脂质体用于皮肤给药已有 2 0多年的历史 ,目前研究最多的是普通脂质体 ,关于普通脂质体的作用机制、影响因素及应用进展 ,国内外多有报道<1～ 4> ,一般认为普通脂质体应用后 ,不能透过皮肤 ,仅产生局部作用 ,目前主要用于治疗皮肤病<5～ 6> 。近年来Cevc等<7> 研制出传递体用于大分子药物的传递 ,取得令人满意的结果。Cevc等<8> 认为传递体能穿透皮肤 ,并探讨了其透皮机制<9> 。但是传递体易泄漏药物 ,长期放置粒径增大 ,而粒径增大不利于传递体透皮传递<10 > 。最近 ,Touitou等<11～ 13 > 的研究小组对另一种新型脂质体———含醇脂质体进行了研究 ,在普通脂质体的处方中添加高浓度醇制备含醇脂质体 ,工艺简单 ,包封率高 ,适用于多种药物 ,与普通脂质体相比 ,显著提高了透皮速率及皮肤滞留药量 ,透皮机制又不同于传递体及普通脂质体。本文就其性质特点、透皮机制及应用进展作综述。1 含醇脂质体的性质特点含醇脂质体是指含醇量高的脂质体 ,Touitou等<14 > 对含醇脂质体作了系统研究 ,优化处方主要采用乙醇、丙二醇 ,含醇量一般在 2 0 %～ 5 0 %。含醇脂质体的处方主要含有磷脂、高浓度醇和水。实验证实含醇脂质体在高浓度乙醇中不仅保持结构稳定 ,还显著促进了药物的透皮吸收。研究还发现 ,此类脂质体能传递药物至皮肤深层 ,甚至透过皮肤进入血液循环。1.1 特 征1.1.1 外观 透射电镜下观察 ,含醇脂质体为单室或多室的泡囊 ,扫描电镜结果肯定其立体结构。采用常磁离子核磁技术测定囊体膜的结构及渗透性 ,结果表明 ,磷脂材料组成双分子层结构并形成致密的泡囊 ,但对亲水性物质的渗透性高于普通脂质体。另外 ,用荧光标记的磷脂材料制备的含醇脂质体与相同材料制备的无醇脂质体相比 ,发射波长几乎一致 ,表明含醇脂质体能稳定存在于 30 %的乙醇溶液中 ,即使有磷脂溶解 ,量也相当少。在高达 4 5 %的乙醇溶液中 ,含醇脂质体的膜结构仍保持屏障功能。1.1.2 粒径及表面电势 乙醇、磷脂浓度对含醇脂质体的粒径大小及粒度分布均有影响 ,一般囊体粒径随乙醇浓度升高而减小 ,随磷脂浓度升高而增大。乙醇对粒径的影响更为显著 ,含乙醇 2 0 % ,平均粒径为 (193± 8)nm ,乙醇浓度增加至 4 5 % ,平均粒径为 (10 3± 9)nm ,而磷脂浓度增加 8倍(0 .5 %～ 4 % ) ,平均粒径仅增加 2倍。乙醇还改变了脂质体的表面电势 ,不含醇的脂质体带正电荷 ,乙醇浓度 30 %时变为带负电荷 ,药物也会影响含醇脂质体的表面电势 ,表面电势不同 ,会影响脂质体稳定性及透皮性能。1.1.3 膜的柔性 用磷脂及胆固醇制备的普通脂质体 ,双分子层形成稳定的膜 ,相变温度为 6 .3℃ ,而用相同材料制备的含醇脂质体相变温度为 - 15 .2℃ ,低于普通脂质体 ;另外 ,用荧光磷脂材料制备的含醇脂质体荧光各向异性低于相应的普通脂质体。以上结果表明含醇脂质体的膜流动性较强 ,双分子层排列较疏松 ,囊体柔软可变形 ,有利于透皮传递。1.2 工艺简单制备含醇脂质体无须除去乙醇等有机溶剂 ,因此没有制备普通脂质体所需的成膜、水化等过程。