细辛脑 (asarone)是中药石菖蒲的主要有效成分之一 ,现已人工合成制成片剂和注射剂。该药治疗慢性气管炎、支气管哮喘和癫痫大发作均有较好的疗效 ,且不良反应少<1.2 > 。但是 ,细辛脑的理化性质较特殊 ,制成片剂有一定难度。本文对两种不同生产工艺的细辛片剂进行了生物利用度研究。1 材料LC - 6A型HPLC仪 ,包括RF - 5 35型荧光检测器 (日本Shimadzu) ;细辛脑片剂 1(按生产工艺 1制备 ) ,细辛脑片剂 2 (按生产工艺 2制备 ) ;细辛脑注射液 (桂林制药二厂 ,批号 9810 0 6 ) ;细辛脑对照品 (桂林制药二厂 ) ;甲醇为优级纯 ,其余试剂为分析纯。2 方法2 .1 受试者选择 18名健康志愿者 ,男 ,年龄 2 2～2 5岁 ,平均体重 (5 7.9± 5 .2 )kg。受试者均无嗜烟、酒史 ,肝、肾功能、心电图等检查项目均属正常范围 ,实验前 1个月内至实验完毕均未服用其他药物。2 .2 给药方法 交叉试验设计。 18名受试者随机平均分为 3个组 ,每组交叉给予片剂 1,
片剂 2和针剂 ,剂量口服为 12 0mg(6 0mg ,2片 ) ,静脉注射为16mg(8mg ,2支 )。交叉给药间隔清洗期为 1周 ,于实验日晨空腹给药 ,口服给药用 10 0mL温开水送服。静脉给药先将细辛脑溶解于 2 0 %葡萄糖注射液 4 0mL中 ,缓慢推注。给药前 12h至给药后 4h内禁食 ,保持正常饮水量和活动量 ,不喝咖啡、茶等饮料 ,统一进食低脂肪餐。2 .3 血样采集 静脉留置针取血 ,于用药前及用药后 0 .2 5 ,0 .5 ,1,1.5 ,2 ,3,4 ,6 ,9,10h采集静脉血。血样离心分离后 ,取血清置于 - 2 0℃保存 ,12h内测定。2 .4 血清细辛脑浓度测定2 .4 .1 色谱条件 色谱ShimpackCLC -ODS(6 .0mm× 15 0mm) ;保护柱ShimpackG -ODS(4.0mm× 10mm ) ;流动相甲醇 水 (80∶ 2 0 ) ,流速 1mL·min- 1;柱温 4 0℃ ;荧光激发光波长 2 6 5nm ,发射波长 36 5nm。2 .4 .2 血样处理 用二氯甲烷提取血清中细辛脑 ,并氮气吹干 ,残留物用甲醇溶解后进样HPLC。2 .5 数据处理 AUC用实测值梯形法计算 ,Cmax,Tmax由实测值直接计算得到。AUC、Cmax、Tmax 的生物等效性检验采用常用对数值直接计算<3> 。
绝对生物利用度 (F) =AUC0→∞(片剂 )AUC0→∞(针剂 ) × 1612 0× 10 0 %以片剂 1为参比制剂 ,评价两种片剂生物利用度 :
相对生物利用度 (F) =AUC0→∞(片剂 2 )AUC0→∞(针剂 1) ×10 0 %3 结果3.1 测定方法学评价3.1.1 色谱行为 于选定的色谱条件下 ,细辛脑保留时间为 7.6 8min ,峰形对称陡峭 ,无内源性物质干扰。3.1.2 标准曲线范围及最低检出浓度 标准曲线范围为 1～ 2 0 0 μg·L- 1,在此范围内选择 6个浓度点1,5 ,2 5 ,5 0 ,10 0 ,2 0 0 μg·L- 1,细辛脑血清浓度与荧光吸收值呈良好的线性关系 ,方程为Y =2 0 .87X -7.98,r =0 .9998。血清最低检出浓度 0 .2 μg·L- 1。3.1.3 方法回收率与精密度 于标准曲线范围内 ,选择 2 .5 ,10 ,4 0 ,75 ,15 0 μg·L- 15个浓度点进行方法学回收率实验 ,每个浓度点日内平行操作测定 3次 ,日间平行操作测定 5次。结果 ,方法学回收率平均为 (10 1.2± 1.8) % ,日内RSD <6 .74 % ,日间RSD <4 .95 %。3.2 细辛脑血清浓度测定值 18名受试者口服12 0mg及静脉注射 16mg细辛脑药 时血清平均浓度值见表 1。药 时曲线见图 1。表 1 细辛脑血清浓度平均值 (μg·L-1)Tab 1 Meanvaluesofasaroneconcentrationinserum (μg·L-1)时间 /h片剂 1(12 0mg)片剂 2 (12 0mg)针剂 (16mg)0 .2 5 16.9± 7.93 7.7± 17.92 0 9.6± 41.70 .5 40 .3± 19.966.9± 3 0 .915 8.8± 2 8.915 3 .6± 2 5 .3 80 .7± 3 4.482 .8± 15 .61.5 46.4± 2 1.3 73 .1± 3 2 .0 41.2± 7.52 2 8.8± 13 .0 5 4.3± 2 3 .73 1.7± 5 .43 14 .6± 6.42 9.8± 13 .0 19.7± 2 .847.1± 3 .3 15 .9± 6.914 .8± 2 .663 .3± 1.5 7.3± 3 .110 .1± 1.992 .2± 1.0 4.5± 2 .0 5 .9± 1.310 1.9± 0 .93 .8± 1.7 4.6± 1.23.3 生物利用度参数 细辛脑片剂 1、片剂 2和针剂的生物利用度参数AUC0→∞ 、Tmax、Cmax 值见表2。