覆盆子 ,别名悬钩子、托盘 ,落叶灌木 ,喜生于山地草原、灌木丛中 ,阿尔泰山、天山山区有分布。覆盆子果民间用于治疗阳萎、遗精、早泄、小便频多、妇女白带、月经过多、肝脾肿大等症 <1 > 。近代药理临床研究 ,覆盆子果具有雌激素样作用和较好的抑菌作用 <2 >。文献报道 ,覆盆子果含有机酸、糖类、维生素等 <1 > ,黄酮成分未见报道。为了进一步开发利用这一药用植物资源 ,我们运用微波技术从覆盆子果中提取总黄酮 <3,4 > ,并测定其含量<5,6 > ,反应速度加快 ,实验结果令人满意。1 仪器、试剂及样品U V- 2 4 0 1型分光光度计 (日本岛津 ) ;MCL- 3型连续微波反应器 (四川大学无线电系 )。对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所。试剂均为分析纯。覆盆子果采自新疆天山 ,果实秋季近成熟时采集凉干 ,破碎后备用。2 方法与结果2 .1 测定方法依据以芦丁为对照品测定覆盆子果中总黄酮含量 ,加入铝离子试剂 ,同时控制适宜 p H值 ,使黄酮化合物与铝盐形成络合物在可见区能获得稳定的特征吸收峰。2 .2 测定方法建立2 .2 .1 样品处理 覆盆子果经粉碎后过 6 5目筛 ,细粉于烘箱中 6 0℃干燥 4 h待用。2 .2 .2 标准曲线制备 精密称取 12 0℃干燥恒重的芦丁标准品 10 mg,加 85 %乙醇溶解 ,定容至 5 0 ml容量瓶中 ,摇匀 ,制成浓度为 0 .2 m g/ m l的标准器溶液。分别取标准品溶液 0 .0、0 .2、0 .5、1.0、2 .0、3.0、4 .0 ml于 10 m l容量瓶中 ,加 5 %亚硝酸钠 0 .4 ml,放置 6 min后 ,加 10 %硝酸铝 0 .4 m l,放置 6 min,再加4 %的氢氧化钠 4 ml,加水至刻度 ,摇匀 ,放置 15 min,进行全波长扫描 ,在 5 10 nm处均有最大吸收。以测定结果计算得直线方程 C=79.2 2 A- 0 .4 6 6 ,r=0 .9978。2 .2 .3 供试品溶液制备 精密称取样粉 1g于烧瓶中 ,加入85 %乙醇 6 0 ml,将此烧瓶放入 MCL - 3型连续微波反应器中 ,调整功率 4 0 0 W,反应时间 2 0 m in。将提取液转移到 10 0 ml容量瓶中 ,用 85 %乙醇定容 ,作为供试器溶液。2 .2 .4 样品含量测定 精密吸取供试品溶液 2 .0 ml,置 10 m l容量瓶中 ,按与标准曲线相同的方法显色测定。通过标准曲线 ,计算出样品总黄酮平均含量为 0 .95 1%。表 1 覆盆子果中总黄酮含量测定次数称重 (g)黄酮含量 (% ) X± S RSD(% )11.0 3 810 .95 72 1.0 0 470 .93 40 .95 1± 0 .0 15 1.5 73 1.0 44 0 0 .9622 .2 .5 回收率试验 取已知黄酮含量的供试品溶液 1ml于10 ml容量瓶中 ,再加入 0 .2 m g/ ml的标准品溶液 1.0 ml,依法测定 ,结果平均回收率为 96 .78% ,RSD=1.0 3% (n=6 )。表 2 回收率试验结果试号对照品加入量 (mg)测得总黄酮量 (mg)回收率 (% )10 .2 0 0 0 .2 13 497.3 22 0 .2 0 0 0 .2 10 495 .983 0 .2 0 0 0 .2 114 96.414 0 .2 0 0 0 .2 13 5 97.405 0 .2 0 0 0 .2 15 198.1060 .2 0 0 0 .2 0 93 95 .463 讨论近年来大量的药理研究表明 ,黄酮类化合物有抗血栓、抗氧化、抗衰老、增加白细胞、抗动脉硬化、抗心率失常和抑制HIV等作用 <7> ,因而广泛用于医药、食品、饮料、化妆品、卷烟等行业 ,开发应用的前景极广。微波技术应用于植物细胞破壁 ,可以大大地加快反应速度 ,有效地提高收率。本实验首次采用微波技术提取覆盆子果总黄酮 ,大大缩短了提取时间 ,提高了提取效率 ,为该药材的进一步研究和合理利用提供了基础资料。覆盆子果总黄酮的微波提取及含量测定@孙萍$石河子大学师范学院!石河子832002
@李艳$石河子大学师范学院!石河子832002
@杨秀菊$乌鲁木齐市口腔医院微波技术;;覆盆子果;;总黄酮;;提取;;含量测定运用微波技术提取覆盆子果总黄酮 ,用比色法测定总黄酮含量。结果显示 ,测得覆盆子果中总黄酮含量 0 .95 1% ,平均回收率为 96.78% ,RSD=1.0 3 % (n=6)。1 《新疆中草药》编委会.新疆中草药
.新疆:新疆人民出版社,1976,260～261.
2 《中华本草》编委会.中华本草.上海:上海科学技术出版社,1999,4(2):247～250.
3 曾昭钧,李香文.微波有机化学进展.沈阳药科大学学报,1999,10:304～309.
4 张代佳,刘传斌,修志龙,等.微波技术在植物细胞内有效成分提取中的应用.中草药,2000,31(9):附5～6.
5 梁生旺,刘伟,主编.中药制剂定量分析.北京:中国中医药出版社,1997,202～203.
6 任爱农,鞠建明.野菊不同部位的总黄酮含量测定.中草药,1999,30(8):589
7 韩公羽,沈企华.植物药有效成分的研究与开发.杭州:杭州大学出版社,1991,94～102石河子大学青年科研基金项目
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