麦冬为百合科植物ＯｐｈｉｏｐｏｇｏｎＪａｐｏｎｉｃｕｓ(Ｔｈｎｕｂ)Ｋｅｒ ｃａｗｌ的干燥块根 ,具有养阴生津 ,润肺清心之功效。用于肺燥干咳 ,津伤口渴 ,心烦失眠 ,内热消渴等症。麦冬多糖是麦冬的主要成分之一 ,具有降血糖及免疫增强作用〔1,2〕。本文采用蒽酮 -硫酸比色法测定麦冬多糖的含量 ,方法简单、可行 ,可为其制剂生产的质量控制提供参考。1 仪器与试药1.1 仪器 ＨＰ84 5 3紫外 -可见分光光度计 (美国惠普 ) ;ＴＧ32 8Ａ型电光分析天平 (上海分析天平厂 )。1.2 试药 无水葡萄糖 (ＡＲ ,中国上海曹杨第二试剂厂 )、麦冬 (购于合肥市医药公司 )、蒽酮 (ＡＲ ,中国医药集团上海化学试剂公司 )、硫酸 (ＡＲ ,新科电化学试剂厂 )、苯酚 (ＡＲ ,中国淮南市化学试剂厂 ,重蒸馏 )、活性炭 (药用 )、麦冬多糖 (自制 )。2 实验方法与结果2 .1 麦冬多糖的提取 取干燥麦冬块根 1ｋｇ用 95 %乙醇回流提取 3次 (各 90ｍｉｎ) ,每次 6倍量 ,残渣挥干溶剂后 ,再加水煎煮 3次 (90ｍｉｎ ,6 0ｍｉｎ ,6 0ｍｉｎ) ,每次 6倍量 ,合并提取液 ,过滤、加入 0 5 %活性炭脱色 2次 ,抽滤 ,减压浓缩至五分之一体积 ,滤液加 95 %乙醇使含醇量 80 %以上 ,冰箱静置过夜 ,滤过 ,得麦冬多糖粗品 ,无水乙醇洗涤数次 ,6 0℃烘干 ,即得麦冬多糖精制品。2 .2 麦冬多糖的含量测定2 .2 .1 对照品溶液的制备 精密称取干燥恒重的葡萄糖对照品 2 0ｍｇ ,加水溶解并定容至 10 0ｍｌ,作对照品溶液。2 .2 .2 供试品溶液的制备 精密称取麦冬多糖样品约 2 0ｍｇ ,加水溶解并定容至 10 0ｍｌ作为供试品溶液。2 .2 .3 测定波长的选择 取对照品溶液 0 0、0 5ｍｌ置具塞试管内 ,分别加水 1 0ｍｌ、0 5ｍｌ,加入新鲜配制的蒽酮试剂(0 2 %蒽酮的 80 %硫酸溶液 ) 8 0ｍｌ沸水浴加热 10ｍｉｎ ,迅速置冰水浴冷却 10ｍｉｎ后 ,以首管为空白 ,在 4 6 0～ 6 6 0ｎｍ处扫描 ,结果在 (6 2 6± 1)ｎｍ处有最大吸收 ,因此 ,选择测定波长为 6 2 6ｎｍ。结果见图 1。图 1 葡萄糖光谱吸收曲线2 .2 .4 工作曲线的建立 精密称取干燥恒重的葡萄糖适量 ,加水溶解使成 2 30 0ｍｇ·Ｌ-1,精密量取 0、0 1、0 2、0 4、0 6、0 8、1 0ｍｌ置具塞试管内 ,加水至 1 0ｍｌ,加入新鲜配制的蒽酮试剂 (0 2 %蒽酮的 80 %硫酸溶液 ) 8 0ｍｌ,至沸水浴加热10ｍｉｎ ,迅速置冰水浴冷却 10ｍｉｎ后 ,以首管为空白 ,在波长为 6 2 6ｎｍ测定吸收度。以浓度对吸收度作工作曲线得方程为 :Ｃ =0 6 1312 +2 5 2 85×Ａ (ｒ =0 9991)。结果表明 ,葡萄糖浓度在 2 5 6～ 2 5 6ｍｇ·Ｌ-1范围内呈良好的线性关系。2 .2 .5 回收率试验 精密称取已知麦冬多糖含量的样品 4份 ,加入葡萄糖对照品溶液 ,加水溶解并定容至 10 0ｍｌ。取溶液适量 ,按 2 2 4方法操作 ,6 2 6ｎｍ处测定吸收值。代入工作曲线方程 ,计算出平均回收率为 10 2 4 6 % ,ＲＳＤ =2 0 2 %。结果见表 1。表 1 回收试验样品号 样品量(ｍｇ)加入对照品量 (ｍｇ)测得量(ｍｇ)回收率(% )1 8.361 1 1 4 .72 3 .0 2 2 7 99.742 8.77571 2 .0 2 1 .0 31 91 0 2 .1 43 6 .91 0 1 3 .82 1 .3464 1 0 4 .614 6 .1 4 991 1 .71 8.2 4 0 2 1 0 3 .34 ｘ±ｓ 1 0 2 .46± 2 .0 7ＲＳＤ 2 .0 22 .2 .6 精密度试验 从同一样品中取出相同量溶液 6份 ,测定麦冬多糖的含量 ,结果为 71 2 9%± 0 2 8% (ＲＳＤ为0 39% )。