经方差分析 ,Tmax片剂 1和片剂 2差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,而AUC0→∞ 和Cmax片剂 2明显大于片剂 1,差异有极显著性 (P <0 .0 1)。生物等效性检验 ,经对数转换后直接计算<3> ,以 80 %～ 12 5 %为等效标准 ,结果双向t检验及 95 %的置信度证实 ,图 1 18例志愿者单次口服 12 0mg和静脉注射 16mg细辛脑平均血清药物浓度 时间曲线○ -○ 片剂 1;△ -△ 片剂 2 ;● -● 片剂 3Fig 1 Meanvaluesofserumdrugconcentration timecurveofasaronein 18healthyvolunteersafteroral 12 0mgandintravenousadministra tion 16mgasarone○ -○ tablet 1;△ -△ tablet 2 ;● -● tablet 3表 2 细辛脑片剂 1、片剂 2和针剂生物利用度参数Tab 2 Bioavailabilityparametersofasaronein 18healthyvol untecrsafteroraltablet 1andtablet 2andintravenousinjectionadministration参 数片剂 1(12 0mg) 片剂 2 (12 0mg) 针剂 (16mg)Tmax/h 1.0 6± 0 .161.0 8± 0 .19Cmax/μg·L- 1 5 3 .7± 2 5 .2 81.8± 3 5 .1AUC0→∞/ μg·h·L- 1 14 4.3± 67.12 5 8.0± 112 .83 3 8.5± 69.1F/% 5 .4± 1.69.7± 2 .5片剂 2与片剂 1不等效 (P <0 .0 5 ) ,相对生物利用度为 (181.9± 15 .2 ) % ,证明片剂 2经生产工艺改造后生物利用度比原生产工艺提高了 81.9%。4 讨论细辛脑为脂溶性极强的化合物 ,且熔点低 ,制成生物利用度高的口服固体制剂有一定困难。曾将细辛脑制成胶囊剂 ,结果其生物利用度为片剂的5 0 % ,绝对生物利用度仅为 2 .7%。片剂 2是在片剂1的基础上采用了表面活性剂 ,结果其生物利用度提高了 81.9%。难溶性药物疏水性强 ,与体液接触时 ,有效表面积比表面积小。加入适量表面活性剂后 ,可使药物与胃肠液间的接触变小 ,表面张力降低 ,加强药物的湿润性 ,使有效表面积增大 ,最终药物溶出速率和吸收随之提高<4 > 。虽然片剂 2的生物利用度比片剂 1提高许多 ,但是其绝对生物利用度仍很低 ,仅 9.7% ,有待进一步研究。细辛脑片剂的生物利用度@吴闯$广西医科大学第一附属医院!广西南宁530 027细辛脑;;
生物利用度;;反相高效液相色谱法目的:比较两种不同生产工艺的细辛脑片剂生物利用度。方法:18名健康志愿者单剂量随机交叉口服不同生产工艺的片剂1和片剂216 0mg ,及静脉注射细辛脑针剂16mg后,用反相高效液相色谱法测定细辛脑血清浓度,对AUC0～∞ ,Cmax和Tmax3个参数进行等效性检验。结果:片剂1和片剂2的绝对生物利用度分别为(5.4±1.6 ) %和(9.7±2 .5 ) % ,片剂2对片剂1的相对生物利用度为(181.9±15 .2 ) %。结论:经生产工艺改造后的片剂2生物利用度比原生产工艺片剂1提高81.9% ,但是,细辛脑片剂的绝对生物利用度仍很低。<1> 杨玉.α细辛脑片治疗148例慢性阻塞性肺疾病
.新药与临床,1986,5:210.
<2> 张扬达,周树舜,许爱球,等.α细辛脑治疗癫痫114例.新药与临床,1990,9:91.
<3> 桂常青,郑青山,孙已民,等.生物利用度等效性检验的对数直接计算法.中国临床药理学与治疗学杂志,1998,3(3):208.
<4> 梁文权.生物药剂学与药物动力学.第1版.北京:人民卫生出版社,2000.44.2 5 .2 81.8± 3 5 .1AUC0→∞/ μg·h·L- 1 14 4.3± 67.12 5 8.0± 112 .83 3 8.5± 69.1F/% 5 .4± 1.69.7± 2
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