睡莲科植物莲 (Nelumbonucifera Gaevtn)的干燥叶 <1 >。主产于湖南、湖北、浙江、江苏等地 <2 > 。具有清暑利湿、升发清阳、凉血止血之功效 <1 > 。现代临床广泛应用于肥胖症及高血脂症 ,并取得了较好的疗效 <3> ,但目前对荷叶的开发还不够。本文采用 TL C法和紫外分析法对不同溶媒中荷叶的化学成分进行了初步的研究 ,并比较了不同展开体系对其化学成分的分离效果 ,为荷叶的开发利用奠定了基础 ,为荷叶的临床应用提供了理论依据。1 仪器与试药UV— I型紫外分析仪 :上海顾村电光仪器厂 ;硅胶 G;中国雁荡山试剂厂 ;新华滤纸 ;中国·杭州新华造纸厂 ;芦丁、槲皮素 ;中国药品生物制品检定所 ;荷叶购于佳木斯大学医学院药店 ;其他试剂均为分析纯。2 实验方法与结果2 .1 样品处理及对照液的配制1荷叶水提取液的制备 称量粉碎的荷叶 10 g于烧杯中 ,加蒸馏水 10 0 m l,于 10 0℃水浴加热 30 m in,冷却过滤 ,得供试液 。 2荷叶乙醇浸取液的制备 称量粉碎的荷叶 10 g两份 ,分别置于试剂瓶中 ,分别加入 70 %、 95 %的乙醇各10 0 ml,室温浸泡 2 d,过滤 ,得供试液 、 。 3荷叶石油醚浸取液的制备 称量粉碎的荷叶 10 g于试剂瓶中 ,加入 10 0 m l石油醚 ,室温浸泡 7d,过滤 ,得供试液 。 4芦丁对照品溶液的制备 称取芦丁对照品 5 mg,加甲醇 2 m l,摇匀 ,即得。 5槲皮素对照品溶液的制备 称取槲皮素对照品 6 mg,加甲醇2 ml,摇匀 ,即得。2 .2 荷叶中黄酮类成分 TL C<4、5、7>比较照薄层色谱法 (《中国药典》2 0 0 0年版一部附录 VIB)试验 ,吸取供试液 、 、 、芦丁对照液、槲皮素对照液分别点于同一硅胶薄层板上 ,以正丁醇 :醋酸 :水 (4 :1:5 )为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷 1%三氯化铝乙醇试剂 ,待挥干后 ,于紫外灯下 (36 5 nm)观察。结果显示 ,荷叶供试液 、 、 都含有相同的三种黄酮类成分 ,供试液 另外含有一种不同的黄酮类成分。荷叶各供试液中都不含有芦丁和槲皮素。四种黄酮类成分对 2 %的三氯化铁—铁氰化钾 (临用等量混合 )均显蓝色 ,说明它们都含有酚羟基。2 .3 荷叶中生物碱类成分 TL C比较 <6、7、8>照薄层色谱法 (《中国药典》2 0 0 0年版一部附录 VIB)试验 ,吸取供试液 、 、 分别点于同一硅胶薄层板上 ,以正丁醇 :醋酸 :水 (4 :1:5 )为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷碘—碘化钾试剂 ,待挥干后 ,观察。结果显示 ,荷叶供试液 、 含有相同的一种生物碱 ,供试液 III含有不同于 、 的两种生物碱。2 .4 荷叶中有机酸类成分 TL C比较 <7、9>照薄层色谱法 (《中国药典》2 0 0 0年版一部附录 VIB)试验 ,吸取供试液 、 、 分别点于同一硅胶薄层板上 ,以正丁醇 :醋酸 :水 (4 :1:5 )为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷溴酚兰试剂 ,待挥干后 ,观察。结果显示 ,荷叶供试液 、 均含有相同的两种有机酸 ,且斑点很大 ,说明含量较大 ,供试液 不含有机酸。2 .5 荷叶中氨基酸类成分 TL C比较照薄层色谱法 (《中国药典》2 0 0 0年版一部附录 VIB)试验 ,吸取供试液 、 、 分别点于同一硅胶薄层板上 ,以正丁醇 :醋酸 :水 (4 :1:5 )为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷茚三酮试剂 ,高温下烘干后 ,观察。结果显示 ,荷叶供试液 、 含有相同的三种氨基酸 ,其中一种氨基酸对溴酚兰显深蓝色说明它是一种碱性氨基酸 ,供试液 不含有氨基酸。