2 .2 .7 样品的含量测定 精密称取麦冬多糖精制品约 2 0ｍｇ ,加水溶解并定容至 10 0ｍｌ作为供试品。取溶液适量 ,按2 2 4方法操作 ,6 2 6ｎｍ处测定吸收值。代入工作曲线方程 ,计算出供试品麦冬多糖的含量 ,结果为 81 5 8%、6 9 1%、71 36 %、6 8 1%、82 4 5 % (ｎ =5 )。3 讨论3.1 苯酚 -硫酸和蒽酮 -硫酸比色法测定多糖的含量为两种经典方法 ,文献报道均能得到理想的结果〔3 ,4〕,但我们在试验中发现 ,在该实验条件下 ,用苯酚 -硫酸比色法 ,在 4 80～5 15ｎｍ之间出现的不稳定的吸收峰 ,因此 ,我们采用蒽酮 -硫酸比色法测定麦冬多糖的含量。3.2 蒽酮 -硫酸比色法测定多糖的含量 ,方法稳定 ,但蒽酮试剂要新鲜配制 ,葡萄糖浓度应控制在 5 0～ 2 5 0ｍｇ·Ｌ-1为宜。采用过夜的蒽酮试剂 ,葡萄糖在 5 0 0ｎｍ处也出现最大吸收 ,但在低浓度时 ,最大吸收峰不明显 ,重现性差。3.3 苯酚 -硫酸比色法出现的现象 ,我们将根据实验条件 ,选择中国药典 2 0 0 0年版一部玉竹项下的含量测定方法作进一步研究〔5〕。蒽酮-硫酸比色法测定麦冬多糖的含量@唐丽琴$安徽省立医院药剂科!合肥230001
@李矗$安徽省立医院药剂科!合肥230001
@刘圣$安徽省立医院药剂科!合肥230001
@陈礼明$安徽省立医院药剂科!合肥230001麦冬多糖;;蒽酮-硫酸比色法;;含量测定目的 建立麦冬多糖的含量测定方法。方法 采用蒽酮 -硫酸比色法。结果 6 2 6nm处有最大吸收峰 ,线性范围在2 5 6～ 2 5 6mg·L-1,平均回收率为 10 2 4 6 % (n =4 ,RSD =2 0 2 % ) ,麦冬多糖精制品的含量为 6 0 %以上。结论 该方法快速准确 ,重现性好 ,为制剂生产的质量控制提供参考1 张卫星,王乃华.麦冬多糖对四氧嘧啶糖尿病小鼠高血糖的降低作用.中草药,1993;24(1):30～1
2 余伯阳,殷 霞,张春江.麦冬多糖的免疫活性研究.中国药科大学学报,1991;22(5):286
3 林 颖,吴毓敏,吴 雯etal.天然产物中糖含量测定方法正确性的研究.天然产物研究与开发,1996;8(3):5
4 汤 军,黄 琦,徐志瑛etal.麦冬多糖的提取分离与初步分析.浙江中医学院学报,1999;23(1):59
5 国家药典委员会编.中国药典.2000年版一部,北京:化学工业出版社,2000:64安徽省 2 0 0 1年度重点科研项目 No 0 1 0 2 30 1 8以上。结论 该方法快速准确 ,重现性好 ,为制剂生产的质量控制提供参考1 张卫星,王乃华.麦冬多糖对四氧嘧啶糖尿病小鼠高血糖的降低作用.中草药,1993;24(1):30～1
2 余伯阳,殷 霞,张春江.麦冬多糖的免疫活性研究.中国药科大学学报,1991;22(5):286
3 林 颖,吴毓敏,吴 雯etal.天然产物中糖含量测定方法正确性的研究.天然产物研究与开发,1996;8(3):5
4 汤 军,黄 琦,徐志瑛etal.麦冬多糖的提取分离与初步分析.浙江中医学院学报,1999;23(1):59
5 国家药典委员会编.中国药典.2000年版一部,北京:化学工业出版社,2000:64安徽省 2 0 0 1年度重点科研项目 No 0 1 0 2 30 1 8
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