典型制法<15> :磷脂材料、亲脂性药物溶于乙醇或乙醇、丙二醇的混合溶液 ;亲水性药物溶于双蒸水 ,其他附加剂视其亲水亲脂性溶于不同溶液中。在密闭容器中持续搅拌下 ,水溶液缓慢加到醇溶液中 ,继续搅拌 5min ,整个过程恒温 30℃ ,然后冷至室温。也可将磷脂材料分散于较高温度的水中 ,得到胶体溶液后 ,恒速搅拌下加入含药的乙醇或乙醇、丙二醇的混合溶液。制备的含醇脂质体均一化后 ,以适宜的比例与卡泊姆、PVP/VA等基质混合 ,可制成适用的凝胶剂、贴片等制剂。1.3 高包封率<14 >对不同性质的荧光物质的包封实验表明 ,含醇脂质体对亲脂性、两亲性、亲水性物质都有很高的包封率 ,与普通脂质体相比 ,对亲脂性、两亲性物质还提高了载药率。共焦激光扫描电镜观察到亲脂性的罗丹明红、两亲性的D 2 89<钙黄绿素 ,4 (4 diethylamino)styryl N methylpyridiniumiodide>主要分布于普通脂质体的类脂双分子层 ,而在含醇脂质体中则分布于整个囊体 ,包括水性中心和类脂双分子层。高包封率可能是脂质体的多层膜及乙醇增溶作用的结果。含醇脂质体对亲水性物质的包封率不如亲脂性物质 ,与普通脂质体相比 ,易泄漏亲水性物质。尽管如此 ,亲水性物质钙黄绿素(calceine)的含醇脂质体透皮性能仍优于普通脂质体。1.4 高渗透性能<14 >多种药物制成含醇脂质体后 ,体内外透皮实验表明透皮吸收效果都优于普通脂质体制剂。如罗丹明红含醇脂质体、罗丹明红 30 %乙醇溶液及普通脂质体体外透皮实验 ,普通脂质体只能传递到皮肤上层 ,且药量很少。罗丹明红含醇脂质体、罗丹明红 30 %乙醇溶液能透到皮肤 14 0 μm处 ,透皮药量远高于普通脂质体 ,二者相比 ,罗丹明红含醇脂质体的透皮药量又高于其 30 %乙醇溶液。亲脂性药物米诺地尔、睾酮及亲水性药物咖啡因、双氯芬酸钠等含醇脂质体体内外实验均得到类似结果。实验还发现 ,含醇脂质体透皮 2 4h后 ,接收液检测到磷脂和乙醇 ,说明含醇脂质体透过了皮肤 ,传递过程中可能发生了解离 ,或与皮肤类脂相互作用形成了新的共聚体。1.5 稳定性稳定性实验 ,用动态光散射法测量不同批次、不同保存时间的含醇脂质体的平均粒径、粒径分布 ,结合电镜观察含醇脂质体的结构 ,表明含醇脂质体室温保存 2年 ,平均粒径、粒径分布及囊体结构保持不变。2 含醇脂质体的透皮机制2 .1 处方因素含醇脂质体的特点在于含有高浓度的醇 ,包括碳原子数小于四的单元醇和多元醇 ,如乙醇、丙二醇、异丙醇等。优化处方中主要应用乙醇、丙二醇。高浓度的醇可增加药物在角质层的溶解度 (活度 ) ,还能使角质层脱水和脱脂 ,保持长时间的促渗效果。Touitou<14 > 认为 ,乙醇一方面改变了角质层脂质分子的紧密排列 ,增强了脂质流动性 ,另一方面高浓度的乙醇增强了含醇脂质体膜的柔性和流动性 ,使含醇脂质体在传递过程中可发生变形 ,透过紊乱的角质层 ,增强了渗透能力。传递过程中含醇脂质体可能与角质层脂质融合、释放药物 ,这种脂质融合同时增强了渗透性。Kirjavainen等<16> 研究了乙醇对普通脂质体的促渗作用 ,发现乙醇能促进角质层脂质分子与脂质体互相融合 ,这种融合作用与乙醇浓度、磷脂材料有关。