2 .6 荷叶中挥发油类成分 TL C比较 <7、9>照薄层色谱法 (《中国药典》2 0 0 0年版一部附录 VIB)试验 ,吸取供试液 点于三块硅胶薄层板上 ,分别以氯仿 :乙酸乙酯 (2 :1)、氯仿 :乙酸乙酯 (7:2 )、氯仿为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷茴香醛 -浓硫酸试剂 ,烘干后 ,观察。结果显示 ,荷叶含有三种挥发油类成分 ,且不同展开剂对挥发油的分离效果不同 ,其中以氯仿为展开剂分离效果较好。2 .7 展开体系的摸索为了更好的体现化学成分的种类及含量进行了展开体系的摸索。照薄层色谱法 (《中国药典》2 0 0 0年版一部附录VIB)试验 ,吸取供试液 、 点于七块硅胶薄层板上 ,分别以正丁醇 :醋酸 :水 (4 :1:5 )、正丁醇 :醋酸 :水 (6 :1:5 )、氯仿 :甲醇 :甲酸 (15 :5 :1)、85 %乙醇、甲醇 :水 (1:1)、氯仿 :甲醇 (7:1)、乙醇 :乙酸 (1:1)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷 1%三氯化铝乙醇试剂 ,挥干后 ,观察。结果显示 ,不同展开剂对荷叶化学成分的分离效果不同 ,其中以正丁醇 :醋酸 :水 (4 :1:5 )为展开剂分离效果较好。3 讨论目前 ,对荷叶化学成分研究较多的是黄酮类和生物碱类 <4、8> ,其他成分包括荷叶的清香成分研究的较少 ;其应用常见于生活饮食或简单的粗制剂。本试验应用 TL C法对荷叶中含有的黄酮类、生物碱、有机酸、氨基酸、挥发油进行了初步系统的分析 ,为其深入全面开发利用奠定了基础。随着国内外肥胖症、高血脂症患者与日俱增 ,降脂减肥食品和药品具有很大的市场 ,荷叶以其资源丰富、具有较好的降脂减肥疗效而显现出巨大的开发应用前景。本试验为荷叶有效成 分的临床应用提供了理论基础。荷叶化学成分的分离分析@聂波$佳木斯大学化学与药学院!黑龙江佳木斯154007
@佟丽华$佳木斯大学化学与药学院!黑龙江佳木斯154007
@于敏$佳木斯大学科技处!黑龙江佳木斯154007荷叶;;黄酮;;薄层分析目的:对荷叶中的化学成分进行分离分析。方法:采用溶剂提取法、TL C法对荷叶中化学成分进行分离分析。结果与结论:显示荷叶中含有黄酮类、生物碱类、有机酸、氨基酸、挥发油。展开体系以正丁醇:醋酸:水(4 :1:5 )分离效果好。<1>国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)
.北京:化学工业出版社,2000,231
<2>郑虎占,董泽宏,佘靖.中药现代研究与应用.(第1版)北京:学苑出版社,1998,3583
<3>陶波,陈慕英,李晓宁,等.荷叶药用研究概况.中国中医药信息,2001,18(2):14
<4>陈海光,余以刚,曾庆孝.荷叶功能成分的提取研究.食品与机械,2001,(5):16
<5>黄阿根,钱建亚,谭道经,等.荷叶黄酮提取工艺研究.食品与机械,2000,(5):14
<6>刘密新,吴筑平,杨成对,等.荷叶精油与生物碱的分析研究.清华大学学报(自然科学版),1997,37(6):35
<7>翁榕安,邓文艳、李顺祥,等.荷叶、莲子心化学成分的薄层比较分析.湖南中医药导报,2001,7(12):608
<8>陈海光,余以刚,曾庆孝.荷叶黄酮及生物碱的提取研究.食品科学,2002,23(1):69
<9>吕武清,龙新华.中成药中的药材薄层色谱鉴别(第2版).北京:人民卫生出版社,1997,2涯舅?54007
@佟丽华$佳木斯大学化学与药学院!黑龙江佳木斯154007
@于敏$佳木斯大学科技处!黑龙江佳木斯154007荷叶;;黄酮;;薄层分析目的:对荷叶中的化学成分进行分离分析。方法:采用溶剂提取法、TL C法对荷叶中化学成分进行分离分析。结果与结论:显示荷叶中含有黄酮类、生物碱类、有机酸、氨基酸、挥发油。展开体系以正丁醇:醋酸:水(4 :1:5 )分离效果好。<1>国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部).北京:化学工业出版社,2000,231
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