在pH 7.4磷酸缓冲液中 ,没有或仅有少量脂质体与角质层脂质融合 ,当乙醇浓度升高至 32 % ,脂质体与角质层脂质发生显著的融合现象 ,并引起脂质体内药物的释放 ,而脂质体本身在 32 %乙醇溶液中几乎不会释放药物。体外渗透实验还发现 ,醇浓度升高 ,透皮药量、透皮速率升高。改变处方组成如使用异丙醇或其他磷脂材料 ,也可改变药物的渗透行为<15> 。2 .2 脂质体结构含醇脂质体的高渗透性能与脂质体的囊体结构相关。米诺地尔含醇脂质体透皮接收药量、皮肤滞留药量显著高于相同磷脂浓度的乙醇液 ,预示囊体结构有促渗作用<14 > 。对传递体的研究也证实了脂质体结构的重要性。毛囊皮脂腺途径也可能是含醇脂质体的重要传递途径 ,如米诺地尔含醇脂质体在皮脂腺的累积量显著高于在表皮的累积量<17> 。普通脂质体也有这种靶向传递现象 ,可能与脂质体结构有关。另外 ,含醇脂质体在应用于皮肤后 ,乙醇的渗透和挥发改变了制剂中醇水的比例 ,在透皮传递的同时含醇脂质体在皮肤表面融合 ,最终形成脂膜 ,具有储库作用<15> 。3 含醇脂质体的应用目前用于含醇脂质体研究的药物有抗真菌药、非甾体抗炎药、激素类、抗病毒药以及大分子药物等 ,如米诺地尔、双氯芬酸钠、睾酮、黄体酮、阿昔洛韦、超氧化物歧化酶 (SOD)、胰岛素 ,体内外实验与普通脂质体相比明显提高了渗透性能。3.1 亲脂性药物米诺地尔含醇脂质体与含药量相同的 2 %磷脂乙醇液、30 %乙醇液、乙醇溶液体外透皮实验相比 ,接收液累积量Qr前者分别是后者的 10 ,4 5 ,35倍 ,皮肤滞留量Qs前者分别是后者的 2 ,7,5倍<14 > 。提高处方中乙醇浓度 ,效果更明显<15> 。睾酮制成含醇脂质体后 ,分散于PVP/VA共聚物中制成贴片Testosome<14 > ,以美国Alza公司的睾酮贴片Testo derm为对照 ,载药量均为 0 .2 5mg/cm2 。体外渗透实验采用Franze扩散池 ,皮肤取自兔耳部内侧 ,贴片应用 2 4h后 ,分别测定接受介质中的累积药量Qr及皮肤中的滞留药量Qs。Qr ,Testosome高于Testoderm30倍 <(84 8.16± 15 8.38) μg∶(2 7.79± 16 .2 3) μg>,Qs,Testosome高于Testoderm7倍<(130 .76± 18.14 ) μg∶(18.32± 4 .0 5 ) μg>。为进一步验证Testosome的优越性 ,进行体内实验的比较。一期实验单次给药 ,Testosome与对照用于兔耳内侧皮肤 2 4h ,在不同时间点取血样 ,测定血药浓度。二期实验多次给药 ,二周期交叉给药 ,洗净期至少 7d。Testosome与对照用于兔耳内侧皮肤 ,每日一贴 ,连用 5d ,在设定的时间点测定血药浓度 ,同时测定贴片的残余药量。结果表明 ,单次给药实验组与对照组无显著性差别 ,多次给药实验组与对照组有差别。实验组的AUC ,cmax分别为 (81.32± 33.5
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